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公开(公告)号:CN115932131A
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202310059276.6
申请日:2023-01-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种肌肉组织中羰基化蛋白质的富集和鉴定方法,包括以下步骤:向肌肉组织匀浆液中加入生物素酰肼,得到生物素化蛋白粗提液;向生物素化蛋白粗提液中加入氰基硼氢化钠,静置,然后进行超滤,得到蛋白超滤液;向蛋白超滤液中加入亲和素珠,反应后纯化,然后加入D‑生物素,反应后离心,再用碳酸氢铵溶液洗涤,得到完成亲和纯化的羰基化蛋白;对完成亲和纯化的羰基化蛋白进行酶解,得到肽段样品;采用LC‑MS/MS对肽段样品进行质谱数据采集,并对采集的质谱数据进行数据库检索分析。本发明能够对羰基化蛋白进行自下而上的蛋白质组学鉴定并获得可靠的鉴定结果。