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公开(公告)号：CN106591286A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611004305.5
申请日：2016-11-15
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12N15/1003 , C12N1/14
Abstract: 本发明公开了一种提高草坪币斑病菌DNA提取质量的方法，包括如下步骤：培养皿中加入含有抗生素的MM培养基，在培养基表面铺上灭菌玻璃纸，挑取菌丝转移至培养基中间，25‑30℃黑暗条件培养7‑14d；刮取玻璃纸表面菌丝20‑50mg置于离心管中，通风干燥，往离心管中加入钢珠，液氮冷冻、磨碎菌丝；采用经典CTAB法提取得到基因组DNA，将基因组DNA溶解于TE缓冲液，静置24‑48h，离心，去除不溶于TE缓冲液的杂质。本发明通过使用MM培养基降低币斑病菌菌丝组织中的多糖含量，从而提高病原菌基因组DNA的提取质量，无需昂贵的仪器设备或DNA提取试剂盒，DNA提取质量显著提高、稳定性好且经济高效。
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公开(公告)号：CN106591286B
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201611004305.5
申请日：2016-11-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高草坪币斑病菌DNA提取质量的方法，包括如下步骤：培养皿中加入含有抗生素的MM培养基，在培养基表面铺上灭菌玻璃纸，挑取菌丝转移至培养基中间，25‑30℃黑暗条件培养7‑14d；刮取玻璃纸表面菌丝20‑50mg置于离心管中，通风干燥，往离心管中加入钢珠，液氮冷冻、磨碎菌丝；采用经典CTAB法提取得到基因组DNA，将基因组DNA溶解于TE缓冲液，静置24‑48h，离心，去除不溶于TE缓冲液的杂质。本发明通过使用MM培养基降低币斑病菌菌丝组织中的多糖含量，从而提高病原菌基因组DNA的提取质量，无需昂贵的仪器设备或DNA提取试剂盒，DNA提取质量显著提高、稳定性好且经济高效。
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公开(公告)号：CN105624049A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201610170501.3
申请日：2016-03-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种草坪币斑病菌的分离方法，包括如下步骤：病样采集：切取具有典型币斑病症状的病健交接处植株及土壤样本作为病样；病样保湿培养；病原菌分离：使用接种针挑取在病样表面长出的细丝状菌丝，置于APDA培养基上，22-25℃黑暗条件培养2d；病原菌纯化：待气生菌丝长出后，切取菌落边缘的菌丝尖端，转入新的APDA培养基上，22-25℃黑暗条件培养3-5d，得到目的病原菌。本发明通过对病样进行保湿培养前处理，并结合酸化PDA培养基的使用，可解决币斑病菌分离过程中各种非目标真菌污染的问题，且操作简单，整个过程无需严格的消毒杀菌操作。与传统币斑病菌分离方法相比，分离效率及成功率显著提高。
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公开(公告)号：CN105624049B
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201610170501.3
申请日：2016-03-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种草坪币斑病菌的分离方法，包括如下步骤：病样采集：切取具有典型币斑病症状的病健交接处植株及土壤样本作为病样；病样保湿培养；病原菌分离：使用接种针挑取在病样表面长出的细丝状菌丝，置于APDA培养基上，22‑25℃黑暗条件培养2d；病原菌纯化：待气生菌丝长出后，切取菌落边缘的菌丝尖端，转入新的APDA培养基上，22‑25℃黑暗条件培养3‑5d，得到目的病原菌。本发明通过对病样进行保湿培养前处理，并结合酸化PDA培养基的使用，可解决币斑病菌分离过程中各种非目标真菌污染的问题，且操作简单，整个过程无需严格的消毒杀菌操作。与传统币斑病菌分离方法相比，分离效率及成功率显著提高。
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