一种多肽毒素与化学农药的组合制剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116098153A

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202211536052.1

    申请日:2022-12-02

    Abstract: 本发明公开了一种多肽毒素与化学农药的组合制剂及其制备方法和应用,所述组合制剂包括拟环纹豹蛛毒素PPTX‑22和氯虫苯甲酰胺,所述拟环纹豹蛛毒素PPTX‑22其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过分析作用于昆虫钠离子通道的蜘蛛毒素PPTX‑22与拟除虫菊酯杀虫剂氯虫苯甲酰胺作用机制的异同点,并测试蜘蛛毒素与菊酯类杀虫剂联合作用的机制发现,毒素PPTX‑22的作用位点特异,与氯虫苯甲酰胺协同调控昆虫钠离子通道,在靶标层面形成增效,并据此获得了对农业害虫增效的毒素‑杀虫剂组合制剂。

    拟环纹豹蛛E家族杀虫基因及其编码的成熟肽与应用

    公开(公告)号:CN108929876B

    公开(公告)日:2022-03-29

    申请号:CN201810868218.7

    申请日:2018-08-02

    Abstract: 本发明公开了一种拟环纹豹蛛E家族杀虫基因及其编码的成熟肽与应用,该拟环纹豹蛛E家族杀虫基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑4所示;拟环纹豹蛛E家族杀虫基因编码的成熟肽的氨基酸如SEQ ID NO.9‑12所示。本发明利用生物信息学分析方法,对拟环纹豹蛛转录组数据库中的基因进行筛选,获得一类相似的拟环纹豹蛛毒素的候选基因,将该基因构建到原核表达载体pET‑32a(+)中,即可获得该基因编码的杀虫肽,该杀虫肽作为全新的杀虫基因资源,具有不同于Bt毒素的杀虫机制,对拓展具有生物活性的新型杀虫基因资源,降低现有Bt毒素广泛使用存在的各类安全风险,减少杀虫剂的使用具有重要的科学及现实意义。

    一种快速检测褐飞虱对苯基吡唑类杀虫剂抗药性的方法

    公开(公告)号:CN107475360B

    公开(公告)日:2021-04-16

    申请号:CN201710186158.6

    申请日:2017-03-21

    Abstract: 本发明基于环介导恒温扩增技术(LAMP)建立一种褐飞虱对苯基吡唑类杀虫剂抗药性的快速检测方法,属于抗药性综合治理和褐飞虱综合防治范畴。该检测方法通过在褐飞虱对苯基吡唑类杀虫剂抗性靶标变异个体(A302S)的γ‑氨基丁酸受体(GABA receptor)上设计2对特异性引物,进行LAMP扩增,根据反应产物颜色判定是否为褐飞虱对苯基吡唑类杀虫剂的抗性个体。其特征在于如下步骤实现:提取单头褐飞虱2‑3龄若虫基因组DNA;所使用的特异性引物;LAMP反应体系;LAMP反应程序;扩增产物的颜色检测。该方法稳定性高、周期短、灵敏度高,适合褐飞虱对苯基吡唑类杀虫剂抗性的早期检测。

    一种带有绿色荧光蛋白标签的非洲爪蟾卵母细胞表达载体pGH19-EGFP及应用

    公开(公告)号:CN110117612A

    公开(公告)日:2019-08-13

    申请号:CN201810109496.4

    申请日:2018-02-05

    Abstract: 本发明公开了一种带有绿色荧光蛋白标签的可用于非洲爪蟾卵母细胞表达的载体pGH19-EGFP及应用,通过分子生物学手段对pGH19质粒进行改造,开发成一种含有增强型绿色荧光蛋白标签且适合非洲爪蟾卵母细胞表达的载体pGH19-EGFP。该载体既可正常表达目的基因,又可通过荧光显微镜或共聚焦显微镜检测带有绿色荧光标签的靶蛋白的分布情况和表达模式,为非洲爪蟾卵母细胞表达的蛋白情况提供更直观简洁的检测方式;可以实时观察蛋白表达的时空动态;对于目的蛋白后期的提取、纯化、鉴定和功能性分析,仅需使用通用型抗体即可检测到靶标蛋白的表达情况,大大简化了实验流程,节省了实验时间和经济成本。

    拟环纹豹蛛E家族杀虫基因及其编码的成熟肽与应用

    公开(公告)号:CN108929876A

    公开(公告)日:2018-12-04

    申请号:CN201810868218.7

    申请日:2018-08-02

    Abstract: 本发明公开了一种拟环纹豹蛛E家族杀虫基因及其编码的成熟肽与应用,该拟环纹豹蛛E家族杀虫基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-4所示;拟环纹豹蛛E家族杀虫基因编码的成熟肽的氨基酸如SEQ ID NO.9-12所示。本发明利用生物信息学分析方法,对拟环纹豹蛛转录组数据库中的基因进行筛选,获得一类相似的拟环纹豹蛛毒素的候选基因,将该基因构建到原核表达载体pET-32a(+)中,即可获得该基因编码的杀虫肽,该杀虫肽作为全新的杀虫基因资源,具有不同于Bt毒素的杀虫机制,对拓展具有生物活性的新型杀虫基因资源,降低现有Bt毒素广泛使用存在的各类安全风险,减少杀虫剂的使用具有重要的科学及现实意义。

    褐飞虱对吡虫啉靶标抗性的分子检测方法

    公开(公告)号:CN1271214C

    公开(公告)日:2006-08-23

    申请号:CN200310118523.8

    申请日:2003-12-12

    Inventor: 刘泽文 韩召军

    Abstract: 本发明褐飞虱对吡虫啉靶标抗性的分子生物学检测方法属于抗药性综合治理和褐飞虱综合防治范畴。所使用的特异性引物P:5′-ACA CGT CCC CAGTGA GCA-3′,Q:5′-GTC GGT GGA ATG ATC TCT GC-3′,A:5′-ggggggggccGTT TGG ATC CTG TAC ATC-3′,B:5′-ggggggggcg CAT GAT TGC CGT CGT-3′。25μL反应体系:2.5 μL 10×Buffer,1.25 U Ex-Taq DNA polymerase,2.5μL单头褐飞虱基因组DNA,dNTPs各0.2mmol/L,MgCl21mmol/L,引物各1μmol/L,加双蒸水至反应总体积为25μL。PCR扩增产物可以直接凝胶电泳检测。该方法稳定性高、周期短、灵敏度高。

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