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公开(公告)号：CN113174392B
公开(公告)日：2021-12-28
申请号：CN202110381468.X
申请日：2021-04-09
Applicant: 华南生物医药研究院
IPC: C12N15/47 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N5/10 , C12N7/01 , A61K39/205 , A61K39/39 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其是涉及一种狂犬病毒的重组基因、重组假病毒及其构建方法和应用。所述重组基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将重组基因RABV‑G‑N置换慢病毒包膜质粒中的VSV‑G，构建重组包膜质粒pCMV‑RABV‑G‑N，然后将重组包膜质粒与含绿色荧光蛋白报告基因的pLV‑eGFP和psPAX2共转染人胚胎肾细胞HEK‑293T即得到重组假病毒。本发明的重组基因具有与天然狂犬病毒的生物学特性，可以提高假病毒免疫原性，并且制备的重组假病毒包装滴度高，可以替代天然狂犬病毒进行血清中和抗体滴度的评价。
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公开(公告)号：CN113174392A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110381468.X
申请日：2021-04-09
Applicant: 华南生物医药研究院
IPC: C12N15/47 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N5/10 , C12N7/01 , A61K39/205 , A61K39/39 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其是涉及一种狂犬病毒的重组基因、重组假病毒及其构建方法和应用。所述重组基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将重组基因RABV‑G‑N置换慢病毒包膜质粒中的VSV‑G，构建重组包膜质粒pCMV‑RABV‑G‑N，然后将重组包膜质粒与含绿色荧光蛋白报告基因的pLV‑eGFP和psPAX2共转染人胚胎肾细胞HEK‑293T即得到重组假病毒。本发明的重组基因具有与天然狂犬病毒的生物学特性，可以提高假病毒免疫原性，并且制备的重组假病毒包装滴度高，可以替代天然狂犬病毒进行血清中和抗体滴度的评价。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116082524A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202310033146.5
申请日：2023-01-10
Applicant: 华南生物医药研究院
IPC: C07K19/00 , A61K39/187 , A61P31/20 , C12N15/62 , C12N15/866 , C12N5/10 , C12N7/01 , C07K16/08
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒P30‑P54重组融合蛋白及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明将P30‑P54的基因序列进行了优化设计，并将优化好的P54、P30序列进行了前后顺序置换，从而大大提高了蛋白的表达量。在此基础上，本发明还构建了重组质粒和杆状病毒，将杆状病毒转染SF9细胞，获得表达非洲猪瘟病毒P30‑P54融合蛋白，为构建表达非洲猪瘟病毒P54‑P30重组融合蛋白的亚单位疫苗奠定了基础。该重组融合蛋白还可用于检测非洲猪瘟病毒抗体，基于该非洲猪瘟病毒P30‑P54重组融合蛋白的特异性，可将其应用于非洲猪瘟病毒抗体检测的研发，从而推动我国非洲猪瘟病毒抗体检测事业的发展。
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公开(公告)号：CN119040351B
公开(公告)日：2025-03-14
申请号：CN202411291533.X
申请日：2024-09-14
Applicant: 华南生物医药研究院
IPC: C12N15/47 , C07K14/145 , C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/867 , A61K39/205 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种狂犬病毒G蛋白病毒样粒子的重组基因、病毒样粒子及其构建方法和应用。所述重组基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明基于慢病毒表达系统，优化设计狂犬病毒包膜蛋白，将其跨膜结构置换成蓝耳病毒的GP5蛋白的跨膜结构，制备出的病毒样粒子除了具有与天然狂犬病毒的生物学特性，而且只包含产生中和抗体的单一片段G蛋白，安全有效，免疫原性高，并且制备的病毒样粒子分泌表达量高，可作为新型病毒狂犬病毒疫苗的侯选疫苗。
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公开(公告)号：CN119040351A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411291533.X
申请日：2024-09-14
Applicant: 华南生物医药研究院
IPC: C12N15/47 , C07K14/145 , C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/867 , A61K39/205 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种狂犬病毒G蛋白病毒样粒子的重组基因、病毒样粒子及其构建方法和应用。所述重组基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明基于慢病毒表达系统，优化设计狂犬病毒包膜蛋白，将其跨膜结构置换成蓝耳病毒的GP5蛋白的跨膜结构，制备出的病毒样粒子除了具有与天然狂犬病毒的生物学特性，而且只包含产生中和抗体的单一片段G蛋白，安全有效，免疫原性高，并且制备的病毒样粒子分泌表达量高，可作为新型病毒狂犬病毒疫苗的侯选疫苗。
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公开(公告)号：CN118812670A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202410900069.3
申请日：2024-07-05
Applicant: 华南生物医药研究院 , 广州伯尼兹生物科技有限公司
IPC: C07K14/145 , C12P21/02
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种提高哺乳动物细胞狂犬病毒VLP蛋白表达量的生产方法。该方法包括步骤：S1种子细胞接种及培养：将表达狂犬病毒VLP蛋白的哺乳动物细胞种子细胞在摇瓶中利用无血清培养液培养后，接种至生物反应器中，继续用无血清培养液培养；S2蛋白收获及换液：待细胞生长参数和培养液参数达到要求时，收集培养液上清，同时加入等量的新的培养液，直至细胞生长参数达不到要求参数时，收集所有培养液离心后取上清。该方法使用生物反应器全悬浮无血清培养和批量收获相结合生产狂犬病毒VLP，有效提高细胞的表达水平，降低了疫苗的制造成本，为实现疫苗的规模化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116082524B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310033146.5
申请日：2023-01-10
Applicant: 华南生物医药研究院
IPC: C07K19/00 , A61K39/187 , A61P31/20 , C12N15/62 , C12N15/866 , C12N5/10 , C12N7/01 , C07K16/08
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒P30‑P54重组融合蛋白及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明将P30‑P54的基因序列进行了优化设计，并将优化好的P54、P30序列进行了前后顺序置换，从而大大提高了蛋白的表达量。在此基础上，本发明还构建了重组质粒和杆状病毒，将杆状病毒转染SF9细胞，获得表达非洲猪瘟病毒P30‑P54融合蛋白，为构建表达非洲猪瘟病毒P54‑P30重组融合蛋白的亚单位疫苗奠定了基础。该重组融合蛋白还可用于检测非洲猪瘟病毒抗体，基于该非洲猪瘟病毒P30‑P54重组融合蛋白的特异性，可将其应用于非洲猪瘟病毒抗体检测的研发，从而推动我国非洲猪瘟病毒抗体检测事业的发展。
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