一种干酪乳杆菌降解亚硝酸盐的电子供体蛋白及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN105039470A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510472248.2

    申请日:2015-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌降解亚硝酸盐的电子供体蛋白及其制备方法和应用,具体步骤为:(1)将干酪乳杆菌鼠李糖亚种培养后,制成种子液,并接种至诱导培养基A中,静止诱导培养,得诱导工作发酵剂;(2)将诱导工作发酵剂接种至诱导培养基B中,静止诱导培养,得含降解亚硝酸盐的电子供体蛋白培养液;(3)将含降解亚硝酸盐的电子供体蛋白的培养液进行离心,清洗后离心,得菌体;(4)在菌体中加入提电子供体蛋白缓冲液,加入溶菌酶,混匀后破壁,破壁溶液经离心后的上清液为降解亚硝酸盐的电子供体粗蛋白液。粗蛋白液经纯化得到电子供体蛋白。所述电子供体蛋白与亚硝酸盐还原酶的混合液可快速高效降解亚硝酸盐。

    一种芽孢杆菌及其高密度培养方法

    公开(公告)号:CN105112326A

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201510512128.0

    申请日:2015-08-19

    Abstract: 本发明公开了一种芽孢杆菌及其高密度培养方法,该菌株为芽孢杆菌(Bacillus sp.)13002,保藏编号为CGMCC No.7431。培养方法为:(1)将处于对数期生长的芽孢杆菌13002的菌悬液于种子培养基中,进行活化培养,得到种子培养液;(2)将种子培养液接种于发酵培养基中,进行发酵培养至16h~36h收集发酵培养液;(3)将发酵培养液离心后收集菌泥,用生理盐水清洗,加入菌种保护剂后,混合均匀后,进行干燥,得菌粉。本发明冻干后使其活菌总数达0.730×1011CFU/g以上,较好地克服了培养过程中产酸抑制菌体生长的问题,可较大程度地提高芽孢杆菌13002的生长率。

    一种芽孢杆菌及其高密度培养方法

    公开(公告)号:CN105112326B

    公开(公告)日:2019-08-20

    申请号:CN201510512128.0

    申请日:2015-08-19

    Abstract: 本发明公开了一种芽孢杆菌及其高密度培养方法,该菌株为芽孢杆菌(Bacillus sp.)13002,保藏编号为CGMCC No.7431。培养方法为:(1)将处于对数期生长的芽孢杆菌13002的菌悬液于种子培养基中,进行活化培养,得到种子培养液;(2)将种子培养液接种于发酵培养基中,进行发酵培养至16h~36h收集发酵培养液;(3)将发酵培养液离心后收集菌泥,用生理盐水清洗,加入菌种保护剂后,混合均匀后,进行干燥,得菌粉。本发明冻干后使其活菌总数达0.730×1011CFU/g以上,较好地克服了培养过程中产酸抑制菌体生长的问题,可较大程度地提高芽孢杆菌13002的生长率。

    一种干酪乳杆菌降解亚硝酸盐的电子供体蛋白及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN105039470B

    公开(公告)日:2018-10-09

    申请号:CN201510472248.2

    申请日:2015-08-03

    Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌降解亚硝酸盐的电子供体蛋白及其制备方法和应用,具体步骤为:(1)将干酪乳杆菌鼠李糖亚种培养后,制成种子液,并接种至诱导培养基A中,静止诱导培养,得诱导工作发酵剂;(2)将诱导工作发酵剂接种至诱导培养基B中,静止诱导培养,得含降解亚硝酸盐的电子供体蛋白培养液;(3)将含降解亚硝酸盐的电子供体蛋白的培养液进行离心,清洗后离心,得菌体;(4)在菌体中加入提电子供体蛋白缓冲液,加入溶菌酶,混匀后破壁,破壁溶液经离心后的上清液为降解亚硝酸盐的电子供体粗蛋白液。粗蛋白液经纯化得到电子供体蛋白。所述电子供体蛋白与亚硝酸盐还原酶的混合液可快速高效降解亚硝酸盐。

    一种蜡样芽孢杆菌亚硝酸盐还原酶及基因和应用

    公开(公告)号:CN105063066A

    公开(公告)日:2015-11-18

    申请号:CN201510487484.1

    申请日:2015-08-10

    Abstract: 本发明公开了一种蜡样芽孢杆菌亚硝酸盐还原酶及基因和应用,本发明是利用PCR技术将蜡样芽孢杆菌LJ01中的亚硝酸盐还原酶(简称NiR)基因进行克隆并在大肠杆菌中进行了诱导表达,通过对加IPTG诱导含空质粒BL21、不加IPTG诱导含重组质粒BL21以及加IPTG诱导含重组质粒BL21的细胞进行超声破碎提取粗酶液,对其进行SDS-PAGE检测重组蛋白的表达,利用亲和层析作用纯化得到高纯度的重组蛋白,解决了从蜡样芽孢杆菌中分离出纯度和含量较高NiR的难题。得到的大量的NiR重组蛋白可以用于食品中的亚硝酸盐的降解;也可用于非酸性环境中亚硝酸盐的降解及养殖水体中亚硝酸盐的降解。

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