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公开(公告)号:CN104561091A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201410788129.3
申请日:2014-12-17
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明涉及一种光学分析检测CHO细胞增殖的方法及应用,步骤如下:(1)将pEGFP-N2转化大肠杆菌DH5α,摇菌,提取无内毒素质粒;(2)将CHO细胞接种于孔板中,待细胞生长密度达70%时,采用脂质体转染法将步骤(1)的质粒瞬时转染到CHO细胞中;(3)采用遗传霉素G418对转染细胞进行筛选,至少经过30代以上的抗性筛选即可获得稳定表达GFP的细胞株;(4)扩增培养稳定表达GFP的细胞株,消化细胞并采用台盼蓝染色对细胞计数及采用酶标仪检测荧光强度,基于细胞内GFP荧光强度和细胞数目呈线性关系,判断CHO细胞增殖情况。本发明方法具有易操作性、检测结果准确性、良好重复性、敏感度高和无毒等优势。