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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103396481B
公开(公告)日：2015-06-03
申请号：CN201310303381.6
申请日：2013-07-18
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/70 , G01N33/577
CPC classification number: Y02A50/53
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种二型登革热病毒NS1蛋白的重链单域抗体及其制备方法和应用。发明采用羊驼非免疫重链单域抗体库，用重组表达的登革热病毒NS1蛋白通过多轮生物筛选，采用ELISA法挑选得到能特异性结合的噬菌体单克隆，并进行DNA序列测定，然后转化至大肠杆菌中表达，即得到重链单域抗体。筛选得到的重链单域抗体能在大肠杆菌中高效表达，并能用于制备胶体金检测试剂盒检测二型登革热病毒感染，检测准确性更高。
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公开(公告)号：CN103396481A
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201310303381.6
申请日：2013-07-18
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/70 , G01N33/577
CPC classification number: Y02A50/53
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种二型登革热病毒NS1蛋白的重链单域抗体及其制备方法和应用。发明采用羊驼非免疫重链单域抗体库，用重组表达的登革热病毒NS1蛋白通过多轮生物筛选，采用ELISA法挑选得到能特异性结合的噬菌体单克隆，并进行DNA序列测定，然后转化至大肠杆菌中表达，即得到重链单域抗体。筛选得到的重链单域抗体能在大肠杆菌中高效表达，并能用于制备胶体金检测试剂盒检测二型登革热病毒感染，检测准确性更高。
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公开(公告)号：CN103088050B
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201310008341.9
申请日：2013-01-09
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种成熟人β防御素-2及其制备方法，该方法是将谷氨酸残基引入人β防御素-2的成熟序列和前肽之间，通过重组表达得到人β防御素-2前原肽，经镍柱亲和层析纯化得到较高纯度的人β防御素-2前原肽，然后用带His-tag的重组地衣芽孢杆菌谷氨酸特异性内肽酶进行酶解处理，将前肽及亲和标签切除，并再次通过亲和层析去除重组地衣芽孢杆菌谷氨酸特异性内肽酶和其他杂质，纯度较高的成熟人β防御素-2存在于穿过液中。本发明所述的成熟HBD-2制备方法具有高效、安全无毒性、成本低和纯化工艺简单的优点，从而为成熟HBD-2的大规模制备及其应用奠定基础。
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公开(公告)号：CN104561091A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410788129.3
申请日：2014-12-17
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明涉及一种光学分析检测CHO细胞增殖的方法及应用，步骤如下：(1)将pEGFP-N2转化大肠杆菌DH5α，摇菌，提取无内毒素质粒；(2)将CHO细胞接种于孔板中，待细胞生长密度达70％时，采用脂质体转染法将步骤(1)的质粒瞬时转染到CHO细胞中；(3)采用遗传霉素G418对转染细胞进行筛选，至少经过30代以上的抗性筛选即可获得稳定表达GFP的细胞株；(4)扩增培养稳定表达GFP的细胞株，消化细胞并采用台盼蓝染色对细胞计数及采用酶标仪检测荧光强度，基于细胞内GFP荧光强度和细胞数目呈线性关系，判断CHO细胞增殖情况。本发明方法具有易操作性、检测结果准确性、良好重复性、敏感度高和无毒等优势。
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公开(公告)号：CN103088050A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310008341.9
申请日：2013-01-09
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种成熟人β防御素-2及其制备方法，该方法是将谷氨酸残基引入人β防御素-2的成熟序列和前肽之间，通过重组表达得到人β防御素-2前原肽，经镍柱亲和层析纯化得到较高纯度的人β防御素-2前原肽，然后用带His-tag的重组地衣芽孢杆菌谷氨酸特异性内肽酶进行酶解处理，将前肽及亲和标签切除，并再次通过亲和层析去除重组地衣芽孢杆菌谷氨酸特异性内肽酶和其他杂质，纯度较高的成熟人β防御素-2存在于穿过液中。本发明所述的成熟HBD-2制备方法具有高效、安全无毒性、成本低和纯化工艺简单的优点，从而为成熟HBD-2的大规模制备及其应用奠定基础。
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