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公开(公告)号：CN103881986B
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201410047870.4
申请日：2014-02-11
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种不动杆菌的ZEN毒素降解酶Oxa及其编码基因与应用。本发明中的不动杆菌的ZEN毒素降解酶Oxa的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。不动杆菌的ZEN毒素降解酶Oxa的编码基因A4-Oxa的核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示。本发明的不动杆菌的ZEN毒素降解酶Oxa对真菌毒素玉米赤霉烯酮有较强的降解能力；原核重组表达的Oxa酶可在12h内降解30%以上的ZEN毒素。本发明确定了Acinetobacter sp.SM04降解玉米赤霉烯酮毒素的非过氧化物酶编码序列，即A4-Oxa基因，为将来研究酶的活性位点和通过定点突变Oxa酶奠定了基础。
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公开(公告)号：CN103881991B
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201410047866.8
申请日：2014-02-11
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种可降解玉米赤霉烯酮毒素的非过氧化物酶酶组分的分离方法。本发明中不动杆菌粗酶液先经阴离子葡聚糖凝胶柱纯化，以15～25mM磷酸钠盐缓冲液进行梯度洗脱；再经过阳离子葡聚糖凝胶柱纯化，以10～30mMTris-HCl缓冲液洗脱；再次经阴离子葡聚糖凝胶柱纯化，以15～25mM磷酸钠盐缓冲液进行梯度洗脱，最后得到可降解ZEN毒素的非过氧化物酶酶组分。获得的降解ZEN非过氧化物酶酶组分对真菌毒素玉米赤霉烯酮有较强的降解能力，不需要双氧水的协同作用下，在12h内可降解60%以上的ZEN，为将来研究非过氧化物酶降解ZEN毒素及其应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104017848A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410231528.X
申请日：2014-05-28
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种利用水蓼促进酿酒酵母分泌表达人β防御素3的方法。该方法包括如下步骤：制备重组酿酒酵母INVSC1/pYα-hBD-3的种子液体；将种子液体接种于水蓼生长培养基中培养，收集菌体；在将菌体接种于水蓼诱导培养基中培养，收集上清液；然后进行抑菌试验，以抑菌圈直径的大小表示抑菌效果。本发明提供了一种新颖、低成本、高分泌量的生长培养基和诱导培养基，提高了重组酿酒酵母INVSC1/pYα-hBD-3分泌表达人β防御素3的能力。本发明的生长及诱导培养基中的碳氮比的搭配对酿酒酵母的生长和蛋白分泌表达非常有利，明显优于现有的培养方法，为重组酿酒酵母的工业化和产业化奠定更坚实的基础。
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公开(公告)号：CN103451115A
公开(公告)日：2013-12-18
申请号：CN201310356776.2
申请日：2013-08-15
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于食品处理领域，公开了一种利用重组毕赤酵母菌降解食品中玉米赤霉烯酮的方法。该方法包含如下具体步骤：（1）制备得到重组毕赤酵母菌GS115/pPIC9K-A4-Prx；将重组菌接种于BMGY培养基中，振荡培养至OD600为2～6，离心收集菌体；（2）用无菌BMMY液体培养基将菌体重悬，控制菌悬液OD600值为0.9～1.1；28～30℃，200～250r/min下每24h添加甲醇，连续诱导培养3d后，室温离心收取上清液，即得到重组过氧化物A4-Prx粗酶液；（3）将步骤（2）的粗酶液与食品样品液混合，反应后，即得到降解玉米赤霉烯酮后的食品样品液，其玉米赤霉烯酮降解率高达70%以上。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104017848B
公开(公告)日：2017-04-05
申请号：CN201410231528.X
申请日：2014-05-28
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种利用水蓼促进酿酒酵母分泌表达人β防御素3的方法。该方法包括如下步骤：制备重组酿酒酵母INVSC1/pYα‑hBD‑3的种子液体；将种子液体接种于水蓼生长培养基中培养，收集菌体；在将菌体接种于水蓼诱导培养基中培养，收集上清液；然后进行抑菌试验，以抑菌圈直径的大小表示抑菌效果。本发明提供了一种新颖、低成本、高分泌量的生长培养基和诱导培养基，提高了重组酿酒酵母INVSC1/pYα‑hBD‑3分泌表达人β防御素3的能力。本发明的生长及诱导培养基中的碳氮比的搭配对酿酒酵母的生长和蛋白分泌表达非常有利，明显优于现有的培养方法，为重组酿酒酵母的工业化和产业化奠定更坚实的基础。
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公开(公告)号：CN103436575A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310357119.X
申请日：2013-08-15
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于微生物发酵技术领域，公开了一种毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基及高密度发酵方法。该培养基配方为：胰蛋白胨19～21g/L，酵母浸膏9～11g/L，磷酸缓冲液终浓度100mmol/L，无氨基氮源12.8～14.8g/L，生物素4×10-4g/L，甘氨酸0.05～0.15wt%和体积浓度为0.5％的甲醇，pH为6～8。本发明还公开了一种基于上述毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基的高密度发酵方法，利用本发酵方法发酵毕赤酵母重组菌，可获得高达130mg/L以上的重组蛋白表达量。
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公开(公告)号：CN103436575B
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201310357119.X
申请日：2013-08-15
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于微生物发酵技术领域，公开了一种毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基及高密度发酵方法。该培养基配方为：胰蛋白胨19～21g/L，酵母浸膏9～11g/L，磷酸缓冲液终浓度100mmol/L，无氨基氮源12.8～14.8g/L，生物素4×10-4g/L，甘氨酸0.05～0.15wt%和体积浓度为0.5％的甲醇，pH为6～8。本发明还公开了一种基于上述毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基的高密度发酵方法，利用本发酵方法发酵毕赤酵母重组菌，可获得高达130mg/L以上的重组蛋白表达量。
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公开(公告)号：CN103881991A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410047866.8
申请日：2014-02-11
Applicant: 华南理工大学
CPC classification number: C12N9/18 , A23K20/189 , A23L5/25
Abstract: 本发明公开一种可降解玉米赤霉烯酮毒素的非过氧化物酶酶组分的分离方法。本发明中不动杆菌粗酶液先经阴离子葡聚糖凝胶柱纯化，以15～25mM磷酸钠盐缓冲液进行梯度洗脱；再经过阳离子葡聚糖凝胶柱纯化，以10～30mMTris-HCl缓冲液洗脱；再次经阴离子葡聚糖凝胶柱纯化，以15～25mM磷酸钠盐缓冲液进行梯度洗脱，最后得到可降解ZEN毒素的非过氧化物酶酶组分。获得的降解ZEN非过氧化物酶酶组分对真菌毒素玉米赤霉烯酮有较强的降解能力，不需要双氧水的协同作用下，在12h内可降解60%以上的ZEN，为将来研究非过氧化物酶降解ZEN毒素及其应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN103881986A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410047870.4
申请日：2014-02-11
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种不动杆菌的ZEN毒素降解酶Oxa及其编码基因与应用。本发明中的不动杆菌的ZEN毒素降解酶Oxa的氨基酸序列如SEQ？ID？NO.6所示。不动杆菌的ZEN毒素降解酶Oxa的编码基因A4-Oxa的核苷酸序列如SEQ？IDNO.5所示。本发明的不动杆菌的ZEN毒素降解酶Oxa对真菌毒素玉米赤霉烯酮有较强的降解能力；原核重组表达的Oxa酶可在12h内降解30%以上的ZEN毒素。本发明确定了Acinetobacter？sp.SM04降解玉米赤霉烯酮毒素的非过氧化物酶编码序列，即A4-Oxa基因，为将来研究酶的活性位点和通过定点突变Oxa酶奠定了基础。
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