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公开(公告)号:CN103436575A
公开(公告)日:2013-12-11
申请号:CN201310357119.X
申请日:2013-08-15
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于微生物发酵技术领域,公开了一种毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基及高密度发酵方法。该培养基配方为:胰蛋白胨19~21g/L,酵母浸膏9~11g/L,磷酸缓冲液终浓度100mmol/L,无氨基氮源12.8~14.8g/L,生物素4×10-4g/L,甘氨酸0.05~0.15wt%和体积浓度为0.5%的甲醇,pH为6~8。本发明还公开了一种基于上述毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基的高密度发酵方法,利用本发酵方法发酵毕赤酵母重组菌,可获得高达130mg/L以上的重组蛋白表达量。
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公开(公告)号:CN102618517A
公开(公告)日:2012-08-01
申请号:CN201210089260.1
申请日:2012-03-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了不动杆菌的ZEN毒素降解酶及其编码基因与应用。不动杆菌的ZEN毒素降解酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。不动杆菌的ZEN毒素降解酶的编码基因的序列如SEQ ID NO.5所示。本发明的不动杆菌ZEN毒素降解酶对真菌毒素玉米赤霉烯酮有较强的降解能力,可在12h内将90%以上的ZEN降解成低雌激素活性产物,不生成玉米赤霉烯酮、玉米赤霉醇等高雌激素活性类似物,具有真正的脱毒效果。本发明确定了Acinetobacter sp.SM04的玉米赤霉烯酮毒素降解酶编码序列,即Prx基因,为将来研究酶的活性位点和通过定点突变改变Prx酶活奠定了基础。
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公开(公告)号:CN102586256A
公开(公告)日:2012-07-18
申请号:CN201210012016.5
申请日:2012-01-16
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了人β-防御素3在酵母菌表达系统中的表达方法,载体质粒为pPIC9k,目的蛋白为45个氨基酸,导入前采用SacI酶对重组质粒进行线性化。该生产工艺可使人β-防御素3基因在甲醇诱导启动子的驱动下获得高水平表达,并将人β-防御素3表达产物分泌到发酵液培养基中,为人β-防御素3更大规模工业化生产提供可靠的实验依据。
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公开(公告)号:CN103451115A
公开(公告)日:2013-12-18
申请号:CN201310356776.2
申请日:2013-08-15
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于食品处理领域,公开了一种利用重组毕赤酵母菌降解食品中玉米赤霉烯酮的方法。该方法包含如下具体步骤:(1)制备得到重组毕赤酵母菌GS115/pPIC9K-A4-Prx;将重组菌接种于BMGY培养基中,振荡培养至OD600为2~6,离心收集菌体;(2)用无菌BMMY液体培养基将菌体重悬,控制菌悬液OD600值为0.9~1.1;28~30℃,200~250r/min下每24h添加甲醇,连续诱导培养3d后,室温离心收取上清液,即得到重组过氧化物A4-Prx粗酶液;(3)将步骤(2)的粗酶液与食品样品液混合,反应后,即得到降解玉米赤霉烯酮后的食品样品液,其玉米赤霉烯酮降解率高达70%以上。
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公开(公告)号:CN102669414A
公开(公告)日:2012-09-19
申请号:CN201210152168.5
申请日:2012-05-15
Applicant: 华南理工大学
CPC classification number: Y02P60/873
Abstract: 本发明公开了一种利用重组过氧化物酶A4-Prx脱毒玉米酒糟生产饲料的方法,该方法包括如下步骤:(1)制备重组过氧化物酶液A4-Prx:将重组大肠杆菌BL21/pET31b/A4-Prx接种于LB培养基中,摇床培养至其OD600值大于0.5,添加IPTG继续诱导培养4-5h,然后离心收集细胞后洗涤、重悬,超声波破碎细胞后,离心收集上清液即为粗酶液;(2)饲料的制备:将步骤(1)的粗酶液与玉米DDGS混合,反应并烘干后得到安全的、无毒的饲料。采用本发明的方法,可降解DDGS中98%以上的ZEA毒素,使玉米酒糟或其他有毒饲料成为安全的饲料,实现了工业残渣的高值化利用。
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公开(公告)号:CN102559555A
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201210016172.9
申请日:2012-01-17
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一株不动杆菌菌株及其在降解玉米赤霉烯酮中的应用。本发明的不动杆菌菌株是Acinetobacter sp.SM04,已于2011年12月5日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC No.5524。本发明的Acinetobacter sp.SM04对真菌毒素ZEN有较强的降解能力,可在36个小时内将98%以上的玉米赤霉烯酮降解成低雌激素活性产物,不生成玉米赤霉烯酮、玉米赤霉醇等高雌激素活性类似物,具有真正的脱毒能力。可以将该菌应用于玉米谷物、玉米酒精残渣或其他真菌毒素污染饲料的处理,使其成为安全的食物和动物饲料,从而为谷物和饲料的绿色加工处理提供一种低成本、高效率不发生二次污染的玉米赤霉烯酮降解菌。
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公开(公告)号:CN103436575B
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201310357119.X
申请日:2013-08-15
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于微生物发酵技术领域,公开了一种毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基及高密度发酵方法。该培养基配方为:胰蛋白胨19~21g/L,酵母浸膏9~11g/L,磷酸缓冲液终浓度100mmol/L,无氨基氮源12.8~14.8g/L,生物素4×10-4g/L,甘氨酸0.05~0.15wt%和体积浓度为0.5%的甲醇,pH为6~8。本发明还公开了一种基于上述毕赤酵母重组菌高密度发酵培养基的高密度发酵方法,利用本发酵方法发酵毕赤酵母重组菌,可获得高达130mg/L以上的重组蛋白表达量。
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公开(公告)号:CN102669414B
公开(公告)日:2013-06-12
申请号:CN201210152168.5
申请日:2012-05-15
Applicant: 华南理工大学
CPC classification number: Y02P60/873
Abstract: 本发明公开了一种利用重组过氧化物酶A4-Prx脱毒玉米酒糟生产饲料的方法,该方法包括如下步骤:(1)制备重组过氧化物酶液A4-Prx:将重组大肠杆菌BL21/pET31b/A4-Prx接种于LB培养基中,摇床培养至其OD600值大于0.5,添加IPTG继续诱导培养4-5h,然后离心收集细胞后洗涤、重悬,超声波破碎细胞后,离心收集上清液即为粗酶液;(2)饲料的制备:将步骤(1)的粗酶液与玉米DDGS混合,反应并烘干后得到安全的、无毒的饲料。采用本发明的方法,可降解DDGS中98%以上的ZEA毒素,使玉米酒糟或其他有毒饲料成为安全的饲料,实现了工业残渣的高值化利用。
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