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公开(公告)号:CN111944787B
公开(公告)日:2022-03-29
申请号:CN202010750072.3
申请日:2020-07-30
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明提供了一种融合碳水化合物结合模块的几丁质酶及其制备方法与应用,属于生物工程技术领域。所述的融合碳水化合物结合模块的几丁质酶,包括将带有连接肽的碳水化合物结合模块与几丁质酶Chit46的C端串联构成的融合几丁质酶。本发明首次成功将融合了CBM的几丁质酶Chit46‑CBM3、Chit46‑CBM6和Chit46‑CBM26应用于虾壳废弃物回收。融合了CBM后,虾壳中的几丁质能够直接被融合几丁质酶水解,避免了传统工艺中强碱试剂的使用以及复杂的预处理步骤。
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公开(公告)号:CN110628854A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201910893308.6
申请日:2019-09-20
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12P21/06 , C12P19/26 , C07C403/24
Abstract: 本发明提供了一种用虾壳生产几丁寡糖、虾青素、蛋白质和钙粉的酶法绿色工艺。所述的工艺联用蛋白酶、几丁质酶对虾壳进行高效水解后,打开其中的蛋白质-几丁质-矿物质的复合物结构,可有效回收利用其中的蛋白质和几丁质,不但使被蛋白质紧密包围的几丁质暴露,得到脱乙酰度低、几丁寡糖分布丰富、含有高聚合度几丁寡糖的几丁质水解产物;还使虾青素得以充分暴露而极易被抽提出,虾青素提取率达101.3μg/g虾壳粉,显著缩短提取时间的同时降低其与有机溶剂的接触时间,提高提取获得虾青素的品质,抗氧化活性强。同时,本发明的酶解方案科学巧妙,加酶量低,蛋白回收效果好,环保高效,在虾壳废弃物回收利用中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN109679938A
公开(公告)日:2019-04-26
申请号:CN201910064040.5
申请日:2019-01-23
Applicant: 华南理工大学
CPC classification number: C12N9/2442 , C12N15/815 , C12P19/14 , C12P19/26 , C12Y302/01014
Abstract: 本发明提供了一种几丁质酶Chit46及其表达纯化方法与应用。所述的几丁质酶Chit46来源于哈茨木霉,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,该几丁质酶的发酵液酶活为31.4U/mL,比酶活为34.5U/mg,高于同类报道的几丁质酶。本发明还提供了所述的几丁质酶Chit46的表达纯化方法,大幅度提高了几丁质酶的产量,粗酶液产蛋白量可达1.26g/L,纯化后蛋白量达0.77g/L。所述的几丁质酶可用于胶体几丁质水解,水解活性好,且水解产物稳定,绝大部分为几丁二糖,免去了后续繁杂的各聚合度纯化分离工艺,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN110628854B
公开(公告)日:2021-06-08
申请号:CN201910893308.6
申请日:2019-09-20
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12P21/06 , C12P19/26 , C07C403/24
Abstract: 本发明提供了一种用虾壳生产几丁寡糖、虾青素、蛋白质和钙粉的酶法绿色工艺。所述的工艺联用蛋白酶、几丁质酶对虾壳进行高效水解后,打开其中的蛋白质‑几丁质‑矿物质的复合物结构,可有效回收利用其中的蛋白质和几丁质,不但使被蛋白质紧密包围的几丁质暴露,得到脱乙酰度低、几丁寡糖分布丰富、含有高聚合度几丁寡糖的几丁质水解产物;还使虾青素得以充分暴露而极易被抽提出,虾青素提取率达101.3μg/g虾壳粉,显著缩短提取时间的同时降低其与有机溶剂的接触时间,提高提取获得虾青素的品质,抗氧化活性强。同时,本发明的酶解方案科学巧妙,加酶量低,蛋白回收效果好,环保高效,在虾壳废弃物回收利用中具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111944787A
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN202010750072.3
申请日:2020-07-30
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明提供了一种融合碳水化合物结合模块的几丁质酶及其制备方法与应用,属于生物工程技术领域。所述的融合碳水化合物结合模块的几丁质酶,包括将带有连接肽的碳水化合物结合模块与几丁质酶Chit46的C端串联构成的融合几丁质酶。本发明首次成功将融合了CBM的几丁质酶Chit46-CBM3、Chit46-CBM6和Chit46-CBM26应用于虾壳废弃物回收。融合了CBM后,虾壳中的几丁质能够直接被融合几丁质酶水解,避免了传统工艺中强碱试剂的使用以及复杂的预处理步骤。
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公开(公告)号:CN106834336B
公开(公告)日:2020-12-22
申请号:CN201710088628.5
申请日:2017-02-20
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种哈茨木霉酸性蛋白酶P6281的异源表达及纯化方法。通过提取哈茨木霉的RNA反转录获得cDNA,通过PCR获得酸性蛋白酶基因并插入到表达载体中,重组质粒电转化导入毕赤酵母GS115进行诱导表达,再利用镍柱亲和层析和分子筛层析获得较纯的酶产物。本发明首次成功表达纯化了哈茨木霉酸性蛋白酶P6281,该方法提高了P6281蛋白酶的产量,且获得的酸性蛋白酶酶活远高于现有的木霉属酸性蛋白酶。
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公开(公告)号:CN109679939A
公开(公告)日:2019-04-26
申请号:CN201910063465.4
申请日:2019-01-23
Applicant: 华南理工大学
CPC classification number: C12N9/50 , C12N15/815
Abstract: 本发明公开了近平滑假丝酵母酸性蛋白酶SAPP1及表达、纯化方法。所述的近平滑假丝酵母酸性蛋白酶SAPP1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述的酸性蛋白酶的酶活可达176.9U/mL,比酶活达1478.3U/mg,远高于现有的假丝酵母酸性蛋白酶;其水解效果也优于商业木瓜蛋白酶及酸性蛋白酶。本发明还提供了所述酸性蛋白酶SAPP1及表达、纯化方法,首次在毕赤酵母上成功表达纯化了近平滑假丝酵母酸性蛋白酶SAPP1,大幅度提高了SAPP1蛋白酶的产量,产量可高达312.5mg/L发酵液,具有广阔的推广应用价值。
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公开(公告)号:CN106834336A
公开(公告)日:2017-06-13
申请号:CN201710088628.5
申请日:2017-02-20
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种哈茨木霉酸性蛋白酶P6281的异源表达及纯化方法。通过提取哈茨木霉的RNA反转录获得cDNA,通过PCR获得酸性蛋白酶基因并插入到表达载体中,重组质粒电转化导入毕赤酵母GS115进行诱导表达,再利用镍柱亲和层析和分子筛层析获得较纯的酶产物。本发明首次成功表达纯化了哈茨木霉酸性蛋白酶P6281,该方法提高了P6281蛋白酶的产量,且获得的酸性蛋白酶酶活远高于现有的木霉属酸性蛋白酶。
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公开(公告)号:CN106818885A
公开(公告)日:2017-06-13
申请号:CN201710088983.2
申请日:2017-02-20
Applicant: 华南理工大学
IPC: A01N63/02 , A01P3/00 , A23B7/154 , A23L3/3463
CPC classification number: A01N63/02 , A23B7/154 , A23L3/3463
Abstract: 本发明公开了一种酸性蛋白酶在制备抑制病原菌制剂中的应用。本发明的发明人在首次成功重组表达纯化了哈茨木霉的酸性蛋白酶P6281的基础上,首次验证了该酶对动植物病原真菌的抑制作用,同时首次将其应用于果蔬保鲜、生物防治和农作物储存防霉中。所用的蛋白酶来自于哈茨木霉,无毒、安全,且不会对环境造成污染;同时,也克服了目前哈茨木霉菌制剂直接施用于果蔬不适宜其生长,而且有可能引起果蔬腐败等问题。本发明可与常用的果蔬保鲜技术配合使用,控制贮藏期间果蔬的灰霉病,有效控制采后腐烂。
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公开(公告)号:CN113106044A
公开(公告)日:2021-07-13
申请号:CN202110318073.5
申请日:2021-03-25
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种链霉菌改造菌及其在降解羽毛中的应用。本发明菌株是半胱氨酸双加氧酶CDO1和蛋白酶Sep39过表达的链霉菌SCUT‑1重组菌。该菌可高效降解羽毛,其固态发酵工艺可将羽毛中难以降解的角蛋白,转化为可溶性蛋白和游离氨基酸,并表现出比野生型链霉菌SCUT‑1更高的降解率和蛋白转化率。以羽毛为唯一的碳源和氮源制成发酵培养基,向发酵培养基中接种本发明的链霉菌改造菌,进行固态发酵,即可实现羽毛的高效降解,可溶性蛋白和氨基酸含量高达0.2g/g和0.29g/g。通过上述方法获得的羽毛粉是非常好的动物、植物和微生物蛋白质营养,可为禽畜类饲料提供更有营养的添加剂或替代品,具有良好的应用前景。
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