公开(公告)号：CN116083482A

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN202211094104.4

申请日：2022-09-07

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 凌飞 ,  张琴琴 ,  罗微 ,  刘惠生 ,  金亚彬

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/027 ,  C12N15/55

Abstract: 本发明公开了一种B细胞DHX9基因条件性敲除flox小鼠的制备方法，该方法利用在DHX9基因关键外显子两端添加Cre重组酶靶向序列loxP位点，构建条件性基因敲除载体，再进行显微注射的方法，制备可用于DHX9条件性基因敲除的flox小鼠。该小鼠与Cre小鼠交配即可获得B细胞特异性DHX9基因敲除小鼠。本发明基于CRISPR/Cas9技术的条件性基因敲除方法，可减少对其他细胞的危害，只需Cre工具鼠即可实现特异性基因敲除；且获得的DHX9基因条件性敲除小鼠还可以作为研究结直肠癌等疾病的动物模型，这对于研究DHX9基因的功能，尤其是研究DHX9基因在结直肠癌进程中的功能，具有重要的应用高价值。

公开(公告)号：CN118599007A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410829489.7

申请日：2024-06-25

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 刘星宇 ,  凌飞 ,  罗微 ,  刘锐 ,  刘畅 ,  张琴琴

IPC: C07K16/46 ,  C07K1/34 ,  A61K39/395 ,  A61P35/00 ,  A61P1/00

Abstract: 本发明公开了一种用于制备结直肠癌免疫治疗双特异性抗体的交联方法。该方法以高碘酸纳氧化法针对抗CD19抗体上的糖基和抗DHX9抗体氨基进行交联反应制备双特异性抗体，并用亚硫酸钠还原，最后透析除去游离小分子。在聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化后验证产率后，通过尾静脉注射法向用MC38细胞荷瘤的C57/BL6小鼠定期注射，并每日记录皮下瘤大小以评估双特异性抗体疗效。本发明利用抗体保守位点上的糖基针对另一抗体游离氨基交联，交联产率高，特异性好，副产物率低，产物对细胞无害。