一种改善米曲霉菌株菌核化现象的方法

    公开(公告)号:CN105112310A

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201510629120.2

    申请日:2015-09-25

    Abstract: 本发明提供了一种改善米曲霉菌株菌核化现象的方法,采用该方法,不仅能够使菌核化的米曲霉菌株在斜面培养基中的菌核化现象完全消失,使菌核化的米曲霉菌株菌丝体长势良好,还能使菌核化的米曲霉菌株产酶能力得到恢复。经过该方法复壮后,能够使菌核化的米曲霉菌株的产果糖基转移酶能力基本恢复,产酶酶活力达到36300U/g(干重),发酵培养的菌丝体生物量也恢复达到90.8g/L,完全达到对照菌株米曲霉菌株B的产酶水平。本发明所提供的方法操作简单、条件温和、投入少、易掌握、效果好。

    聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒及在低聚果糖生产中应用

    公开(公告)号:CN103045577B

    公开(公告)日:2015-04-22

    申请号:CN201210547846.8

    申请日:2012-12-17

    Abstract: 本发明公开了一种聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒及在低聚果糖生产中应用。本发明通过将聚氨酯光交联树脂预聚物水溶液和安息香乙醚混合,灭菌后再加入果糖基转移酶溶液和葡萄糖异构酶溶液;搅拌均匀,倒入玻璃模框摊平,紫外光照射固定,得到聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒。将该颗粒用于生产低聚果糖生产,是将该颗粒加入到蔗糖溶液中,再加入Mg2+、S2O42-作为激活因子,振荡反应,得到低聚果糖。该颗粒的制备方法简单,材质安全无毒。将其用于生产低聚果糖,转化效率得到了极大的提高,低聚果糖含量达到52.12%,表征转化率比游离酶和固定化单酶体系分别提高了66.94%和47.57%,具备有工业应用价值。

    豇豆白蛋白亚组分1b及其制备与在绿色杀虫剂中应用

    公开(公告)号:CN103059113A

    公开(公告)日:2013-04-24

    申请号:CN201210560537.4

    申请日:2012-12-20

    Abstract: 本发明公开了一种豇豆白蛋白亚组分1b及其制备与在绿色杀虫剂中应用。该豇豆白蛋白亚组分1b的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明采用DNA体外重组的方法,构建出表达豇豆白蛋白亚组分1b的基因工程菌,通过液体深层发酵培养的方式进行豇豆白蛋白亚组分1b的批量生产。本发明首次实现了豆科植物活性组分豇豆白蛋白亚组分1b资源的规模化生产。本发明工艺简便,成本低,产量高,重组蛋白获得率约为150.0mg/L,在植物资源的产业化生产上具有独特的优势。该豇豆白蛋白亚组分1b对于米象具有良好的生物毒活性,可用于制备绿色杀虫剂。

    重组豌豆白蛋白亚组分PA1b基因的异源表达方法

    公开(公告)号:CN101082046A

    公开(公告)日:2007-12-05

    申请号:CN200710026553.4

    申请日:2007-01-26

    Inventor: 张毅 许喜林

    Abstract: 本发明提供了一种重组豌豆白蛋白亚组分PA1b基因的异源表达方法,该方法包括:目的基因PA1b的合成:重组质粒pPICZαA-PA1b转化宿主菌大肠杆菌;转化宿主菌毕赤酵母菌GS115,构建表达PA1b的基因工程菌;PA1b基因工程菌的发酵培养。本发明采用DNA体外重组的方法,构建出了能够表达PA1b的基因工程菌,实现了PA1b基因的异源表达,通过液体深层发酵密集培养的方式来批量获得目的产物,首次实现了植物活性多肽豌豆PA1b资源的规模化生产。本发明工艺简便,成本低,产量高,重组蛋白获得率约为20mg/L。

    一种快速改善米曲霉菌菌核化现象的方法

    公开(公告)号:CN105199967B

    公开(公告)日:2018-05-01

    申请号:CN201510623553.7

    申请日:2015-09-25

    Abstract: 本发明提供了一种快速改善米曲霉菌株菌核化现象的方法,本发明在改良培养基组成的基础上,采用液体与固体交替培养方式,使得操作时间从常规的一个月左右缩短为一周,尽可能快地消除霉菌菌核化的现象,且方法操作简单、投入少、易掌握、效果好。采用本发明的方法,能够使得米曲霉菌株斜面培养基中菌核化现象完全消失,菌丝体长势良好,菌株产酶能力得到恢复。经过去菌核化复壮实验后,原出发米曲霉菌株的产果糖基转移酶能力基本恢复到对照菌株米曲霉菌株B的产酶水平,酶活力都达到35000U/g以上,发酵培养的菌丝体生物量也恢复达到85g/L以上。

    聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒及在低聚果糖生产中应用

    公开(公告)号:CN103045577A

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201210547846.8

    申请日:2012-12-17

    Abstract: 本发明公开了一种聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒及在低聚果糖生产中应用。本发明通过将聚氨酯光交联树脂预聚物水溶液和安息香乙醚混合,灭菌后再加入果糖基转移酶溶液和葡萄糖异构酶溶液;搅拌均匀,倒入玻璃模框摊平,紫外光照射固定,得到聚氨酯光交联树脂固定双酶颗粒。将该颗粒用于生产低聚果糖生产,是将该颗粒加入到蔗糖溶液中,再加入Mg2+、S2O42-作为激活因子,振荡反应,得到低聚果糖。该颗粒的制备方法简单,材质安全无毒。将其用于生产低聚果糖,转化效率得到了极大的提高,低聚果糖含量达到52.12%,表征转化率比游离酶和固定化单酶体系分别提高了66.94%和47.57%,具备有工业应用价值。

    一种酵母麦角固醇高产菌株及其选育方法与应用

    公开(公告)号:CN102911883A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201210364703.3

    申请日:2012-09-27

    Abstract: 本发明公开了一种酵母麦角固醇高产菌株及其选育方法与应用。该酵母麦角固醇高产菌株的名称为酿酒酵母scut-B6305,保藏于位于中国武汉的中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2012年4月10日,保藏编号为CCTCC NO:M2012105。本发明通过长时间不间断地利用二甲基亚砜对酵母生产菌株进行应激定向驯化,选育出该酵母麦角固醇高产菌株。该酵母麦角固醇高产菌株的单位细胞麦角固醇含量达到5.63mg/g,比出发菌株提高了30.32%;其单位体积发酵液的生产能力为90.8mg/100mL,是出发菌株的1.91倍,可用于生产中获得麦角固醇。

    豌豆白蛋白亚组分PA1b重组蛋白及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN101033465A

    公开(公告)日:2007-09-12

    申请号:CN200710026555.3

    申请日:2007-01-26

    Inventor: 张毅 许喜林

    Abstract: 本发明属于基因工程和生物杀虫剂的技术领域,提供了一种豌豆白蛋白亚组分PA1b重组蛋白及其制备方法,该方法包括重组蛋白生产的基因工程菌构建;重组蛋白的发酵生产;重组蛋白的分离纯化。本发明还提供了上述豌豆白蛋白亚组分PA1b重组蛋白在制备防治储粮害虫的生物杀虫剂中的应用。本发明通过独特的工艺,简便的方法,使豌豆白蛋白亚组分PA1b基因的规模化生产成为现实。毕赤酵母表达PA1b的成本低,产量高,分离纯化工艺简便。

    一种豆科植物活性多肽的分离提取方法及其氨基酸序列

    公开(公告)号:CN101029076A

    公开(公告)日:2007-09-05

    申请号:CN200710026557.2

    申请日:2007-01-26

    Inventor: 张毅 许喜林

    Abstract: 本发明公开了一种豆科植物活性多肽的分离提取方法,该方法包括豌豆蛋白粗提物的制备;对粗提物的离子交换树脂层析分离;对分离组分的反相HPLC层析纯化。本发明对豌豆中具有对粮储害虫有毒杀作用的蛋白成分进行跟踪,进行逐步的分离、纯化,并对此活性组分的生理生化特性、蛋白质组成等进行分析,为下一步进行DNA的异源重组,构建出能够表达活性成分的基因工程菌提供必要的基础。

    一种利用全再生细骨料制备建筑砂浆的配合比设计方法

    公开(公告)号:CN112115408B

    公开(公告)日:2022-11-18

    申请号:CN202010782422.4

    申请日:2020-08-06

    Abstract: 本发明属于建筑砂浆的技术领域,公开了一种利用全再生细骨料制备建筑砂浆的配合比设计方法。方法:1)计算建筑砂浆试配强度;2)计算每立方米建筑砂浆中水泥用量Qc;3)每立方米建筑砂浆中全再生细骨料用量为干燥状态全再生细骨料的堆积密度值;4)确定外加剂掺量;5)计算每立方米建筑砂浆用水量mw,计算公式如下:mw=λ·Qc+η,λ、η是回归系数;6)按计算的配合比进行试配,调整用水量使砂浆的稠度满足要求后,根据实测表观密度,校核各材料用量,得到建筑砂浆最终配合比。本发明的方法能够使用全再生细骨料全取代河砂制备建筑砂浆,其性能与河砂建筑砂浆性能相当,水泥用量要少,所制备的建筑砂浆环保,成本低。

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