公开(公告)号：CN106244610B

公开(公告)日：2019-07-16

申请号：CN201610586211.7

申请日：2016-07-22

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 王菊芳 ,  马毅 ,  李杉 ,  吴少敏 ,  余结莹

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/485 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a‑hEGF‑Mxe‑SUMO，实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本发明为促进外源蛋白在大肠杆菌可溶表达提供了一种有效的思路和方法，SUMO标签融合到目的蛋白C端，能够有效地提高融合蛋白的功能性表达效率，进一步在融合蛋白中间加入可以自剪切的内含肽，在还原环境中切除融合蛋白的内含肽和SUMO蛋白，获得不带任何外源氨基酸序列且具有生物学活性的人表皮细胞生长因子。本方法为复杂的真核生物蛋白质在原核表达系统的高效生产提供了理论基础与设计新思路。

公开(公告)号：CN106244610A

公开(公告)日：2016-12-21

申请号：CN201610586211.7

申请日：2016-07-22

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 王菊芳 ,  马毅 ,  李杉 ,  吴少敏 ,  余结莹

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/485 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/22

CPC classification number: C12N15/70 ,  C07K14/485 ,  C07K2319/35 ,  C07K2319/95 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a-hEGF-Mxe-SUMO，实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本发明为促进外源蛋白在大肠杆菌可溶表达提供了一种有效的思路和方法，SUMO标签融合到目的蛋白C端，能够有效地提高融合蛋白的功能性表达效率，进一步在融合蛋白中间加入可以自剪切的内含肽，在还原环境中切除融合蛋白的内含肽和SUMO蛋白，获得不带任何外源氨基酸序列且具有生物学活性的人表皮细胞生长因子。本方法为复杂的真核生物蛋白质在原核表达系统的高效生产提供了理论基础与设计新思路。