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公开(公告)号：CN106279410B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201610864043.3
申请日：2016-09-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种二型登革热病毒NS1蛋白多价纳米抗体及制备方法，属于基因工程和生物制药技术领域。该多价纳米抗体是由VHH抗体片段通过连接肽连接构成；所述VHH抗体片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过构建表达载体pET‑22b‑VHH‑linker‑VHH、pET‑22b‑VHH‑linker‑VHH‑linker‑VHH，分别成功在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶表达。与单价抗体相比，重复串联后得到的二价及多价VHH抗体的亲和力有显著提高。本发明实现了二型登革热病毒NS1蛋白多价纳米抗体的高效可溶表达，易于放大生产，成本低廉；具有更高稳定性和亲和力；更有大规模生产及应用的潜能。
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公开(公告)号：CN106244610B
公开(公告)日：2019-07-16
申请号：CN201610586211.7
申请日：2016-07-22
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/485 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/22
Abstract: 本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a‑hEGF‑Mxe‑SUMO，实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本发明为促进外源蛋白在大肠杆菌可溶表达提供了一种有效的思路和方法，SUMO标签融合到目的蛋白C端，能够有效地提高融合蛋白的功能性表达效率，进一步在融合蛋白中间加入可以自剪切的内含肽，在还原环境中切除融合蛋白的内含肽和SUMO蛋白，获得不带任何外源氨基酸序列且具有生物学活性的人表皮细胞生长因子。本方法为复杂的真核生物蛋白质在原核表达系统的高效生产提供了理论基础与设计新思路。
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公开(公告)号：CN106279410A
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201610864043.3
申请日：2016-09-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种二型登革热病毒NS1蛋白多价纳米抗体及制备方法，属于基因工程和生物制药技术领域。该多价纳米抗体是由VHH抗体片段通过连接肽连接构成；所述VHH抗体片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过构建表达载体pET-22b-VHH-linker-VHH、pET-22b-VHH-linker-VHH-linker-VHH，分别成功在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶表达。与单价抗体相比，重复串联后得到的二价及多价VHH抗体的亲和力有显著提高。本发明实现了二型登革热病毒NS1蛋白多价纳米抗体的高效可溶表达，易于放大生产，成本低廉；具有更高稳定性和亲和力；更有大规模生产及应用的潜能。
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公开(公告)号：CN106244610A
公开(公告)日：2016-12-21
申请号：CN201610586211.7
申请日：2016-07-22
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/485 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/22
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/485 , C07K2319/35 , C07K2319/95 , C12N15/62
Abstract: 本发明公开一种促进人表皮细胞生长因子在大肠杆菌高效功能性表达的方法。该方法是通过构建表达载体pET21a-hEGF-Mxe-SUMO，实现了不带任何外源氨基酸的hEGF蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效可溶表达。本发明为促进外源蛋白在大肠杆菌可溶表达提供了一种有效的思路和方法，SUMO标签融合到目的蛋白C端，能够有效地提高融合蛋白的功能性表达效率，进一步在融合蛋白中间加入可以自剪切的内含肽，在还原环境中切除融合蛋白的内含肽和SUMO蛋白，获得不带任何外源氨基酸序列且具有生物学活性的人表皮细胞生长因子。本方法为复杂的真核生物蛋白质在原核表达系统的高效生产提供了理论基础与设计新思路。
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