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公开(公告)号：CN1800393A
公开(公告)日：2006-07-12
申请号：CN200510126417.3
申请日：2005-12-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种昆虫抗冷冻蛋白基因，其序列为SEQ ID NO：1。本发明还提供了该昆虫抗冷冻蛋白基因的克隆、蛋白表达及纯化方法，主要包括以下步骤：利用特异性引物扩增该昆虫抗冷冻蛋白基因，与原核生物表达元件PTYB11连接构建表达载体PTYB11－afp，转化表达菌株BL21，加入诱导剂诱导，以及纯化抗冷冻蛋白。运用本发明所述的方法成功地克隆到了昆虫抗冷冻蛋白基因。诱导表达的抗冷冻蛋白占菌体总蛋白的30％，通过介质纯化后得到的抗冷冻蛋白纯度达95％以上，说明本发明提供的方法是高效的。而且，用本发明所述的表达系统得到的融合蛋白不需要内切酶即可切除标签蛋白，不含多余的氨基酸序列，更接近天然蛋白活性。
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