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公开(公告)号:CN113087780A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110375650.4
申请日:2021-04-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种荔枝抗病基因LcLTP及编码蛋白和应用。本发明中从荔枝中分离得到一个荔枝抗病相关基因LcLTP,该基因全长cDNA为342bp,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1;该基因编码的蛋白是一个全长由113个氨基酸组成的脂质转移蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过转录模式分析和植物表达分析发现,LcLTP基因可提高植物对疫霉菌的抗性,因此,该荔枝抗病基因LcLTP可应用在提高植物抗病性或抗病植物育种方面。
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公开(公告)号:CN112080577A
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN202010968521.1
申请日:2020-09-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/31 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了荔枝霜疫霉生长发育和侵染阶段的内参基因及其引物和应用。本发明选取4个荔枝霜疫霉基因PlACTIN、PLGAPDH、PlrpS5和Pl006400,通过实时荧光定量PCR的方法测定了这些基因在荔枝霜疫霉菌丝、孢子囊、游动孢子、休止孢、休止孢萌发和侵染个阶段的表达量变化,比较所选基因表达量稳定性,发现了Pl006400和PlACTIN表达量稳定可作为内参基因。本发明的内参基因Pl006400和PlACTIN的特异性引物引物可广泛应用于荔枝霜疫霉发育及其侵染荔枝各阶段的基因表达研究,填补了荔枝霜疫霉缺少可靠内参基因的空白,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN114891814B
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202210428944.3
申请日:2022-04-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/55 , C12N9/14 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12N15/113 , A01N37/46 , A01N47/44 , A01N57/16 , A01P3/00 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种基因PlRAB6在调控荔枝霜疫霉致病力中的应用。本发明属于植物基因工程领域,应用基于聚乙二醇介导的原生质体转化技术与CRISPR/Cas9敲除策略,通过构建pBSSK::PlRAB6、PYF2.3G‑ribo‑sgRNA敲除载体并通过PEG介导的原生质体转化,利用同源重组的方法将基因PlRAB6从荔枝霜疫霉中敲除,获得敲除突变体。该突变体与野生型相比,生长速率减慢,致病力明显减弱,游动孢子释放率显著下降,在多种胁迫环境下敏感性降低。本发明证实PlRAB6是荔枝霜疫霉生长发育、侵染致病所必须的。我们的研究有助于深入阐明荔枝霜疫霉的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号:CN114891814A
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202210428944.3
申请日:2022-04-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/55 , C12N9/14 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12N15/113 , A01N37/46 , A01N47/44 , A01N57/16 , A01P3/00 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种基因PlRAB6在调控荔枝霜疫霉致病力中的应用。本发明属于植物基因工程领域,应用基于聚乙二醇介导的原生质体转化技术与CRISPR/Cas9敲除策略,通过构建pBSSK::PlRAB6、PYF2.3G‑ribo‑sgRNA敲除载体并通过PEG介导的原生质体转化,利用同源重组的方法将基因PlRAB6从荔枝霜疫霉中敲除,获得敲除突变体。该突变体与野生型相比,生长速率减慢,致病力明显减弱,游动孢子释放率显著下降,在多种胁迫环境下敏感性降低。本发明证实PlRAB6是荔枝霜疫霉生长发育、侵染致病所必须的。我们的研究有助于深入阐明荔枝霜疫霉的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号:CN114774457A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210512254.6
申请日:2022-05-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种基因PlRACK1在调控荔枝霜疫霉生长、抗氧化和致病力中的应用。本发明通过试验证明,将基因PlRACK1的上下游序列分别扩增出来,再将NPTⅡ基因序列扩增出来,与PBSSK载体相连,同源重组后通过聚乙二醇介导的原生质体转化技术与CRISPR/Cas9敲除策略进行敲除。因为基因PlRACK1的缺失,所获得的突变体与野生型相比,荔枝霜疫霉生长速率显著减慢,荔枝霜疫霉致病力显著降低,使荔枝霜疫霉对氧化胁迫的耐受性显著降低。本发明证实基因PlRACK1是荔枝霜疫霉生长发育和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明荔枝霜疫霉的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号:CN112080577B
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202010968521.1
申请日:2020-09-15
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/31 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了荔枝霜疫霉生长发育和侵染阶段的内参基因及其引物和应用。本发明选取4个荔枝霜疫霉基因PlACTIN、PLGAPDH、PlrpS5和Pl006400,通过实时荧光定量PCR的方法测定了这些基因在荔枝霜疫霉菌丝、孢子囊、游动孢子、休止孢、休止孢萌发和侵染个阶段的表达量变化,比较所选基因表达量稳定性,发现了Pl006400和PlACTIN表达量稳定可作为内参基因。本发明的内参基因Pl006400和PlACTIN的特异性引物引物可广泛应用于荔枝霜疫霉发育及其侵染荔枝各阶段的基因表达研究,填补了荔枝霜疫霉缺少可靠内参基因的空白,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN114437188B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202210233084.8
申请日:2022-03-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种荔枝霜疫霉分泌型蛋白激发子PlPeL8及其应用。本发明中的蛋白激发子PlPeL8的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,将其编码基因构建入植物表达载体中再转化农杆菌并在本氏烟草细胞瞬时表达,发现其可以诱导植物防御反应,包括引起植物细胞过敏性坏死,诱导活性氧迸发和植物免疫相关通路如水杨酸和茉莉酸通路标志基因的上调表达,能够显著提高植物对疫霉菌的抗性,为提高植物抗病性、减轻病害发生提供了新的途径,在现代农业绿色发展上具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN113087780B
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202110375650.4
申请日:2021-04-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种荔枝抗病基因LcLTP及编码蛋白和应用。本发明中从荔枝中分离得到一个荔枝抗病相关基因LcLTP,该基因全长cDNA为342bp,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1;该基因编码的蛋白是一个全长由113个氨基酸组成的脂质转移蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过转录模式分析和植物表达分析发现,LcLTP基因可提高植物对疫霉菌的抗性,因此,该荔枝抗病基因LcLTP可应用在提高植物抗病性或抗病植物育种方面。
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公开(公告)号:CN114437188A
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN202210233084.8
申请日:2022-03-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种荔枝霜疫霉分泌型蛋白激发子PlPeL8及其应用。本发明中的蛋白激发子PlPeL8的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,将其编码基因构建入植物表达载体中再转化农杆菌并在本氏烟草细胞瞬时表达,发现其可以诱导植物防御反应,包括引起植物细胞过敏性坏死,诱导活性氧迸发和植物免疫相关通路如水杨酸和茉莉酸通路标志基因的上调表达,能够显著提高植物对疫霉菌的抗性,为提高植物抗病性、减轻病害发生提供了新的途径,在现代农业绿色发展上具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN114774457B
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202210512254.6
申请日:2022-05-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种基因PlRACK1在调控荔枝霜疫霉生长、抗氧化和致病力中的应用。本发明通过试验证明,将基因PlRACK1的上下游序列分别扩增出来,再将NPTⅡ基因序列扩增出来,与PBSSK载体相连,同源重组后通过聚乙二醇介导的原生质体转化技术与CRISPR/Cas9敲除策略进行敲除。因为基因PlRACK1的缺失,所获得的突变体与野生型相比,荔枝霜疫霉生长速率显著减慢,荔枝霜疫霉致病力显著降低,使荔枝霜疫霉对氧化胁迫的耐受性显著降低。本发明证实基因PlRACK1是荔枝霜疫霉生长发育和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明荔枝霜疫霉的致病分子机制,为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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