公开(公告)号：CN115161286A

公开(公告)日：2022-10-11

申请号：CN202210670166.9

申请日：2022-06-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  郝文茜 ,  李作生 ,  刘郁夫 ,  容芳 ,  冯夏宁

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/34 ,  C12N15/62 ,  C12N15/867 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种稳定表达非洲猪瘟病毒p30蛋白CHO细胞系及其构建方法，其构建方法为：在p30蛋白基因序列的起始密码子之前添加Kozac序列，在序列N端连接信号肽序列；再在肽链C端连接组氨酸标签体，并以融合蛋白连接，最后将其克隆至慢病毒包装载体，得到病毒表达载体；将慢病毒表达载体进行共转染，得到慢病毒包装病毒液，将其与CHO细胞混合感染，再经筛选培养后，观察及鉴定所得到的单克隆细胞株，再扩大培养并冻存；复苏冻存CHO细胞，连续培养15～20代，得到CHO细胞系。利用本发明的构建方法能在1个月内筛选获得所需细胞系，在连续传20代后仍能表达p30重组蛋白，具有试验周期短和成功率高的优点。