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公开(公告)号：CN106980023B
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201710283822.9
申请日：2017-04-26
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: G01N33/96
Abstract: 本发明公开一种牛血清质量评价方法，包括以下步骤：1)消化：使用0.25％EDTA‑胰酶溶液消化细胞，分散成单个细胞；2)加培养基：取两份单个细胞，分别加入含5％被评价牛血清的培养基10mL，混匀；3)进行1000、10000、10000倍稀释，加至96孔细胞板；4)挑选出含有单个细胞的孔；5)计数：分别在48h、72h、96h计数。该方法可以避免由于牛血清浓度差异导致细胞增殖不好，能快速高效地筛选出高品质牛血清。
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公开(公告)号：CN105861665A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610237108.1
申请日：2016-04-15
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒基因的PCR扩增引物组及应用该引物组进行扩增和测序的方法，所述禽流感病毒基因的PCR扩增引物组包括SEQ ID No.1?16所示的引物对；所述PCR扩增引物组能够扩增不同亚型禽流感病毒的基因，通用性强；所述的禽流感病毒基因的PCR扩增引物组用于禽流感病毒的基因测序，步骤中部分引物对的扩增条件相同，同一反应程序可以同时扩增多种基因片段；可快速获得禽流感病毒的基因组全长序列，具有简便，耗时少，节约成本等优点。
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公开(公告)号：CN115417926A
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202210350779.4
申请日：2022-04-02
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 广东益朗生物科技有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种大规模提取筋腱中胶原的方法及应用，首先将动物筋腱绞碎，先将动物筋腱置于碱液中浸泡，过滤，收集筋腱，重复浸泡和过滤若干次后，过滤得到含有胶原的溶液，再进行过滤，得到胶原浓缩液；在胶原浓缩液中加入缓冲液进行稀释，重复过滤稀释和浓缩步骤若干次，过滤浓缩后得到胶原溶液，再调节pH，然后进行酶解，酶解后进行过滤；再进行稀释，继续重复过滤浓缩和稀释步骤若干次，过滤后得到胶原蛋白溶液。该提取方法将碱法提取、酸法提取和酶法提取结合，能有效提取动物筋腱中的胶原蛋白且不损害有效成分，适合产业化大规模提取。利用上述提取方法得到胶原蛋白生物活性高，能够很好地促进细胞贴壁和延伸，适用于细胞培养。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114703122A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210350780.7
申请日：2022-04-02
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 广东益朗生物科技有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种使PK‑15细胞形成团块和传代培养的方法，具体步骤为：先对PK‑15细胞进行复苏，再进行细胞传代，然后配制特定的悬浮培养基，将PK‑15细胞与悬浮培养基混合倒入摇瓶中，再将摇瓶置于摇床进行悬浮培养，悬浮培养一段时间后再取样观察细胞生长状况，进行细胞计数，再进行细胞传代，得到团块状细胞，继续对团块状细胞进行细胞传代；连续传代并观察PK‑15细胞状态，得到成球形团块状的PK‑15细胞。本发明的培养方法在在不进行细胞驯化和基因改造的情况下，能直接悬浮PK‑15细胞，使得PK‑15细胞形成球形团生长，球形团块直径为20～80μm，还能够连续传15代以上。
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公开(公告)号：CN115161286A
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202210670166.9
申请日：2022-06-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/34 , C12N15/62 , C12N15/867 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达非洲猪瘟病毒p30蛋白CHO细胞系及其构建方法，其构建方法为：在p30蛋白基因序列的起始密码子之前添加Kozac序列，在序列N端连接信号肽序列；再在肽链C端连接组氨酸标签体，并以融合蛋白连接，最后将其克隆至慢病毒包装载体，得到病毒表达载体；将慢病毒表达载体进行共转染，得到慢病毒包装病毒液，将其与CHO细胞混合感染，再经筛选培养后，观察及鉴定所得到的单克隆细胞株，再扩大培养并冻存；复苏冻存CHO细胞，连续培养15～20代，得到CHO细胞系。利用本发明的构建方法能在1个月内筛选获得所需细胞系，在连续传20代后仍能表达p30重组蛋白，具有试验周期短和成功率高的优点。
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公开(公告)号：CN107164334B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201710283815.9
申请日：2017-04-26
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒繁殖培养基及其应用，包括按体积百分比计的以下成分：DMEM培养基84.5‑96.9％；非必须要氨基酸0.5‑2％；脂肪酸0.1‑1.5％；维生素溶液0.5‑2％；肽类物质溶液2‑10％；该应用为将培养基应用于猪圆环病毒的培养中，培养包括以下步骤：1)将PK‑15细胞经传代和培养；2)病毒繁殖结束后，离心去除细胞碎片；3)采用超滤的方式去除小分子蛋白质，收集被截流的浓缩液；4)使用分子筛层析方法分离猪圆环病毒，收集第一个蛋白质峰，得到猪圆环病毒；该培养基使用氨基酸、脂肪酸、小肽等物质等替代血清，有利于提高病毒与在繁殖过程中产生的杂蛋白分离度，提高圆环灭活疫苗的品质。
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公开(公告)号：CN107164334A
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201710283815.9
申请日：2017-04-26
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华南农业大学
CPC classification number: C12N7/00 , C12N2750/10051
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒繁殖培养基及其应用，包括按体积百分比计的以下成分：DMEM培养基84.5‑96.9％；非必须要氨基酸0.5‑2％；脂肪酸0.1‑1.5％；维生素溶液0.5‑2％；肽类物质溶液2‑10％；该应用为将培养基应用于猪圆环病毒的培养中，培养包括以下步骤：1)将PK‑15细胞经传代和培养；2)病毒繁殖结束后，离心去除细胞碎片；3)采用超滤的方式去除小分子蛋白质，收集被截流的浓缩液；4)使用分子筛层析方法分离猪圆环病毒，收集第一个蛋白质峰，得到猪圆环病毒；该培养基使用氨基酸、脂肪酸、小肽等物质等替代血清，有利于提高病毒与在繁殖过程中产生的杂蛋白分离度，提高圆环灭活疫苗的品质。
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公开(公告)号：CN106980023A
公开(公告)日：2017-07-25
申请号：CN201710283822.9
申请日：2017-04-26
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: G01N33/96
CPC classification number: G01N33/96
Abstract: 本发明公开一种牛血清质量评价方法，包括以下步骤：1)消化：使用0.25％EDTA‑胰酶溶液消化细胞，分散成单个细胞；2)加培养基：取两份单个细胞，分别加入含5％被评价牛血清的培养基10mL，混匀；3)进行1000、10000、10000倍稀释，加至96孔细胞板；4)挑选出含有单个细胞的孔；5)计数：分别在48h、72h、96h计数。该方法可以避免由于牛血清浓度差异导致细胞增殖不好，能快速高效地筛选出高品质牛血清。
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