公开(公告)号：CN109735481A

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201811584956.5

申请日：2018-12-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 赵力超 ,  吕新瑞 ,  张竟丰 ,  王丽 ,  曹潇

IPC: C12N1/36 ,  C12N1/20

Abstract: 本发明提供了一种VBNC状态阪崎肠杆菌的快速诱导形成方法，首先将阪崎肠杆菌接种后培养至对数期，得到培养液；然后使用抗生素与上述培养液进行诱导培养，诱导培养的操作为：取培养液离心，取沉淀，重悬，诱导培养浓度至108CFU/mL以下；其中，抗生素为氨苄青霉素，抗生素在诱导培养后的培养液中浓度为50~1600μg/mL。本发明提供的方法能够快速地诱导阪崎肠杆菌进入VBNC状态，同时采取常规培养复苏方法验证VBNC状态阪崎肠杆菌能够复苏，可恢复致病性。因此，本发明可为提高乳制品中阪崎肠杆菌检测的准确性奠定基础，有效地避免VBNC状态阪崎肠杆菌的存在而造成的潜在隐患。

公开(公告)号：CN109735604A

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201811584939.1

申请日：2018-12-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王丽 ,  曹潇 ,  吕新瑞 ,  赵力超 ,  张竟丰

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/6804 ,  C12Q1/06

Abstract: 本发明提供了一种快速定量检测VBNC状态副溶血性弧菌的方法，包括如下步骤：S1.诱导副溶血性弧菌进入VBNC状态；S2.生物素化多克隆抗体和免疫磁珠的制备；S3.免疫磁珠富集，免疫磁珠所需体积为10μL~200μL，副溶血性弧菌菌液所需体积为0.5~1mL；S4.PMAxx染色：在步骤S3富集后的样品中加入PMAxx使其终浓度达到10~20μmol/L，染色后进行检测。本发明提供了一种快速定量检测VBNC状态副溶血性弧菌的方法，首次将免疫磁珠技术、PMAxx染料以及qPCR定量检测技术相结合应用于实际样品免前增菌条件下VBNC状态菌的检测中。通过实验能够证明，该方法对VBNC状态副溶血性弧菌的检测限为1.05CFU/g，该方法不仅灵敏度高且特异性好。