公开(公告)号：CN102127533A

公开(公告)日：2011-07-20

申请号：CN201010618223.6

申请日：2010-12-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 黄毓茂 ,  刘娜 ,  吴锋 ,  刘德辉

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/33 ,  C12P21/02 ,  A61K39/12 ,  A61P31/12 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种重组猪圆环病毒2型Cap抗原的制备方法，是采用酵母表达系统，先扩增PCV2-ORF2基因，然后构建表达工程菌，即将扩增序列插入酵母表达载体，形成重组表达载体，线性化后转化毕赤酵母宿主细胞，构建表达工程菌，最后重组酵母菌分泌表达，得到重组猪圆环病毒2型Cap抗原蛋白。酵母表达系统对表达的蛋白有加工折叠和翻译后修饰的功能，从而使表达的蛋白具有生物活性，比起大肠杆菌更有优势，但比哺乳动物细胞表达系统操作更简便。而与酿酒酵母相比，毕赤酵母不易过度糖基化，因此分离纯化步骤简单。采用酵母表达系统操作简单、表达量较高，生产成本低，可以进行大规模生产，有利于猪圆环病毒亚单位疫苗的推广使用。

公开(公告)号：CN102127533B

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201010618223.6

申请日：2010-12-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 黄毓茂 ,  刘娜 ,  吴锋 ,  刘德辉

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/33 ,  C12P21/02 ,  A61K39/12 ,  A61P31/12 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种重组猪圆环病毒2型Cap抗原的制备方法，是采用酵母表达系统，先扩增PCV2-ORF2基因，然后构建表达工程菌，即将扩增序列插入酵母表达载体，形成重组表达载体，线性化后转化毕赤酵母宿主细胞，构建表达工程菌，最后重组酵母菌分泌表达，得到重组猪圆环病毒2型Cap抗原蛋白。酵母表达系统对表达的蛋白有加工折叠和翻译后修饰的功能，从而使表达的蛋白具有生物活性，比起大肠杆菌更有优势，但比哺乳动物细胞表达系统操作更简便。而与酿酒酵母相比，毕赤酵母不易过度糖基化，因此分离纯化步骤简单。采用酵母表达系统操作简单、表达量较高，生产成本低，可以进行大规模生产，有利于猪圆环病毒亚单位疫苗的推广使用。