一种检测蛋白质烷基化修饰剂PEG修饰能力的试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN103575730A

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201310494929.X

    申请日:2013-10-21

    Abstract: 本发明公开了一种可用于检测蛋白质烷基化修饰剂PEG修饰能力的试剂盒及其使用方法。本试剂盒内包括有阳性对照谷胱甘肽粉剂、蛋白质与修饰剂反应Buffer缓冲液、NaH2PO4溶液、5,5-二硫代对二硝基苯甲酸(DTNB)显色液。该试剂盒的使用方法是设置蛋白质经修饰剂修饰与蛋白质不经修饰剂修饰两组,分别用5,5-二硫代对二硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂,利用分光光度计测定在波长412nm下两组反应体系的吸光值,根据两组吸光值的差异来检测蛋白质烷基化修饰剂PEG的修饰能力。该试剂盒整个检测过程在60min内可完成,快速,简便,并且稳定性好、保存期长,具有重要的推广应用价值。

    一种检测蛋白质烷基化修饰剂PEG修饰能力的试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN103575730B

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201310494929.X

    申请日:2013-10-21

    Abstract: 本发明公开了一种可用于检测蛋白质烷基化修饰剂PEG修饰能力的试剂盒及其使用方法。本试剂盒内包括有阳性对照谷胱甘肽粉剂、蛋白质与修饰剂反应Buffer缓冲液、NaH2PO4溶液、5,5-二硫代对二硝基苯甲酸(DTNB)显色液。该试剂盒的使用方法是设置蛋白质经修饰剂修饰与蛋白质不经修饰剂修饰两组,分别用5,5-二硫代对二硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂,利用分光光度计测定在波长412nm下两组反应体系的吸光值,根据两组吸光值的差异来检测蛋白质烷基化修饰剂PEG的修饰能力。该试剂盒整个检测过程在60min内可完成,快速,简便,并且稳定性好、保存期长,具有重要的推广应用价值。

    一种蛋白质烷基化修饰剂PEG修饰能力的检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN103558213A

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201310471944.2

    申请日:2013-10-11

    Abstract: 本发明公开了一种蛋白质烷基化修饰剂PEG修饰能力的检测方法及其应用。本发明方法设置GSH经修饰剂修饰与GSH不经修饰两组,分别用5,5-二硫代对二硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂,利用分光光度计测定在波长412nm下两组反应体系的吸光值,根据两组吸光值的差异来检测蛋白质氨基PEG化修饰剂的修饰能力。本发明进行修饰剂修饰能力的检测,既能实现定性检测又能实现定量检测,整个测定过程在60min内可完成,具有快速、简便、可靠的有益效果。

    一种修饰性谷胱甘肽过氧化物酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN102220305A

    公开(公告)日:2011-10-19

    申请号:CN201110122788.X

    申请日:2011-05-13

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种修饰性谷胱甘肽过氧化物酶及其制备方法。该修饰性谷胱甘肽过氧化物酶是将单链单甲氧基聚乙二醇(mPEG1)通过游离氯原子与谷胱甘肽过氧化物酶的氨基反应,将mPEG1连接到谷胱甘肽过氧化物酶上。通过采用活化的单链单甲氧基聚乙二醇作为修饰剂,与谷胱甘肽过氧化物酶在4-37℃、pH7.0-10.0反应,其中单链单甲氧基聚乙二醇与谷胱甘肽过氧化物酶的质量比为20-100:1,反应15-60min后,按修饰剂与终止剂谷胱甘肽(GSH)为1∶1的比例加入GSH终止反应,然后用3万超滤膜超滤去除终止剂,获得所述的修饰性谷胱甘肽过氧化物酶。该修饰性谷胱甘肽过氧化物酶其氨基修饰率控制在40-45%,酶活力保持率超过100%。

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