公开(公告)号：CN110607286B

公开(公告)日：2021-02-19

申请号：CN201910773782.5

申请日：2019-08-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 林俊芳 ,  余颖豪 ,  郭丽琼 ,  廖寒露 ,  李浩莹

IPC: C12N9/02 ,  C12N9/88 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P17/10 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开一种灰树花麦角硫因基因Gfegt1和Gfegt2在合成麦角硫因中的应用，属于生物合成生物学领域。本发明利用同源比对的方法找出灰树花中可能的麦角硫因合成酶基因Gfegt1、Gfegt2，并利用提取灰树花RNA后反转录成cDNA进行克隆获取。本发明构建利用酵母启动子启动Gfegt1、Gfegt2两个基因表达的载体并转化至酿酒酵母EC1118中，随后通过添加底物让酿酒酵母吸收，在体内反应催化合成麦角硫因，进行提取后通过高效液相色谱(HPLC)检测麦角硫因产物的生成，实现了体内生物合成麦角硫因。本发明为麦角硫因的生产提供一条全新的生物合成途径。

公开(公告)号：CN116949070A

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202210396823.5

申请日：2022-04-15

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 郭丽琼 ,  薛玲娜 ,  林俊芳 ,  余颖豪 ,  陈柏雄 ,  杜燕燕

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/31 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K14/375 ,  C12P17/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种无柄灵芝麦角硫因基因Gregt1和Gregt2在合成麦角硫因中的应用，属于生物合成生物学领域。本发明采用氨基酸同源比对确定无柄灵芝中具有相同功能结构域的麦角硫因基因Gregt1和Gregt2，并利用提取无柄灵芝RNA并反转录成cDNA，用PCR扩增获得。克隆并鉴定的cDNA序列如SEQ IDNO：2，5所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：3，6所示。本发明首次鉴定了灵芝中麦角硫因合成酶，并构建了大肠杆菌工程菌株进行蛋白表达，并实现了体外全细胞酶学反应合成麦角硫因，其生产周期短且稳定，为麦角硫因的生物合成提供了新的蛋白序列，在食用菌的麦角硫因应用研究中具有重大价值。

公开(公告)号：CN110607286A

公开(公告)日：2019-12-24

申请号：CN201910773782.5

申请日：2019-08-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 林俊芳 ,  余颖豪 ,  郭丽琼 ,  廖寒露 ,  李浩莹

IPC: C12N9/02 ,  C12N9/88 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P17/10 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开一种灰树花麦角硫因基因Gfegt1和Gfegt2在合成麦角硫因中的应用，属于生物合成生物学领域。本发明利用同源比对的方法找出灰树花中可能的麦角硫因合成酶基因Gfegt1、Gfegt2，并利用提取灰树花RNA后反转录成cDNA进行克隆获取。本发明构建利用酵母启动子启动Gfegt1、Gfegt2两个基因表达的载体并转化至酿酒酵母EC1118中，随后通过添加底物让酿酒酵母吸收，在体内反应催化合成麦角硫因，进行提取后通过高效液相色谱(HPLC)检测麦角硫因产物的生成，实现了体内生物合成麦角硫因。本发明为麦角硫因的生产提供一条全新的生物合成途径。