公开(公告)号：CN104593491B

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201410848236.0

申请日：2014-12-31

Applicant: 华侨大学

Inventor： 戚智青 ,  唐黎 ,  张秀英 ,  侯丹 ,  刁勇 ,  齐晓雪 ,  许瑞安 ,  马国兴 ,  杜民

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明提供一种利用整合宿主因子来提高PCR扩增灵敏度的方法，所述方法如下：将含有脱氧核苷三磷酸、DNA聚合酶、寡核苷酸引物、以及作为模板的核酸片段的反应溶液中，加入整合宿主因子IHF，按照常规PCR的解链、退火、延伸三个步骤，进行反复的热循环，从而将目标核酸片段扩增，所述引物与整合宿主因子IHF的摩尔比例为0.005-1。本发明方法能够特异性地、高效地扩增目标核酸序列。

公开(公告)号：CN104845964A

公开(公告)日：2015-08-19

申请号：CN201510198272.1

申请日：2015-04-24

Applicant: 华侨大学

Inventor： 戚智青 ,  齐晓雪 ,  唐黎 ,  杜民

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明提供一种利用HU蛋白有效提高RCA扩增效率的方法，包括：HU蛋白的制备与纯化；使用TempliPhi DNA测序模板扩增试剂盒，按照试剂盒的说明进行变性操作和培育操作，通过在滚环扩增过程中添加一定浓度的非特异性DNA结合蛋白HU蛋白，然后分别将RCA扩增产物于1％琼脂糖凝胶中进行电泳。本发明可以显著地提高滚环扩增的效率，增强滚环扩增的灵敏度，实现了对市售RCA试剂盒的进一步优化。

公开(公告)号：CN104593491A

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201410848236.0

申请日：2014-12-31

Applicant: 华侨大学

Inventor： 戚智青 ,  唐黎 ,  张秀英 ,  侯丹 ,  刁勇 ,  齐晓雪 ,  许瑞安 ,  马国兴 ,  杜民

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q2522/101 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2549/00

Abstract: 本发明提供一种利用整合宿主因子来提高PCR扩增灵敏度的方法，所述方法如下：将含有脱氧核苷三磷酸、DNA聚合酶、寡核苷酸引物、以及作为模板的核酸片段的反应溶液中，加入整合宿主因子IHF，按照常规PCR的解链、退火、延伸三个步骤，进行反复的热循环，从而将目标核酸片段扩增，所述引物与整合宿主因子IHF的摩尔比例为0.005-1。本发明方法能够特异性地、高效地扩增目标核酸序列。

公开(公告)号：CN104388419B

公开(公告)日：2018-01-16

申请号：CN201410539899.4

申请日：2014-10-13

Applicant: 华侨大学

Inventor： 戚智青 ,  刁勇 ,  杜民

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种高效扩增核酸分子的方法，在PCR反应体系中加入HU蛋白、HUα或β亚基同源二聚体，HU蛋白、HUα或β亚基同源二聚体和模板DNA的摩尔比例在1‑200区间。在PCR反应的过程中，HU不但比SSB蛋白的更优，还能抑制非特异性片段的扩增。这与之前人们认为只有单链DNA结合蛋白能促进PCR效率，而双链DNA结合蛋白会抑制PCR效率的认识不一致。本发明的应用，将有助于解决现有PCR技术所存在的扩增效率低，存在非特异性产物污染等问题。