一种基于foldon介导的寡聚化阿魏酸酯酶的制备方法

    公开(公告)号:CN109609529B

    公开(公告)日:2021-12-31

    申请号:CN201910073568.9

    申请日:2019-01-25

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明公开一种基于foldon介导的寡聚化阿魏酸酯酶的制备方法,设计优化并合成基因片段His‑fae‑linker‑foldon;将pPIC9K/His‑fae‑linker‑foldon工程菌诱导培养,分离纯化获得寡聚化阿魏酸酯酶。本发明应用目标蛋白与foldon结构域融合可自发形成三聚体结构的特性,设计linker完成阿魏酸酯酶在毕赤酵母中融合表达,以提高阿魏酸酯酶的催化性能;在pPIC9K/His‑fae‑linker‑foldon工程菌的表达培养过程中,将去淀粉麦麸加入培养基中,以提高阿魏酸酯酶的表达量;将寡聚化阿魏酸酯酶保存在特制的复合稳定剂中,其酶活稳定性大大提高。

    芥菜多糖的提取纯化方法

    公开(公告)号:CN100336830C

    公开(公告)日:2007-09-12

    申请号:CN200510040547.5

    申请日:2005-06-11

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明公开了一种芥菜多糖的提取纯化方法,其以芥菜干品为原料,经提取、醇析、干燥、透析和纯化,得芥菜多糖纯品,所得的芥菜多糖纯品中水溶性总糖可达芥菜干品的15%左右,水溶性多糖可达芥菜干品的9%左右,而蛋白质含量仅芥菜干品的0.2%,脂肪含量仅为芥菜干品的0.4×10-3%。本发明的芥菜多糖的提取纯化方法,可以省下大量的有机溶剂,不仅生产成本较低、环保,而且芥菜多糖能够保持比较完整的结构。且工艺流程简单,省时省力。

    一种制备益生菌微胶囊的装置及其使用方法

    公开(公告)号:CN106723234B

    公开(公告)日:2019-04-09

    申请号:CN201611101501.4

    申请日:2016-12-05

    Abstract: 本发明公开了一种制备益生菌微胶囊的装置及其使用方法,该装置包括喷头本体,所述喷头本体的中心设有单孔,单孔内设有两层内外套接的套管,形成三层不连通的空腔;喷头端面对应形成两层环形孔和中心圆孔,其中:外层空腔通过接口与固化液输送管连通,以输送固化液,该空腔端部与所述环形雾化孔连通以喷射固化液;中间层空腔与高压空气输送管通过接口连通以输送高压空气,该空腔端部与所述环形空气孔连通用以喷射高压空气;内层空腔与微胶囊壁材输送管通过接口连通,以输送壁材,该空腔端部与所述中心壁材孔连通用以喷射微胶囊。本发明提高了微胶囊的成品稳定性。

    从麦糟中同时制备阿魏酸、低聚木糖及乙醇的方法

    公开(公告)号:CN102864180A

    公开(公告)日:2013-01-09

    申请号:CN201210330376.X

    申请日:2012-09-07

    Applicant: 华侨大学

    CPC classification number: Y02E50/16

    Abstract: 本发明提供一种从麦糟中同时制备阿魏酸、低聚木糖及乙醇的方法,其先把麦糟浸没在体积分数为85%的乙醇中煮沸5min后冷却、过滤,重复两次;之后依次用无水乙醇和乙醚清洗过滤后的麦糟并烘干,接着粉碎并过50目的土样筛,得到麦糟的乙醇不溶物;之后将麦糟的乙醇不溶物依次进行0.1mol/LNaOH溶液浸泡、微波并离心,然后经阿魏酸酯酶协同木聚糖酶处理以获得阿魏酸、低聚木糖,再将处理后麦糟的乙醇不溶物残渣依次进行糖化、发酵最终获得乙醇。本发明不仅可实现低耗化学试剂,从而达到环境友好的目的,且能够同时利用木质纤维中的三大组分。

    芥菜多糖的提取纯化方法

    公开(公告)号:CN1699426A

    公开(公告)日:2005-11-23

    申请号:CN200510040547.5

    申请日:2005-06-11

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明公开了一种芥菜多糖的提取纯化方法,其以芥菜干品为原料,经提取、醇析、干燥、透析和纯化,得芥菜多糖纯品,所得的芥菜多糖纯品中水溶性总糖可达芥菜干品的15%左右,水溶性多糖可达芥菜干品的9%左右,而蛋白质含量仅芥菜干品的0.2%,脂肪含量仅为芥菜干品的0.4×10-3%。本发明的芥菜多糖的提取纯化方法,可以省下大量的有机溶剂,不仅生产成本较低、环保,而且芥菜多糖能够保持比较完整的结构。且工艺流程简单,省时省力。

    一种阿魏酸酯酶酶化发酵饲料的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN105410335A

    公开(公告)日:2016-03-23

    申请号:CN201510754921.1

    申请日:2015-11-09

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明公开了一种阿魏酸酯酶酶化发酵饲料的制备方法及其应用,采用简化的固态发酵培养基发酵得到阿魏酸酯酶,再利用阿魏酸酯酶制备得到酶化发酵饲料。本发明制备方法简单,得到的酶化发酵饲料风味改善,适口性增加,且安全卫生,三元猪的采食量和消化率提高,平均日增重显著增加,缩短了饲喂周期,提高经济效益。

    一种重组阿魏酸酯酶的制备方法

    公开(公告)号:CN104450644A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410724759.4

    申请日:2014-12-03

    Applicant: 华侨大学

    CPC classification number: C12N9/18 C12Y301/01073

    Abstract: 本发明公开了一种重组阿魏酸酯酶的制备方法,利用阿魏酸酯酶O42807,密码子优化后人工合成其基因fae、构建pAO815-fae表达载体、构建pPIC9K-fae表达载体以及将pPIC9K-fae表达载体转化至毕赤酵母GS115中表达,得到重组阿魏酸酯酶,SDS-PAGE分析显示其发酵上清液为单一条带,表观分子量为42kDa,酶活为4.7U/mL,比酶活力为31.4U/mg,最适反应温度为50℃,最适pH为5.0~5.5。本发明获得了1株高效表达的重组阿魏酸酯酶转化子,与阿魏酸酯酶O42807相比其表达效率和表达量大大提高。

    一种融合抗菌肽及其制备方法

    公开(公告)号:CN104448004A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410725191.8

    申请日:2014-12-03

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明公开了一种融合抗菌肽及其制备方法,根据抗菌肽YFGAP的氨基酸序列,优化设计其基因序列,连接至pUC19得到pUC19-YFGAP;将pUC19-YFGAP连接至pET-22b-S-ELPs得到pET-22b-YSELP;将pET-22b-YSELP转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,得到E.coli BL21(DE3)/pET-22b-YSELP;接种,培养,加入IPTG诱导YSELP的表达。本发明的融合抗菌肽YSELP不需要从标签蛋白上切下即可对多种测试菌株具有抑制作用,且对宿主菌本身没有杀伤力,有望解决现有抗菌肽大规模应用的问题。

    一种基于foldon介导的寡聚化阿魏酸酯酶的制备方法

    公开(公告)号:CN109609529A

    公开(公告)日:2019-04-12

    申请号:CN201910073568.9

    申请日:2019-01-25

    Applicant: 华侨大学

    Abstract: 本发明公开一种基于foldon介导的寡聚化阿魏酸酯酶的制备方法,设计并优化基因序列His-fae-linker-foldon,并在两端分别加入SnaB I和Not I酶切位点,人工合成基因片段His-fae-linker-foldon;构建pPIC9K/His-fae-linker-foldon质粒,并将此质粒电转化至P.pastoris GS115中表达;将pPIC9K/His-fae-linker-foldon工程菌在含有去淀粉麦麸培养基中诱导培养,经分离纯化即可获得寡聚化阿魏酸酯酶。本发明应用目标蛋白与foldon结构域融合可自发形成三聚体结构的特性,同时自行设计linker完成阿魏酸酯酶在毕赤酵母中融合表达,以提高阿魏酸酯酶的催化性能;在pPIC9K/His-fae-linker-foldon工程菌的表达培养过程中,将去淀粉麦麸加入培养基中,以提高阿魏酸酯酶的表达量;将寡聚化阿魏酸酯酶保存在特制的复合稳定剂中,与仅在低温冰箱保藏相比,其酶活稳定性大大提高。

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