公开(公告)号：CN106434723A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610867378.0

申请日：2016-09-30

Applicant: 华侨大学

Inventor： 刘楠辛 ,  戚智青 ,  张云威 ,  刁勇 ,  李招发 ,  齐晓雪 ,  李梦琳

IPC: C12N15/70

CPC classification number: C12N15/70

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开一种利用聚乙烯亚胺提高热激法质粒转化大肠杆菌感受态效率的方法，包括以下步骤：制备感受态细胞；配置浓度为10-7v/v-10-8v/v的PEI溶液备用；在转化体系中加入所述的聚乙烯亚胺溶液进行转化和克隆，得到重组的DNA分子克隆。本发明可以显著提高热激法质粒DNA转化E.coli BL21(DE3)的效率，填补了将化合物，如聚乙烯亚胺PEI作为增效剂应用于提高转化效率这一领域的空白。

公开(公告)号：CN105802956A

公开(公告)日：2016-07-27

申请号：CN201610254626.4

申请日：2016-04-22

Applicant: 华侨大学

Inventor： 李梦琳 ,  戚智青 ,  肖志勇 ,  肖桂清 ,  齐晓雪 ,  刘楠辛

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/102 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2527/125

Abstract: 本发明提供一种利用聚乙烯亚胺提高RCA扩增效率的方法，步骤如下：配置聚乙烯亚胺溶液，使用TempliPhi DNA测序模板扩增试剂盒，按照试剂盒的说明进行质粒的变性和培育操作，通过在滚环扩增过程中添加聚乙烯亚胺溶液，然后将RCA扩增产物于1％琼脂糖凝胶中进行电泳。本发明显著地提高滚环扩增的效率，增强滚环扩增的灵敏度，实现了对市售RCA试剂盒的进一步优化。

公开(公告)号：CN105200036A

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：CN201510602375.X

申请日：2015-09-21

Applicant: 华侨大学

Inventor： 戚智青 ,  唐黎 ,  侯丹 ,  齐晓雪 ,  张秀英 ,  刁勇 ,  王庆波 ,  潘海波 ,  高宏志 ,  刘楠辛

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种利用整合宿主因子来提高基于PCR的基因合成技术灵敏度的方法，其将含有脱氧核糖核甘酸，DNA聚合酶，寡核苷酸引物，以及作为模板的混合重叠寡核苷酸的反应液中加入IHF原液，按照常规PCR的解链，退火，延伸三个步骤进行反复的循环，从而将目的核酸片段合成并且扩增。本发明方法能够特异性地、高效地合成和扩增目标核酸序列。

公开(公告)号：CN105505972B

公开(公告)日：2019-02-26

申请号：CN201610040618.X

申请日：2016-01-21

Applicant: 华侨大学

Inventor： 戚智青 ,  刘楠辛 ,  侯丹

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提供一种利用聚乙烯亚胺提高T4DNA连接酶连接效率的方法，包括以下步骤：对目的DNA片段设计带有酶切位点的引物；通过PCR反应获得两端带有酶切位点的目的DNA片段；经酶切得到待连接的线性化载体和目的DNA片段；配置聚乙烯亚胺溶液备用；在连接体系中添加预设体积的聚乙烯亚胺溶液进行连接反应；在大肠杆菌中进行转化和克隆，得到重组DNA分子的克隆。本发明可以显著地提高T4DNA连接酶的连接效率，填补了将电正性高分子聚合物(聚乙烯亚胺)应用于提高T4DNA连接酶连接效率这一领域的空白。

公开(公告)号：CN105505972A

公开(公告)日：2016-04-20

申请号：CN201610040618.X

申请日：2016-01-21

Applicant: 华侨大学

Inventor： 戚智青 ,  刘楠辛 ,  侯丹

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66

CPC classification number: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N2800/101

Abstract: 本发明提供一种利用聚乙烯亚胺提高T4DNA连接酶连接效率的方法，包括以下步骤：对目的DNA片段设计带有酶切位点的引物；通过PCR反应获得两端带有酶切位点的目的DNA片段；经酶切得到待连接的线性化载体和目的DNA片段；配置聚乙烯亚胺溶液备用；在连接体系中添加预设体积的聚乙烯亚胺溶液进行连接反应；在大肠杆菌中进行转化和克隆，得到重组DNA分子的克隆。本发明可以显著地提高T4DNA连接酶的连接效率，填补了将电正性高分子聚合物(聚乙烯亚胺)应用于提高T4DNA连接酶连接效率这一领域的空白。