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公开(公告)号:CN119985973A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202510155121.1
申请日:2025-02-12
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院
IPC: G01N33/569 , G01N33/53 , G01N27/447
Abstract: 本发明涉及疫苗技术领域,具体而言,涉及一种HPV三价治疗性疫苗的活性检测方法。采用构建的搭载HPV16/18/52型E6/E7抗原的非复制5型腺病毒接种并感染BEAS‑2B细胞,培养后提取总蛋白,再依次进行SDS‑PAGE电泳、蛋白质印迹法检测、免疫反应和显色成像的步骤,对融合蛋白进行检测;构建的腺病毒的转染复数MOI为15‑25,BEAS‑2B细胞的汇合度大于80%;蛋白质印迹法的转膜电流为220‑280mA,时间为50‑80min。该方法避免了在不同的动物种属中生物学活性具有明显差异导致检测结果不准确的问题,具有良好的准确性、稳定性和耐用性,步骤简单,成本低,可进行有效的推广和使用。