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公开(公告)号:CN115997727B
公开(公告)日:2025-04-29
申请号:CN202211466437.5
申请日:2022-11-22
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: A01K67/0276 , A61K49/00
Abstract: 本发明属于动物模型构建技术领域,尤其涉及一种自发性子宫内膜癌小鼠模型的构建方法及其应用。所述构建方法包括通过Cre/loxP系统,构建基因型为Cre;PTENflox/‑;STK11flox/flox的小鼠模型,该小鼠模型在激活子宫上皮细胞Cre重组酶的表达后,选择性敲除PTEN基因和STK11基因,自发性诱发子宫内膜癌的发生。本发明通过选择性缺失子宫上皮细胞的PTEN基因和STK11基因,使子宫病理迅速改变,具有成瘤时间短、成瘤率高的优点,而且,由于采用原位成瘤技术,本发明的小鼠模型可模拟人体子宫内膜癌的生长环境,肿瘤组织学特性与人子宫内膜癌极为接近,符合人体子宫内膜癌的生物学特点。
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公开(公告)号:CN115997727A
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202211466437.5
申请日:2022-11-22
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: A01K67/027 , A61K49/00
Abstract: 本发明属于动物模型构建技术领域,尤其涉及一种自发性子宫内膜癌小鼠模型的构建方法及其应用。所述构建方法包括通过Cre/loxP系统,构建基因型为Cre;PTENflox/‑;STK11flox/flox的小鼠模型,该小鼠模型在激活子宫上皮细胞Cre重组酶的表达后,选择性敲除PTEN基因和STK11基因,自发性诱发子宫内膜癌的发生。本发明通过选择性缺失子宫上皮细胞的PTEN基因和STK11基因,使子宫病理迅速改变,具有成瘤时间短、成瘤率高的优点,而且,由于采用原位成瘤技术,本发明的小鼠模型可模拟人体子宫内膜癌的生长环境,肿瘤组织学特性与人子宫内膜癌极为接近,符合人体子宫内膜癌的生物学特点。
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公开(公告)号:CN115820809A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202211381025.1
申请日:2022-11-05
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6886 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供可常温检测RNA的试剂盒和方法。本发明常温检测RNA的试剂盒包括:靶RNA识别扩增组分与二重信号放大组分,通过将两大组分模块偶联,完成信号的进一步放大与报告,实现RNA的高灵敏度检测。本发明常温检测RNA的方法无需复杂的逆转录过程,可以降低反应复杂度与仪器成本,检测效率高。
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公开(公告)号:CN115820562A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202211501195.9
申请日:2022-11-28
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12N5/10 , C12Q1/02 , A01K67/027 , C12N15/54 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于细胞系构建技术领域,尤其涉及一种STK11flox/floxLTFCre/‑转基因小鼠子宫内膜肿瘤细胞系及其应用。所述STK11flox/floxLTFCre/‑转基因小鼠子宫内膜肿瘤细胞系的保藏编号为CCTCC NO:C2022278。本发明提供的细胞系具有良好的贴壁性能,细胞性状稳定,可稳定多次传代,在传代过程中形态学特征均一,且传代过程中能够保持上皮细胞的典型特征,具有接近于肿瘤的临床生物学特性,且具有较强的增殖活性和成瘤能力,成瘤率高,适用于建立子宫内膜肿瘤动物模型,为研究子宫内膜癌发生、发展分子机制和抗子宫内膜癌药物筛选提供了新的更接近于临床肿瘤生物学特性的的理想实验材料。
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公开(公告)号:CN115058496A
公开(公告)日:2022-09-16
申请号:CN202210518320.0
申请日:2022-05-12
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/6858
Abstract: 本发明公开了一种快速低丰度检测插入和缺失突变的方法。它步骤一:制备双标记荧光探针;步骤二:制备核酸酶;步骤三:设计所需的突变链,野生链,gRNA;步骤四:配置野生链和突变链的双链DNA液体;步骤五:配制混合反应液;步骤六:将步骤四中的液体配制成双链的野生链和突变链;步骤七:配制待检反应体系:步骤八:检测荧光曲线;步骤九:野生链稀释突变链;步骤十:配制待检反应体系;步骤十一:检测荧光曲线;步骤十二:设计RPA反应的引物;步骤十三:稀释合成的链粉末;步骤十四:配置RPA反应体系;步骤十五:配制50ul的待检反应体系;步骤十六:检测荧光曲线。本发明具有成本低,检测速度快,灵敏度高的优点。
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公开(公告)号:CN113481280B
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202110282855.8
申请日:2021-03-16
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/6827 , C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了一种快速通用的低丰度突变检测方法。它包括如下步骤,步骤一:制备单脱碱基的双标记荧光探针;步骤二:设计所需的突变链,野生链,引导链,桥梁链和阻遏链;步骤三:配置液体;步骤四:制备浓度为500nm混合样本;步骤五:加入阻遏链;步骤六:将引导链和桥梁链混合配置成混合液;步骤七:将混合液静置;步骤八:将步骤四配置的混合液分别加入到步骤七处理的混合液,配置成混合液;步骤九:在步骤七的混合液中加入步骤一制得的探针;步骤十:在步骤八的混合液中加入酶;步骤十一:将步骤九的液体加入到检测管中检测荧光曲线;步骤十二:得到突变点的荧光曲线。本发明具有能高选择性、快速、低成本地检测目标DNA序列的优点。
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公开(公告)号:CN115976280A
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202211394819.1
申请日:2022-11-05
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供用于检测SARS‑CoV‑2的核酸组合物,包括DNA识别链和DNA辅助链;用于检测SARS‑CoV‑2的试剂盒,包括靶RNA识别扩增模块和二重信号放大模块;以及超微量新冠病毒RNA的常温检测方法。本发明提供的试剂盒和检测方法能够常温检测超微量新冠病毒RNA,反应条件温和,无需逆转录过程,操作简便,且兼顾检测的高特异性与高灵敏度。本发明采用的核酸组合物能够充分发挥CRIPSR‑Cas12a检测系统灵敏度高的特点,检测限可达到100aM级别,能够实现对超微量RNA的检测。
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公开(公告)号:CN113481280A
公开(公告)日:2021-10-08
申请号:CN202110282855.8
申请日:2021-03-16
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12Q1/6827 , C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了一种快速通用的低丰度突变检测方法。它包括如下步骤,步骤一:制备单脱碱基的双标记荧光探针;步骤二:设计所需的突变链,野生链,引导链,桥梁链和阻遏链;步骤三:配置液体;步骤四:制备浓度为500nm混合样本;步骤五:加入阻遏链;步骤六:将引导链和桥梁链混合配置成混合液;步骤七:将混合液静置;步骤八:将步骤四配置的混合液分别加入到步骤七处理的混合液,配置成混合液;步骤九:在步骤七的混合液中加入步骤一制得的探针;步骤十:在步骤八的混合液中加入酶;步骤十一:将步骤九的液体加入到检测管中检测荧光曲线;步骤十二:得到突变点的荧光曲线。本发明具有能高选择性、快速、低成本地检测目标DNA序列的优点。
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公开(公告)号:CN115820562B
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202211501195.9
申请日:2022-11-28
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: C12N5/10 , C12Q1/02 , A01K67/0275 , C12N15/54 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于细胞系构建技术领域,尤其涉及一种STK11flox/floxLTFCre/‑转基因小鼠子宫内膜肿瘤细胞系及其应用。所述STK11flox/floxLTFCre/‑转基因小鼠子宫内膜肿瘤细胞系的保藏编号为CCTCC NO:C2022278。本发明提供的细胞系具有良好的贴壁性能,细胞性状稳定,可稳定多次传代,在传代过程中形态学特征均一,且传代过程中能够保持上皮细胞的典型特征,具有接近于肿瘤的临床生物学特性,且具有较强的增殖活性和成瘤能力,成瘤率高,适用于建立子宫内膜肿瘤动物模型,为研究子宫内膜癌发生、发展分子机制和抗子宫内膜癌药物筛选提供了新的更接近于临床肿瘤生物学特性的的理想实验材料。
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公开(公告)号:CN116059405A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202211178506.2
申请日:2022-09-26
Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
IPC: A61K48/00 , A61K38/17 , C07K14/47 , C12Q1/6886 , A61P35/00
Abstract: 本发明属于基因治疗技术领域,尤其涉及一种治疗恶性肿瘤且具备特异性与灵敏度的合成基因网络系统,该基因网络系统能够治疗卵巢癌、乳腺癌等多种癌症,分别包括信号识别模块、信号输出模块、信号放大模块。信号识别模块中两条并行通路中的两个启动子组合可调,目的是实现多种癌症兼顾特异性与灵敏度的识别与杀伤。
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