公开(公告)号：CN119776430A

公开(公告)日：2025-04-08

申请号：CN202411344804.3

申请日：2024-09-25

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院

Inventor： 吴鹏 ,  曹灿晖 ,  彭婷 ,  许妙纯 ,  刘晓杰 ,  胡柏 ,  丁文成

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/89 ,  A01K67/0278 ,  C12N15/37 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明属于动物模型技术领域，尤其涉及一种HPV定点整合子宫颈上皮内瘤变动物模型的构建方法及其应用。上述HPV定点整合子宫颈上皮内瘤变动物模型的制备方法中在C57BL/6J小鼠的Klf5基因位点上通过CRISPR/Cas介导的基因组工程创建HPV16基因敲入。该方法包括：(1)确定Klf5位点上的目标序列，设计特异性的gRNA；(2)设计并构建一个含有同源臂(Homology Arms,HAs)的敲入载体Donor vector，在敲入载体中插入HPV16基因序列；(3)将敲入载体和Cas9/gRNA复合体共注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中培育并出生，即得。该方法制备的动物模型可以模拟人体子宫颈从正常‑持续性HPV感染‑子宫颈癌前病变发展阶段。为宫颈癌前病变的发生机制研究及药物筛选提供一个可信的动物模型。