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公开(公告)号：CN118072826A
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202311783780.7
申请日：2023-12-21
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种用于PCR扩增基因组序列的引物设计方法，包括：确定目标序列位于其所在靶基因的链；将该链与上述目标序列所属基因组进行序列比对，从基因组中确定与该链相似性达到预设阈值的所有链；根据每条链的序列信息，在该链所属染色体上截取一段包含该链的染色体DNA序列；若只有一条链，则在该链对应的染色体DNA序列上寻找一个包含目标序列的序列，在此序列的目标序列上下游区域设计引物；否则，对所有链对应的染色体DNA序列进行同源序列比对，在每个染色体DNA序列上确定在目标序列的位置上下游的一个错配区域并在该区域设计引物；基于在每个错配区域设计的引物，进行PCR实验以扩增目标序列。本发明方法步骤简单、高效。
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公开(公告)号：CN108456690A
公开(公告)日：2018-08-28
申请号：CN201810317001.7
申请日：2018-04-10
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种甘蓝型油菜高效遗传转化及快速鉴定方法，其中甘蓝型油菜遗传转化方法包括以下步骤：(1)无菌外植体的培养；(2)目的载体的制备；(3)农杆菌转化液的制备；(4)农杆菌与下胚轴共培养；(5)诱导外植体脱分化形成愈伤组织；(6)诱导愈伤组织再分化形成芽；(7)转基因阳性筛选；(8)生根培养；(9)小苗炼苗移栽。本发明通过对遗传转化方法的整体流程设置、关键步骤的参数条件等进行改进及进一步优选，与现有技术相比利用有效的筛选手段能够高效、快速获取甘蓝型油菜转基因苗，本发明将DsRed基因插入到含有目的基因的载体中，得到带有DsRed的目的载体转入农杆菌菌株，通过观察下胚轴的颜色能够快速高效的进行转基因阳性筛选。
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公开(公告)号：CN108795898B
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN201810614691.2
申请日：2018-06-14
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种促进植物种子亚麻酸积累的基因的应用，该基因片段具有如SEQ ID No.1～SEQ ID No.4任意一条所示的核苷酸序列或其互补序列，或者由于增加、缺失或替换一个或多个核苷酸导致的与SEQ ID No.1～SEQ ID No.4任意一条所示的核苷酸序列同源性不小于95％、且功能相同的衍生核苷酸序列。本发明首次发现了甘蓝型油菜溶血磷脂酸酰基转移酶基因BnLPAAT2其促进植物种子亚麻酸积累的功能及用途，通过引入具有特定核苷酸序列的基因片段、及具有特定氨基酸序列的蛋白质，能够有效促进植物种子亚麻酸积累。本发明中克隆的BnLPAAT2基因不但在超表达株系种子中显著提高亚麻酸含量，而且种子含油量也有了一定幅度的提高。
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公开(公告)号：CN108456690B
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN201810317001.7
申请日：2018-04-10
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种甘蓝型油菜高效遗传转化及快速鉴定方法，其中甘蓝型油菜遗传转化方法包括以下步骤：(1)无菌外植体的培养；(2)目的载体的制备；(3)农杆菌转化液的制备；(4)农杆菌与下胚轴共培养；(5)诱导外植体脱分化形成愈伤组织；(6)诱导愈伤组织再分化形成芽；(7)转基因阳性筛选；(8)生根培养；(9)小苗炼苗移栽。本发明通过对遗传转化方法的整体流程设置、关键步骤的参数条件等进行改进及进一步优选，与现有技术相比利用有效的筛选手段能够高效、快速获取甘蓝型油菜转基因苗，本发明将DsRed基因插入到含有目的基因的载体中，得到带有DsRed的目的载体转入农杆菌菌株，通过观察下胚轴的颜色能够快速高效的进行转基因阳性筛选。
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公开(公告)号：CN109097486A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201810838974.5
申请日：2018-07-27
Applicant: 华中科技大学 , 陕西省杂交油菜研究中心
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了油菜种子组织部位特异性的含油量基因位点及其应用，属于分子生物学及遗传育种技术领域。本发明中油菜种子外子叶含油量基因位点紧密连锁的探针标记序列为SEQ ID No：1或SEQ ID No：2，内子叶含油量基因位点紧密连锁的探针标记序列为SEQ ID No：3或SEQ ID No：4，种皮含油量基因位点紧密连锁的引物序列为SEQ ID No：5和SEQ ID No：6所示，胚轴含油量基因位点紧密连锁的引物序列为SEQ ID No：7所示。以上这些组织特异性基因位点为通过分子辅助育种提高油菜含油量提供了新位点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108872166A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810311109.5
申请日：2018-04-09
Applicant: 华中科技大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种双荧光标记实现油菜种子单细胞及油滴三维可视化的方法，该方法包括以下步骤：(1)油菜种子的解剖及切片；(2)油菜种子切片的尼罗红染色及DiO染色；(3)油菜种子双荧光标记切片标本制作；(4)激光共聚焦显微镜双荧光深层扫描；(5)油菜种子细胞双荧光标记信号的三维重构。本发明利用双荧光标记，并具体通过对染料的具体种类及具体染色过程、后续激光共聚焦深层扫描所采用的扫描条件等进行改进及进一步优选，与现有技术相比能够有效解决油菜种子细胞或该油菜种子细胞内油滴其三维可视化处理难等问题，并且能够实现油滴和细胞体积的精准测量。
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公开(公告)号：CN108795898A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810614691.2
申请日：2018-06-14
Applicant: 华中科技大学
CPC classification number: C12N9/1025 , C12N15/8247
Abstract: 本发明公开了一种促进植物种子亚麻酸积累的基因的应用，该基因片段具有如SEQ ID No.1～SEQ ID No.4任意一条所示的核苷酸序列或其互补序列，或者由于增加、缺失或替换一个或多个核苷酸导致的与SEQ ID No.1～SEQ ID No.4任意一条所示的核苷酸序列同源性不小于95％、且功能相同的衍生核苷酸序列。本发明首次发现了甘蓝型油菜溶血磷脂酸酰基转移酶基因BnLPAAT2其促进植物种子亚麻酸积累的功能及用途，通过引入具有特定核苷酸序列的基因片段、及具有特定氨基酸序列的蛋白质，能够有效促进植物种子亚麻酸积累。本发明中克隆的BnLPAAT2基因不但在超表达株系种子中显著提高亚麻酸含量，而且种子含油量也有了一定幅度的提高。
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公开(公告)号：CN120005893A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202311521958.0
申请日：2023-11-15
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/10 , A01H6/20 , A01H5/00 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子生物学及遗传育种技术领域，公开了一种甘蓝型油菜种子含油量基因SOCA9及相关分子标记，其中，调控甘蓝型油菜种子含油量的SOCA9基因，它具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列或其互补序列，或者由于增加、缺失或替换一个或多个核苷酸导致的与SEQ ID No.1所示的核苷酸序列同源性不小于95％、且功能相同的衍生核苷酸序列。本发明利用具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列(或其互补序列，衍生核苷酸序列等)的基因SOCA9，可提高甘蓝型油菜种子含油量，同时降低种子木质纤维素含量、使种皮颜色变浅，可用于高含油量甘蓝型油菜转基因育种和分子标记辅助筛选育。
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公开(公告)号：CN117512083A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202311620897.3
申请日：2023-11-30
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种生物样本的批量化DNA测序方法及应用，属于基因测序技术领域，包括：为每一个生物样本均分配一个对应的标引序列对，记为第一标引序列和第二标引序列；各生物样本所对应的标引序列对均不相同；在每一个生物样本溶液中加入携带有第一标引序列的正向引物和携带有第二标引序列的反向引物，并进行PCR扩增操作；将扩增后的各生物样本的扩增子混合后，进行高通量测序，得到高通量测序数据；提取高通量测序数据中各DNA序列中的标引序列对；当某一DNA序列中的标引序列对为某一生物样本所对应的标引序列对时，则判定该DNA序列属于该生物样本，从而得到各生物样本的DNA序列；本发明能够对不同生物样本进行高效快速准确地DNA测序。
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公开(公告)号：CN115786370A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211199749.4
申请日：2022-09-29
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域，公开了一种促进植物种子超长链脂肪酸积累的基因的应用，其中，基因片段具有如SEQ ID No.1～SEQ ID No.5任意一条所示的核苷酸序列或其互补序列，或者是与这些核苷酸序列同源性不小于95％、且功能相同的衍生核苷酸序列；超长链脂肪酸的碳链碳数大于18，基因片段能够提升植物种子磷脂酰胆碱(PC)和/或磷脂酰乙醇胺(PE)中超长链脂肪酸的占比。本发明通过使用十字花科植物来源的LPAT2基因(核苷酸序列例如如同SEQ ID No.1～SEQ ID No.5所示)，能够提高植物种子超长链脂肪酸在磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺中的百分含量，克服了当前领域内遇到的技术瓶颈。
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