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公开(公告)号：CN1748477A
公开(公告)日：2006-03-22
申请号：CN200510019550.9
申请日：2005-10-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明属于植物组织和细胞培养技术领域。以草坪草品种日本结缕草(Zoysia japonica Steud)的成熟种子为外植体诱导愈伤组织，通过愈伤组织增殖(或通过长期继代)，最后诱导分化为完整小植株。本发明包括下列步骤：a)在含有愈伤诱导剂的培养基中培养日本结缕草的成熟种子并诱导愈伤组织；b)挑选状态良好的愈伤组织到增殖(或继代)培养基上增殖或继代；c)挑选状态良好的经过增殖或者继代的愈伤组织到分化培养基上诱导成完整小植株。本发明还包括将增殖或继代培养基上的黄色脆性胚性愈伤接种到继代培养基上作长期继代并保持分化。与现有技术相比，本发明显著提高了结缕草外植体愈伤诱导率和植株再生的效率。
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公开(公告)号：CN106978419A
公开(公告)日：2017-07-25
申请号：CN201710158231.9
申请日：2017-03-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域，涉及矮牵牛花药发育早期特异表达启动子pPhGRP的鉴定及其应用。本发明分离的启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。对该启动子驱动的矮牵牛内源基因的定量PCR检测表明，该启动子驱动的基因仅在花药发育早期特异表达，不在其他时期或其他组织中表达。生物功能验证和GUS染色检测表明，启动子pPhGRP驱动报告基因在拟南芥的根、叶和角果中均不表达，只在花药中特异表达；启动子pPhGRP驱动的毒素基因Barnase只在矮牵牛花药中特异表达，不在其他时期或其他组织中表达，获得其他器官发育正常的雄性不育株系。本发明的启动子可用于雄性不育基因工程及花药发育调控和杂种优势利用中。
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公开(公告)号：CN103539539A
公开(公告)日：2014-01-29
申请号：CN201310476389.2
申请日：2013-10-12
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于花卉植物叶面喷施剂领域，具体涉及一种三色堇化学杀雄剂组合物及配制方法与应用。本发明的杀雄剂由苯磺隆、尿素、赤霉素、洗衣粉及水组成，其功效是对三色堇杀雄彻底，雌蕊育性正常，植株生长发育无不良影响，化学杀雄率为96.92%，异交结实正常，异交结实率为89.66%，种子杂交纯度达到100%。喷施期选三色堇自交系株高10～15cm，最大花蕾长1～2mm时进行叶面喷施，单株受药量控制在15～20ml，10d后复喷1次，各处理浓度不变，但施药量降为8～10ml/株。本发明杀雄剂协同效果好，生产成本低，对环境友好，易于推广应用。
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公开(公告)号：CN100397978C
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200510019549.6
申请日：2005-10-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及植物组织与细胞培养技术领域，具体地说，本发明涉及地锦体细胞胚发生途径的植株再生方法。该方法包括下列步骤：a)在含有诱导剂的培养基上培养地锦外植体，该外植体为地锦的叶柄，从该外植体中诱导出愈伤组织；b)挑选步骤a)得到的发育状态良好的愈伤组织接种到增殖培养基上使其增殖；c)挑选步骤b)得到的发育状态良好的愈伤组织接种到体胚诱导培养基上诱导体胚分化或产生脆性胚性愈伤组织，胚性愈伤组织接种于胚性愈伤组织继代培养上长期继代，或接种于体胚培养上分化；d)将步骤c)中的未成熟体胚接种到体胚增殖培养基上增殖并促进其进一步分化；e)将步骤d)得到的成熟体胚接种到体胚成苗培养基上使其再生出完整植株。该方法所采用的外植体来源广泛，方便易得，所得的脆性胚性愈伤组织为农杆菌介导的地锦遗传转化提供了良好的受体。本发明还涉及用于该方法的一些培养基。
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公开(公告)号：CN106811482B
公开(公告)日：2020-08-18
申请号：CN201610856551.7
申请日：2016-09-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于三色堇分子育种领域，涉及三色堇种子浸泡法直接导入外源基因的遗传转化方法。采用已露白的三色堇种子为转化受体，经根癌农杆菌浸泡介导目的基因导入受体，利用卡那霉素对转化后的植株进行抗性筛选，通过载体上的启动子和目的基因设计特异引物进行PCR检测，同时通过表型观测筛选得到转基因植株。本发明解决了三色堇再生顽拗的局限性，避免了常规转化基于再生体系的组织培养等程序，直接通过种子浸泡法转化外源基因，为定向改良三色堇的性状提供了新方法；本发明转化三色堇的方法不经过再生培养阶段，简化了操作，降低了成本；转化周期短，露白种子浸泡后长出子叶即可移栽上盆，转化仅需15天左右。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106811482A
公开(公告)日：2017-06-09
申请号：CN201610856551.7
申请日：2016-09-26
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C12N15/8205
Abstract: 本发明属于三色堇分子育种领域，涉及三色堇种子浸泡法直接导入外源基因的遗传转化方法。采用已露白的三色堇种子为转化受体，经根癌农杆菌浸泡介导目的基因导入受体，利用卡那霉素对转化后的植株进行抗性筛选，通过载体上的启动子和目的基因设计特异引物进行PCR检测，同时通过表型观测筛选得到转基因植株。本发明解决了三色堇再生顽拗的局限性，避免了常规转化基于再生体系的组织培养等程序，直接通过种子浸泡法转化外源基因，为定向改良三色堇的性状提供了新方法；本发明转化三色堇的方法不经过再生培养阶段，简化了操作，降低了成本；转化周期短，露白种子浸泡后长出子叶即可移栽上盆，转化仅需15天左右。
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公开(公告)号：CN101810138A
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN200910273373.5
申请日：2009-12-25
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于草坪草育种技术领域，具体涉及一种矮生型狗牙根新品种的培育方法。本发明的特征在于，通过辐射诱变狗牙根种子，进行田间筛选，结合分子标记和同工酶鉴定等辅助选育，获得市场上所需要的矮生型狗牙根新品种。本发明的辐射源为通用的60Co-γ射线，其剂量为200Gy-500Gy，剂量率为1.0Gy/min。本发明获得的狗牙根新品种矮生特性明显，持绿性好，培育的矮生型狗牙根新品种建植的草坪在生长期内基本上免修剪。
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公开(公告)号：CN100382678C
公开(公告)日：2008-04-23
申请号：CN200510019550.9
申请日：2005-10-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明属于植物组织和细胞培养技术领域。以草坪草品种日本结缕草(Zoysiajaponica Steud)的成熟种子为外植体诱导愈伤组织，通过愈伤组织增殖(或通过长期继代)，最后诱导分化为完整小植株。本发明包括下列步骤：a)在含有愈伤诱导剂的培养基中培养日本结缕草的成熟种子并诱导愈伤组织；b)挑选状态良好的愈伤组织到增殖(或继代)培养基上增殖或继代；c)挑选状态良好的经过增殖或者继代的愈伤组织到分化培养基上诱导成完整小植株。本发明还包括将增殖或继代培养基上的黄色脆性胚性愈伤接种到继代培养基上作长期继代并保持分化。与现有技术相比，本发明显著提高了结缕草外植体愈伤诱导率和植株再生的效率。
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公开(公告)号：CN106978419B
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201710158231.9
申请日：2017-03-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 本发明属于植物基因工程领域，涉及矮牵牛花药发育早期特异表达启动子pPhGRP的鉴定及其应用。本发明分离的启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。对该启动子驱动的矮牵牛内源基因的定量PCR检测表明，该启动子驱动的基因仅在花药发育早期特异表达，不在其他时期或其他组织中表达。生物功能验证和GUS染色检测表明，启动子pPhGRP驱动报告基因在拟南芥的根、叶和角果中均不表达，只在花药中特异表达；启动子pPhGRP驱动的毒素基因Barnase只在矮牵牛花药中特异表达，不在其他时期或其他组织中表达，获得其他器官发育正常的雄性不育株系。本发明的启动子可用于雄性不育基因工程及花药发育调控和杂种优势利用中。
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公开(公告)号：CN103539539B
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201310476389.2
申请日：2013-10-12
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01N47/00
Abstract: 本发明属于花卉植物叶面喷施剂领域，具体涉及一种三色堇化学杀雄剂组合物及配制方法与应用。本发明的杀雄剂由苯磺隆、尿素、赤霉素、洗衣粉及水组成，其功效是对三色堇杀雄彻底，雌蕊育性正常，植株生长发育无不良影响，化学杀雄率为96.92%，异交结实正常，异交结实率为89.66%，种子杂交纯度达到100%。喷施期选三色堇自交系株高10～15cm，最大花蕾长1～2mm时进行叶面喷施，单株受药量控制在15～20ml，10d后复喷1次，各处理浓度不变，但施药量降为8～10ml/株。本发明杀雄剂协同效果好，生产成本低，对环境友好，易于推广应用。
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