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公开(公告)号：CN115725601B
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202211086626.X
申请日：2022-09-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/60
Abstract: 本发明提供了一种棉花细胞色素基因GhCB5b及应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明所述基因GhCB5b，与拟南芥AtCB5b高度同源。经实施例验证，在棉花超表达GhCB5b材料中，成熟纤维变长，强度提高，马克隆值降低；敲除GhCB5b基因后，则会抑制棉纤维伸长，强度和马克隆值没有显著变化。因此本发明所述基因GhCB5b可以改良纤维品质，具有广泛的应用价值，并为揭示GhCB5b在棉花纤维中可能的作用机制提供重要的指导思路。
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公开(公告)号：CN115725601A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202211086626.X
申请日：2022-09-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/60
Abstract: 本发明提供了一种棉花细胞色素基因GhCB5b及应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明所述基因GhCB5b，与拟南芥AtCB5b高度同源。经实施例验证，在棉花超表达GhCB5b材料中，成熟纤维变长，强度提高，马克隆值降低；敲除GhCB5b基因后，则会抑制棉纤维伸长，强度和马克隆值没有显著变化。因此本发明所述基因GhCB5b可以改良纤维品质，具有广泛的应用价值，并为揭示GhCB5b在棉花纤维中可能的作用机制提供重要的指导思路。
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公开(公告)号：CN113215161B
公开(公告)日：2025-04-01
申请号：CN202110609717.6
申请日：2021-06-01
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H4/00 , A01H5/12 , A01H6/60
Abstract: 本发明涉及除草剂技术领域，且公开了利用单碱基编辑技术创造除草剂抗性植物的方法，包括以下步骤：1)GhEPSP基因的sgRNA设计：选择陆地棉5‑烯醇式丙酮酰莽草酸‑3‑磷酸合酶(5‑Enolpyruvylshikimate‑3‑phosphatesynthase，EPSP合酶)为验证基因，利用在线软件CRISPR‑P(http：//cbi.hzau.edu.cn/cgi‑bin/CRISPR)(Lei et al 2014)在基因外显子区域设计sgRNA靶标序列，并且在编辑窗口内C‑T突变改变氨基酸功能的靶点，最终选择1个sgRNA用来构建单碱基系统植物表达载体。该利用单碱基编辑技术创造除草剂抗性植物的方法，在棉花中首次成功应用棉花基因组特性的单碱基编辑系统对棉花GhEPSP实现单碱基突变，突变位点未见其他作物报道，通过叶片草甘膦涂抹实验，表现出一定的草甘膦耐受性，提高了棉田除草效率，降低了人工除草成本，防范棉田超级杂草。
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公开(公告)号：CN117535220A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311499394.5
申请日：2023-11-13
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物分子育种技术领域，具体涉及一种棉花原生质体的制备方法及其应用和转化方法。本发明通过选择棉花黄化苗子叶或棉花黄化苗愈伤组织作为外植体，消耗了大部分次生成分，并通过实验处理减少干扰条件，在棉花中构建了省时、高效的原生质体制备方法。采用该方法可以进一步建立快速高效的原生质体瞬时转化体系，从外植体到获得成功表达GFP的原生质体只需13小时，可以快速获得高通量高活性的原生质体，获得的高通量高活性原生质体可应用于棉花亚细胞定位、体细胞杂交、遗传转化、植株再生等领域。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113174401A
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110608540.8
申请日：2021-06-01
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，且公开了基因编辑介导的外源基因敲入到棉花基因组的方法，包括以下步骤：1)菜豆黄矮病毒的复制子元件BeSRL和ULIR目的序列的获得：查阅文献DNA Replicons for Plant Genome Engineering从中获取菜豆黄矮病毒的复制子元件BeSRL和ULIR目的序列，然后经过(GenScript)合成；2)转化载体BeYDV‑Cas9‑KI的构建：利用限制性内切酶Sbf I酶切pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ载体，连接黄矮病毒的复制子元件BeSRL，将pRGEB32‑GhU6.7‑NPTⅡ进行Sbf I酶切。该基因编辑介导的外源基因敲入到棉花基因组的方法及载体，在棉花中首次成功建立了适应于棉花基因组特性的基因敲入编辑系统，该系统能够将外源基因定点插入到棉花基因组中，它将成为棉花功能基因组研究新的重要的技术手段，且在棉花中的敲入效率达1.0％。
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公开(公告)号：CN113278647A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110572919.8
申请日：2021-05-25
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种陆地棉基因组的高效定向基因调控的编辑方法，本发明对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的GhBE3‑Dcas9载体进行改造，以6TAL‑2VP64+2linker+dCas9融合蛋白取代原有的APOBEC1‑XTEN‑dCas9‑UGI蛋白，构建在棉花中具有定向上调单个基因表达量的载体Gh‑dCas9‑TV。选取GhEPSP和GhPAP1D为目标基因验证Gh‑dCas9‑TV在棉花中的应用。设计2个单靶标以及一个双靶标，利用农杆菌介导的遗传转化将转录激活编辑系统导入棉花基因组，对转基因植株进行表达量检测和转录组测序，检测本发明在异源四倍体棉花基因组中的编辑效率及全基因组和全转录组检测靶标基因，非靶标基因表达量效应。本发明具有良好的编辑效率和特异性。
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公开(公告)号：CN113215161A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110609717.6
申请日：2021-06-01
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H4/00 , A01H5/12 , A01H6/60
Abstract: 本发明涉及除草剂技术领域，且公开了利用单碱基编辑技术创造除草剂抗性植物的方法，包括以下步骤：1)GhEPSP基因的sgRNA设计：选择陆地棉5‑烯醇式丙酮酰莽草酸‑3‑磷酸合酶(5‑Enolpyruvylshikimate‑3‑phosphatesynthase，EPSP合酶)为验证基因，利用在线软件CRISPR‑P(http：//cbi.hzau.edu.cn/cgi‑bin/CRISPR)(Lei et al 2014)在基因外显子区域设计sgRNA靶标序列，并且在编辑窗口内C‑T突变改变氨基酸功能的靶点，最终选择1个sgRNA用来构建单碱基系统植物表达载体。该利用单碱基编辑技术创造除草剂抗性植物的方法，在棉花中首次成功应用棉花基因组特性的单碱基编辑系统对棉花GhEPSP实现单碱基突变，突变位点未见其他作物报道，通过叶片草甘膦涂抹实验，表现出一定的草甘膦耐受性，提高了棉田除草效率，降低了人工除草成本，防范棉田超级杂草。
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公开(公告)号：CN118910081A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202410973650.8
申请日：2024-07-19
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及一种棉花纤维长度基因FLAP1及其分子标记与应用。本发明通过确认FLAP1基因在自然群体中序列变异的真实性，发现其与棉花纤维长度显著相关，针对性的开发了相应的分子标记，并进一步在自然群体中进行验证，鉴定结果准确可靠，且鉴定筛选速度快，由此建立了高效的棉花纤维长度鉴定或辅助鉴定方法，可在早期进行筛选鉴定，大大缩短了育种周期，提高育种效率，显著降低育种成本，适于在大规模育种中应用，前景广阔。
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公开(公告)号：CN117887888A
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202410106462.5
申请日：2024-01-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C40B50/06 , C40B40/06
Abstract: 本发明涉及一种棉花60K功能位点基因芯片及其应用。其通过对3653个棉花样本的数据进行采集分析，对不同类别遗传变异位点的特征权重进行定义，按照一定长度的滑动窗口分别统计每个窗口的连锁得分并标记得分最高的位点作为窗口的候选变异并设计为探针。相较于已有的基因芯片，所用到的种质资源更广泛，包含更多经过多维数据注释的功能遗传变异的功能位点，因此在不同棉花品种间检测准确度更高，此外还可应用于棉花育种以及全基因组关联分析中，可提高关键基因的挖掘效率，提升育种效率，实际应用范围更为广泛。
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