公开(公告)号：CN101492669A

公开(公告)日：2009-07-29

申请号：CN200910060523.4

申请日：2009-01-15

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 杨利国 ,  王滇 ,  肖遥 ,  张鑫 ,  霍立军

IPC: C12N15/06

Abstract: 本发明具体涉及牛精子克隆胚胎的新方法。步骤如下：(1)将采集的牛卵巢洗后将卵丘－卵母细胞复合体抽出，体外培养，使卵母细胞培养发育至第二次减数分裂中期(2)对卵母细胞的细胞核染色和荧光定位，并去核得到去核的牛卵母细胞；(3)采集优秀种公牛的精液，或取自性控优秀种公牛的商用精液置液氮罐中贮存；(4)解冻精液并做获能处理，置于卵母细胞注射液中；(5)将两个获能精子注入去核牛卵母细胞的胞质内，得到精子重构胚；(6)将精子重构胚激活培养。本发明克服了传统核移植中供体细胞只能是体细胞单一模式，是利用双精子取代体细胞作为供体注入去核牛卵母细胞胞质内生产牛胚胎的一种新方法。

公开(公告)号：CN101492669B

公开(公告)日：2011-04-13

申请号：CN200910060523.4

申请日：2009-01-15

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 杨利国 ,  王滇 ,  肖遥 ,  张鑫 ,  霍立军

IPC: C12N15/06

Abstract: 本发明具体涉及牛精子克隆胚胎的新方法。步骤如下：(1)将采集的牛卵巢洗后将卵丘-卵母细胞复合体抽出，体外培养，使卵母细胞培养发育至第二次减数分裂中期(2)对卵母细胞的细胞核染色和荧光定位，并去核得到去核的牛卵母细胞；(3)采集优秀种公牛的精液，或取自性控优秀种公牛的商用精液置液氮罐中贮存；(4)解冻精液并做获能处理，置于卵母细胞注射液中；(5)将两个获能精子注入去核牛卵母细胞的胞质内，得到精子重构胚；(6)将精子重构胚激活培养。本发明克服了传统核移植中供体细胞只能是体细胞单一模式，是利用双精子取代体细胞作为供体注入去核牛卵母细胞胞质内生产牛胚胎的一种新方法。