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公开(公告)号：CN109251993B
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN201811165641.7
申请日：2018-10-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , G01N1/30
Abstract: 本发明涉及一种基于S基因型的为目标柑橘柚植株鉴定授粉供体的试剂盒，其包括S基因检测试剂组，还涉及一种基于S基因型的为目标柑橘柚植株鉴定授粉供体的方法，其特征在于，使用上述试剂盒检测目标柑橘柚植株和候选授粉供体的的S基因，当所述目标柑橘柚植株和候选授粉供体的S基因不同时，判定所述候选授粉供体可作为所述目标柑橘柚植株的授粉供体，当所述目标柑橘柚植株和候选授粉供体的S基因相同时，判定所述候选授粉供体不能作为所述目标柑橘柚植株的授粉供体。本发明的鉴定方法快捷、低廉、准确并且提供了适用于大型花柱的染色方法，便于授粉后对花粉管生长状态的观察。
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公开(公告)号：CN110273019A
公开(公告)日：2019-09-24
申请号：CN201910506486.9
申请日：2019-06-12
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种快速鉴定柑橘自交亲和性的分子标记及其应用，所述分子标记为Sm基因，所述Sm基因的编码区序列为SEQ ID NO：1，所述Sm基因的检测引物对序列为SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3；还涉及Sm基因在鉴定柑橘属植株自交亲和性中的应用及一种鉴定柑橘属植株自交亲和性的试剂盒及方法。本发明基于Sm突变位点序列设计了特异性扩增引物，可稳定检测Sm基因在柑橘属植株中的存在与否，进而可快速鉴定柑橘自交亲和性，这为柑橘亲和品种选育及栽培生产提供了有效指导。本发明的方法根据PCR检测结果即可快速鉴定柑橘自交亲和性，耗时短，无需通过授粉观察，只需要采集柑橘幼嫩叶片即可，方便快捷。
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公开(公告)号：CN109251993A
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201811165641.7
申请日：2018-10-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , G01N1/30
Abstract: 本发明涉及一种基于S基因型的为目标柑橘柚植株鉴定授粉供体的试剂盒，其包括S基因检测试剂组，还涉及一种基于S基因型的为目标柑橘柚植株鉴定授粉供体的方法，其特征在于，使用上述试剂盒检测目标柑橘柚植株和候选授粉供体的的S基因，当所述目标柑橘柚植株和候选授粉供体的S基因不同时，判定所述候选授粉供体可作为所述目标柑橘柚植株的授粉供体，当所述目标柑橘柚植株和候选授粉供体的S基因相同时，判定所述候选授粉供体不能作为所述目标柑橘柚植株的授粉供体。本发明的鉴定方法快捷、低廉、准确并且提供了适用于大型花柱的染色方法，便于授粉后对花粉管生长状态的观察。
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公开(公告)号：CN109266720A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201811195445.4
申请日：2018-10-15
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及一种离体验证柑橘柚类S-RNase自交不亲和功能的方法，包括以下步骤：步骤1：获得受体植株的S-RNase蛋白；步骤2：从供体植株中采集花粉；步骤3：用步骤1中得到的S-RNase蛋白处理步骤2中得到的花粉，测定所述S-RNase蛋白的处理对所述花粉萌发花粉管的影响。通过本发明的方法，可采取离体培养的方式快速验证柑橘自交不亲和花柱基因，利用合适浓度的重组蛋白处理恰当的花粉，可引起自交亲和或者不亲和反应，避免了柑橘S基因转基因验证的问题。
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公开(公告)号：CN109136242A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201811165648.9
申请日：2018-10-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/55 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明涉及一种决定柑橘柚植物自交不亲和性的基因，包括两个等位基因，分别为CgRNS1和CgRNS2，CgRNS1的序列如SEQ ID NO:1所示，CgRNS2的序列如SEQ ID NO:3所示；还涉及上述基因在鉴定柑橘柚植物自交不亲和性中的应用；还涉及一种鉴定柑橘柚植株自交不亲和性的试剂盒及方法。本发明首次克隆了柑橘的2个自交不亲和花柱基因，提供了验证柑橘自交不亲和花柱基因的一种有效手段，根据杂交后代基因型的分离比即可确定候选基因是否参与自交不亲和反应。该方法耗时短，只需要采集杂交后代幼嫩叶片即可，方便快捷。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110273019B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201910506486.9
申请日：2019-06-12
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种快速鉴定柑橘自交亲和性的分子标记及其应用，所述分子标记为Sm基因，所述Sm基因的编码区序列为SEQ ID NO：1，所述Sm基因的检测引物对序列为SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3；还涉及Sm基因在鉴定柑橘属植株自交亲和性中的应用及一种鉴定柑橘属植株自交亲和性的试剂盒及方法。本发明基于Sm突变位点序列设计了特异性扩增引物，可稳定检测Sm基因在柑橘属植株中的存在与否，进而可快速鉴定柑橘自交亲和性，这为柑橘亲和品种选育及栽培生产提供了有效指导。本发明的方法根据PCR检测结果即可快速鉴定柑橘自交亲和性，耗时短，无需通过授粉观察，只需要采集柑橘幼嫩叶片即可，方便快捷。
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公开(公告)号：CN109136242B
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN201811165648.9
申请日：2018-10-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/55 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明涉及一种决定柑橘柚植物自交不亲和性的基因，包括两个等位基因，分别为CgRNS1和CgRNS2，CgRNS1的序列如SEQ ID NO:1所示，CgRNS2的序列如SEQ ID NO:3所示；还涉及上述基因在鉴定柑橘柚植物自交不亲和性中的应用；还涉及一种鉴定柑橘柚植株自交不亲和性的试剂盒及方法。本发明首次克隆了柑橘的2个自交不亲和花柱基因，提供了验证柑橘自交不亲和花柱基因的一种有效手段，根据杂交后代基因型的分离比即可确定候选基因是否参与自交不亲和反应。该方法耗时短，只需要采集杂交后代幼嫩叶片即可，方便快捷。
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公开(公告)号：CN109266776B
公开(公告)日：2020-05-29
申请号：CN201811242378.7
申请日：2018-10-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及利用InDel标记鉴定柑橘柚类植物杂交子代的试剂盒，包括17个引物对中的一个或多个引物对；还涉及利用InDel标记鉴定柑橘柚类植物杂交子代的方法，包括以下步骤：获得待鉴定的柑橘柚类植物子代的基因组，以及预期的父本和母本的基因组，使用引物对分别扩增待鉴定的柑橘柚类植物子代的基因组以及预期的父本和母本的基因组中相应的InDel标记，将PCR扩增产物进行琼脂糖电泳，根据电泳带型判定待鉴定的柑橘柚类植物交子代是否是预期父本和母本杂交而得的杂交子代。本发明的试剂盒和方法可以简便快捷地运用于相关柚品种的科研或杂交育种实践中，同时为其他柚类品种的育种工作提供有效的方法和思路并且奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN111187803A
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN201911300419.8
申请日：2019-12-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/34
Abstract: 本发明涉及适用于芸香科植物体外鉴定RNase核糖核酸酶活性的方法，包括以下步骤：制备芸香科植物SRNase的体外重组蛋白样品；制备电泳所需要的凝胶和反应液；将体外重组蛋白样品与反应液在合适的条件下反应并电泳；电泳后，进行照胶，观察凝胶上的条带，在SDS-PAGE胶上，若在样品蛋白对应显示列上有不同于背景颜色的白色条带，说明样品具有核糖核酸酶活性；在琼脂糖凝胶上，若阴性对照列上有不同于背景颜色的白色条带，且随着重组蛋白的添加量增加，相应蛋白对应显示列上条带亮度越来越弱，则说明样品具有核糖核酸酶活性。本发明的检验核糖核酸酶活性的方法更加方便快捷，且适用于芸香科植物中核糖核酸酶活性的检测。
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公开(公告)号：CN109266776A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201811242378.7
申请日：2018-10-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及利用InDel标记鉴定柑橘柚类植物杂交子代的试剂盒，包括17个引物对中的一个或多个引物对；还涉及利用InDel标记鉴定柑橘柚类植物杂交子代的方法，包括以下步骤：获得待鉴定的柑橘柚类植物子代的基因组，以及预期的父本和母本的基因组，使用引物对分别扩增待鉴定的柑橘柚类植物子代的基因组以及预期的父本和母本的基因组中相应的InDel标记，将PCR扩增产物进行琼脂糖电泳，根据电泳带型判定待鉴定的柑橘柚类植物交子代是否是预期父本和母本杂交而得的杂交子代。本发明的试剂盒和方法可以简便快捷地运用于相关柚品种的科研或杂交育种实践中，同时为其他柚类品种的育种工作提供有效的方法和思路并且奠定了良好的基础。
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