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公开(公告)号:CN112080514B
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN202010938703.4
申请日:2020-09-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测恶臭假单胞菌胞内c‑di‑GMP水平的报告载体及其应用,该报告载体含有第一启动子、第一报告基因、第二启动子和第二报告基因,所述第一报告基因的表达受第一启动子控制,所述第二报告基因的表达受第二启动子控制,所述第一报告基因和第二报告基因分别为lacZ基因和egfp,两者方向相反,表达互不干扰。利用本发明构建的报告载体可以对恶臭假单胞菌胞内c‑di‑GMP水平进行检测,并且还能检测比较不同外界刺激对恶臭假单胞菌胞内c‑di‑GMP水平的影响,操作简便快捷,结果准确可靠。
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公开(公告)号:CN112063643B
公开(公告)日:2023-05-12
申请号:CN202010938475.0
申请日:2020-09-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测细菌中膜蛋白相互作用的表达载体及方法。首先构建带有麦芽糖结合蛋白标签(MBP)和组氨酸标签(8×His)的双标签蛋白表达载体,并用此载体表达和纯化难溶的膜蛋白,增加膜蛋白的可溶性;然后利用pull down技术检测膜蛋白与其它蛋白之间的相互作用,同时,本方法也可用于筛选细菌全细胞蛋白中与膜蛋白互作的蛋白。本发明提供的用于检测细菌中膜蛋白相互作用的方法,突破了原核生物中膜蛋白难溶性这一技术难点,为研究细菌膜蛋白功能提供实验手段,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN112063643A
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN202010938475.0
申请日:2020-09-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测细菌中膜蛋白相互作用的表达载体及方法。首先构建带有麦芽糖结合蛋白标签(MBP)和组氨酸标签(8×His)的双标签蛋白表达载体,并用此载体表达和纯化难溶的膜蛋白,增加膜蛋白的可溶性;然后利用pull down技术检测膜蛋白与其它蛋白之间的相互作用,同时,本方法也可用于筛选细菌全细胞蛋白中与膜蛋白互作的蛋白。本发明提供的用于检测细菌中膜蛋白相互作用的方法,突破了原核生物中膜蛋白难溶性这一技术难点,为研究细菌膜蛋白功能提供实验手段,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN112080514A
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN202010938703.4
申请日:2020-09-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测恶臭假单胞菌胞内c‑di‑GMP水平的报告载体及其应用,该报告载体含有第一启动子、第一报告基因、第二启动子和第二报告基因,所述第一报告基因的表达受第一启动子控制,所述第二报告基因的表达受第二启动子控制,所述第一报告基因和第二报告基因分别为lacZ基因和egfp,两者方向相反,表达互不干扰。利用本发明构建的报告载体可以对恶臭假单胞菌胞内c‑di‑GMP水平进行检测,并且还能检测比较不同外界刺激对恶臭假单胞菌胞内c‑di‑GMP水平的影响,操作简便快捷,结果准确可靠。
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