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公开(公告)号:CN109837285B
公开(公告)日:2022-10-04
申请号:CN201711211438.4
申请日:2017-11-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C07K14/415 , C12N15/70 , C12P21/02 , C07K1/14 , G01N33/68 , C07K16/16 , C07K16/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了柑橘过敏原Cit s 3.01抗原表达纯化、多克隆抗体制备及应用,并具体公开了一种密码子优化的芸香科植物过敏原Cit s 3.01基因,其特征在于,包括SEQ ID NO:2所示的序列。本发明通过优化Cit s 3.01基因原核表达序列,基因合成,构建过敏原Cit s 3.01的原核表达体系,利用已表达纯化的rCit s 3.01蛋白制备兔多克隆抗体Anti‑Cit s 3.01,对诸如柑橘果皮、果肉中过敏原Cit s 3.01含量进行检测,并可以利用光密度值衡量Western blot印迹强弱的方法评价诸如柑橘果实可食用部分过敏原Cit s 3.01潜在的致敏性。
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公开(公告)号:CN109837283B
公开(公告)日:2022-10-04
申请号:CN201711211435.0
申请日:2017-11-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P21/02 , C12Q1/18 , C07K14/415 , A01N63/36 , A01N47/44 , A01P3/00 , G01N27/62 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了柑橘天然抑菌蛋白CsLTP1制备及其应用,并具体公开了一种密码子优化的芸香科植物中非特异性脂转移蛋白CsLTP1基因,其特征在于,包括SEQ ID NO:2所示的序列。本发明通过抑菌蛋白CsLTP1密码子优化,原核表达载体构建,rCsLTP1的重组表达、纯化及鉴定,得到的rCsLTP1蛋白具备较好的热稳定性、酸碱稳定性,而且在活体条件下,对柑橘采后绿霉病病原菌指状青霉菌具有明显的抑制效果,与现有技术相对,本发明中的植物源抑菌蛋白CsLTP1是一种能够大规模生产的天然抑菌剂,能够显著降低柑橘果实采后绿霉病的发生,且减少化学杀菌剂造成的危害,在柑橘果实防腐保鲜领域具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN106701753B
公开(公告)日:2019-02-12
申请号:CN201510776629.X
申请日:2015-11-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了一种柑橘类植物Cit sh1基因的启动子、分子标记及应用,其中,柑橘类植物Cit sh1基因的启动子由SEQ ID:1~SEQ ID:6中任意一条的核苷酸序列组成。本发明通过获得易诱发人体上火等炎症反应相关蛋白Cit sh1的基因序列信息,对特异性引物进行改进,分别获得了柑橘类植物Cit sh1基因的启动子、基于柑橘类植物Cit sh 1基因启动子序列差异的分子标记,能够有效解决现有的分子标记无法判断柑橘类植物是否诱发人体炎症的问题,并且该分子标记可以将上火柑橘品种和不上火柑橘品种有效地区分开来,为例如柑橘育种选育不上火品种提供支持。
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公开(公告)号:CN105441561A
公开(公告)日:2016-03-30
申请号:CN201511019719.0
申请日:2015-12-30
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q2600/13 , C12Q2600/158 , C12Q2531/113 , C12Q2561/101 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一种检测芸香科植物过敏原基因的引物、Taqman探针、质粒标准品以及它们的应用,其中的引物基于芸香科植物过敏原基因,包括正向引物和反向引物,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:(3×n-2)所示,所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:(3×n-1)所示,其中所述n为任意一个大于等于1、小于等于3的正整数。本发明通过对Realtime Taqman PCR检测芸香科植物过敏原基因绝对表达量使用的引物、Taqman探针、质粒标准品的核苷酸序列等进行改进,能用于评价芸香科水果食用部分的致敏能力,对芸香科植物的遗传育种改良和食品安全有重要意义。
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公开(公告)号:CN109837286B
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN201711211439.9
申请日:2017-11-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C07K14/415 , C12N15/70 , C12P21/02 , C07K1/14 , G01N33/68 , C07K16/16 , C07K16/06
Abstract: 本发明公开了柑橘过敏原Cit s 2.01抗原表达纯化、多克隆抗体制备及应用,并具体公开了一种密码子优化的芸香科植物过敏原Cit s 2.01基因,其特征在于,包括SEQ ID NO:2所示的序列。本发明通过优化Cit s 2.01基因原核表达序列,基因合成,构建过敏原Cit s 2.01的原核表达体系,利用已表达纯化的rCit s 2.01蛋白制备兔多克隆抗体Anti‑Cit s 2.01,对诸如柑橘果皮、果肉中过敏原Cit s 2.01含量进行检测,并可以利用光密度值衡量Western blot印迹强弱的方法评价诸如柑橘果实可食用部分过敏原Cit s 2.01潜在的致敏性。
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公开(公告)号:CN106701776B
公开(公告)日:2020-05-19
申请号:CN201510777628.7
申请日:2015-11-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/78
Abstract: 本发明公开了一个芸香科植物引起人体上火的基因及其在芸香科植物遗传改良育种中的应用,其中芸香科植物引起人体上火的基因具有如SEQ ID No.6所示的核苷酸序列,或者由于增加、缺失或替换一个或多个核苷酸导致的与SEQ ID No.6所示的核苷酸序列同源性不小于80%、且功能相同的衍生核苷酸序列,同时其对应的氨基酸序列也被公开。本发明通过对芸香科植物(例如柑橘)诱导人体上火的关键基因Citsh1进行分离克隆,并利用该基因构建基因沉默载体,通过农杆菌转化对芸香科植物进行遗传育种改良,从而培育出不引起人体上火的芸香科植物。
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公开(公告)号:CN109837286A
公开(公告)日:2019-06-04
申请号:CN201711211439.9
申请日:2017-11-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C07K14/415 , C12N15/70 , C12P21/02 , C07K1/14 , G01N33/68 , C07K16/16 , C07K16/06
Abstract: 本发明公开了柑橘过敏原Cit s 2.01抗原表达纯化、多克隆抗体制备及应用,并具体公开了一种密码子优化的芸香科植物过敏原Cit s 2.01基因,其特征在于,包括SEQ ID NO:2所示的序列。本发明通过优化Cit s 2.01基因原核表达序列,基因合成,构建过敏原Cit s 2.01的原核表达体系,利用已表达纯化的rCit s 2.01蛋白制备兔多克隆抗体Anti-Cit s 2.01,对诸如柑橘果皮、果肉中过敏原Cit s 2.01含量进行检测,并可以利用光密度值衡量Western blot印迹强弱的方法评价诸如柑橘果实可食用部分过敏原Cit s 2.01潜在的致敏性。
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公开(公告)号:CN109837284A
公开(公告)日:2019-06-04
申请号:CN201711211436.5
申请日:2017-11-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C07K14/415 , C12N15/70 , C12P21/02 , C07K1/14 , G01N33/68 , A23B7/154 , C12Q1/18 , C12R1/80
Abstract: 本发明公开了柑橘天然抑菌蛋白CsLTP3制备及其应用,并具体公开了一种密码子优化的芸香科植物中非特异性脂转移蛋白CsLTP3基因,其特征在于,包括SEQ ID NO:2所示的序列。本发明通过抑菌蛋白CsLTP3密码子优化,原核表达载体构建,rCsLTP3的重组表达、纯化及鉴定,得到的rCsLTP3蛋白具备较好的热稳定性、酸碱稳定性,而且在活体条件下,对柑橘采后绿霉病病原菌指状青霉菌具有明显的抑制效果,与现有技术相对,本发明中的植物源抑菌蛋白CsLTP3是一种能够大规模生产的天然抑菌剂,能够显著降低柑橘果实采后绿霉病的发生,且减少化学杀菌剂造成的危害,在柑橘果实防腐保鲜领域具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN109837282B
公开(公告)日:2022-08-02
申请号:CN201711211394.5
申请日:2017-11-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C12P21/02 , C07K14/415 , C07K1/22 , C07K16/16 , C07K16/06 , G01N27/62 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了柑橘过敏原Cit s 1.01抗原表达纯化、多克隆抗体制备及应用,并具体公开了一种密码子优化的芸香科植物过敏原Cit s 1.01基因,其特征在于,包括SEQ ID NO:2所示的序列。本发明通过优化Cit s 1.01基因原核表达序列,基因合成,构建过敏原Cit s 1.01的原核表达体系,利用已表达纯化的rCit s 1.01蛋白制备兔多克隆抗体Anti‑Cit s 1.01,对诸如柑橘果皮、果肉中过敏原Cit s 1.01含量进行检测,并可以利用光密度值衡量Western blot印迹强弱的方法评价诸如柑橘果实可食用部分过敏原Cit s 1.01潜在的致敏性。
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公开(公告)号:CN109837284B
公开(公告)日:2022-10-04
申请号:CN201711211436.5
申请日:2017-11-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/11 , C07K14/415 , C12N15/70 , C12P21/02 , C07K1/14 , G01N33/68 , A23B7/154 , C12Q1/18 , C12R1/80
Abstract: 本发明公开了柑橘天然抑菌蛋白CsLTP3制备及其应用,并具体公开了一种密码子优化的芸香科植物中非特异性脂转移蛋白CsLTP3基因,其特征在于,包括SEQ ID NO:2所示的序列。本发明通过抑菌蛋白CsLTP3密码子优化,原核表达载体构建,rCsLTP3的重组表达、纯化及鉴定,得到的rCsLTP3蛋白具备较好的热稳定性、酸碱稳定性,而且在活体条件下,对柑橘采后绿霉病病原菌指状青霉菌具有明显的抑制效果,与现有技术相对,本发明中的植物源抑菌蛋白CsLTP3是一种能够大规模生产的天然抑菌剂,能够显著降低柑橘果实采后绿霉病的发生,且减少化学杀菌剂造成的危害,在柑橘果实防腐保鲜领域具有良好的应用前景。
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