公开(公告)号：CN112239736B

公开(公告)日：2022-08-23

申请号：CN202010985680.2

申请日：2020-09-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈孝煊 ,  许荔立 ,  吴志新 ,  谢梦琪 ,  张诗雨

IPC: C12N1/20 ,  C12Q1/18 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/40 ,  C12Q1/37 ,  A23K50/80 ,  A23K10/18 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明涉及一株解淀粉芽孢杆菌菌株，命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)A23，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020381。本发明还公开了该菌株制备的菌剂、筛选方法及应用。该菌株分离自克氏原螯虾肠道，可以改善克氏原螯虾肠道菌群，能显著提高克氏原螯虾对WSSV的抗病力。该菌株具有安全性，耐高温，耐酸，便于贮存。该菌株具有广谱抑菌性，对多种水产常见致病菌具有拮抗作用。

公开(公告)号：CN109294989A

公开(公告)日：2019-02-01

申请号：CN201811086926.1

申请日：2018-09-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈孝煊 ,  周成翀 ,  吴志新 ,  李思思 ,  王辉 ,  郭道远

IPC: C12N5/0784

Abstract: 本发明提供一种草鱼树突状细胞分离与原代培养的方法，包括如下步骤：步骤1、草鱼脾脏和头肾的分离：将草鱼麻醉致死，取出脾脏和头肾，去掉粘附的结缔组织和脂肪组织并浸泡；步骤2、草鱼脾脏和头肾单细胞悬液的制备：连续筛网过滤，获取细胞悬液；步骤3、草鱼脾脏和头肾单核细胞的分离：Ficoll分离，离心后吸取白膜层的细胞并洗涤；步骤4、静置培养：调整单核细胞浓度，置于培养箱培养；步骤5、草鱼树突状细胞的富集纯化：培养一段时间后收集悬浮细胞，采用密度梯度离心的方法纯化草鱼树突状细胞。本发明可有效制备大量草鱼树突状细胞，而且获得的草鱼树突状细胞纯度高可达80％以上；操作过程简单明了，耗时短。

公开(公告)号：CN112239736A

公开(公告)日：2021-01-19

申请号：CN202010985680.2

申请日：2020-09-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈孝煊 ,  许荔立 ,  吴志新 ,  谢梦琪 ,  张诗雨

IPC: C12N1/20 ,  C12Q1/18 ,  C12Q1/04 ,  C12Q1/40 ,  C12Q1/37 ,  A23K50/80 ,  A23K10/18 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明涉及一株解淀粉芽孢杆菌菌株，命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)A23，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020381。本发明还公开了该菌株制备的菌剂、筛选方法及应用。该菌株分离自克氏原螯虾肠道，可以改善克氏原螯虾肠道菌群，能显著提高克氏原螯虾对WSSV的抗病力。该菌株具有安全性，耐高温，耐酸，便于贮存。该菌株具有广谱抑菌性，对多种水产常见致病菌具有拮抗作用。

公开(公告)号：CN112239735A

公开(公告)日：2021-01-19

申请号：CN202010985674.7

申请日：2020-09-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈孝煊 ,  吴志新 ,  许荔立 ,  汤莹 ,  赵慧 ,  罗燕儿 ,  黄灿

IPC: C12N1/20 ,  C12N1/02 ,  C12Q1/02 ,  A01K61/13 ,  A23K50/80 ,  A23K10/18 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及一种枯草芽孢杆菌菌株，命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Ch9，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020380。本发明还公开了该菌株制备的菌剂、筛选方法及应用。该菌株具有较强的产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶的能力。该菌株可应用草鱼养殖中，在生长上，可以显著提高草鱼的特定生长率，降低饵料系数；减少因高脂日粮和嗜水气单胞菌感染造成的肝脏损伤，维持肝脏正常脂质代谢功能，减少脂质在肝脏中的累积。该菌株还能抑制嗜水气单胞菌对草鱼肠上皮细胞的黏附，减弱嗜水气单胞菌对细胞的损伤，并对嗜水气单胞菌造成的草鱼肠粘膜结构损伤具有保护作用。

公开(公告)号：CN109294989B

公开(公告)日：2021-11-09

申请号：CN201811086926.1

申请日：2018-09-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈孝煊 ,  周成翀 ,  吴志新 ,  李思思 ,  王辉 ,  郭道远

IPC: C12N5/0784

Abstract: 本发明提供一种草鱼树突状细胞分离与原代培养的方法，包括如下步骤：步骤1、草鱼脾脏和头肾的分离：将草鱼麻醉致死，取出脾脏和头肾，去掉粘附的结缔组织和脂肪组织并浸泡；步骤2、草鱼脾脏和头肾单细胞悬液的制备：连续筛网过滤，获取细胞悬液；步骤3、草鱼脾脏和头肾单核细胞的分离：Ficoll分离，离心后吸取白膜层的细胞并洗涤；步骤4、静置培养：调整单核细胞浓度，置于培养箱培养；步骤5、草鱼树突状细胞的富集纯化：培养一段时间后收集悬浮细胞，采用密度梯度离心的方法纯化草鱼树突状细胞。本发明可有效制备大量草鱼树突状细胞，而且获得的草鱼树突状细胞纯度高可达80％以上；操作过程简单明了，耗时短。

公开(公告)号：CN112239735B

公开(公告)日：2022-05-24

申请号：CN202010985674.7

申请日：2020-09-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈孝煊 ,  吴志新 ,  许荔立 ,  汤莹 ,  赵慧 ,  罗燕儿 ,  黄灿

IPC: C12N1/20 ,  C12N1/02 ,  C12Q1/02 ,  A01K61/13 ,  A23K50/80 ,  A23K10/18 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及一种枯草芽孢杆菌菌株，命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Ch9，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020380。本发明还公开了该菌株制备的菌剂、筛选方法及应用。该菌株具有较强的产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶的能力。该菌株可应用草鱼养殖中，在生长上，可以显著提高草鱼的特定生长率，降低饵料系数；减少因高脂日粮和嗜水气单胞菌感染造成的肝脏损伤，维持肝脏正常脂质代谢功能，减少脂质在肝脏中的累积。该菌株还能抑制嗜水气单胞菌对草鱼肠上皮细胞的黏附，减弱嗜水气单胞菌对细胞的损伤，并对嗜水气单胞菌造成的草鱼肠粘膜结构损伤具有保护作用。