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公开(公告)号:CN102102126B
公开(公告)日:2013-02-13
申请号:CN201010575492.9
申请日:2010-12-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于转基因成分的检测技术领域,涉及一种转人乳铁蛋白基因牛的转基因成分的快速检测方法。本发明与环介导等温扩增反应有关。步骤是:(1)引物设计:根据人乳铁蛋白基因序列设计特异引物,该引物的序列如SEQID NO:1-4所示。(2)建立环介导等温扩增反应方法,即以FIP、BIP为内引物,F3、B3为外引物对人乳铁蛋白基因进行恒温扩增,得特异扩增片段。(3)对环介导恒温扩增产物进行分析:采用琼脂糖凝胶电泳和荧光染料染色对扩增产物进行分析,根据凝胶成像观察是否出现梯形条带,判定是否含有转基因成分;或在日光下肉眼观察将环介导等温扩增产物的结果。本发明简便,快速,特异性强,且成本较低,适合基层应用。
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公开(公告)号:CN102102126A
公开(公告)日:2011-06-22
申请号:CN201010575492.9
申请日:2010-12-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于转基因成分的检测技术领域,涉及一种转人乳铁蛋白基因牛的转基因成分的快速检测方法。本发明与环介导等温扩增反应有关。步骤是:(1)引物设计:根据人乳铁蛋白基因序列设计特异引物,该引物的序列如SEQID NO:1-4所示。(2)建立环介导等温扩增反应方法,即以FIP、BIP为内引物,F3、B3为外引物对人乳铁蛋白基因进行恒温扩增,得特异扩增片段。(3)对环介导恒温扩增产物进行分析:采用琼脂糖凝胶电泳和荧光染料染色对扩增产物进行分析,根据凝胶成像观察是否出现梯形条带,判定是否含有转基因成分;或在日光下肉眼观察将环介导等温扩增产物的结果。本发明简便,快速,特异性强,且成本较低,适合基层应用。
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公开(公告)号:CN102879561B
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201110197450.0
申请日:2011-07-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/544 , G01N33/532
Abstract: 本发明属于转基因成分检测技术领域,与免疫胶体金技术有关。公开了一种用于快速检测转人乳铁蛋白(hLF)基因牛奶的免疫胶体金试纸条及其制备方法,本发明的试纸条,包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬,其特征在于,在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫;所述的结合垫上包被有所述的抗hLF多克隆抗体-胶体金标记物,该多克隆抗体通过人工合成hLF多肽后免疫家兔而制得。所述的硝酸纤维素膜上分别包被有hLF蛋白构成的检测线(5)和山羊抗兔IgG的质控线(6)。本发明的试纸条特异性强,操作简便,检测快速。
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公开(公告)号:CN102879561A
公开(公告)日:2013-01-16
申请号:CN201110197450.0
申请日:2011-07-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/544 , G01N33/532
Abstract: 本发明属于转基因成分检测技术领域,与免疫胶体金技术有关。公开了一种用于快速检测转人乳铁蛋白(hLF)基因牛奶的免疫胶体金试纸条及其制备方法,本发明的试纸条,包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬,其特征在于,在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫;所述的结合垫上包被有所述的抗hLF多克隆抗体-胶体金标记物,该多克隆抗体通过人工合成hLF多肽后免疫家兔而制得。所述的硝酸纤维素膜上分别包被有hLF蛋白构成的检测线(5)和山羊抗兔IgG的质控线(6)。本发明的试纸条特异性强,操作简便,检测快速。
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公开(公告)号:CN102102127B
公开(公告)日:2012-12-19
申请号:CN201010575512.2
申请日:2010-12-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于转基因成分的检测技术领域,涉及一种转人α-乳清蛋白基因牛的转基因成分的快速检测方法。本发明与环介导等温扩增反应有关。步骤是:(1)引物设计:根据人α-乳清蛋白基因序列设计特异引物,该引物的序列如SEQ ID NO:1-4所示。(2)建立环介导等温扩增反应方法,即以FIP、BIP为内引物,F3、B3为外引物对人α-乳清蛋白基因进行恒温扩增,得特异扩增片段。(3)对环介导恒温扩增产物进行分析:采用琼脂糖凝胶电泳和荧光染料染色对扩增产物进行分析,根据凝胶成像观察是否出现梯形条带,判定是否含有转基因成分;或在日光下肉眼观察将环介导等温扩增产物的结果。本发明简便,快速,特异性强,且成本较低,适合基层应用。
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公开(公告)号:CN102102127A
公开(公告)日:2011-06-22
申请号:CN201010575512.2
申请日:2010-12-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明属于转基因成分的检测技术领域,涉及一种转人α-乳清蛋白基因牛的转基因成分的快速检测方法。本发明与环介导等温扩增反应有关。步骤是:(1)引物设计:根据人α-乳清蛋白基因序列设计特异引物,该引物的序列如SEQ ID NO:1-4所示。(2)建立环介导等温扩增反应方法,即以FIP、BIP为内引物,F3、B3为外引物对人α-乳清蛋白基因进行恒温扩增,得特异扩增片段。(3)对环介导恒温扩增产物进行分析:采用琼脂糖凝胶电泳和荧光染料染色对扩增产物进行分析,根据凝胶成像观察是否出现梯形条带,判定是否含有转基因成分;或在日光下肉眼观察将环介导等温扩增产物的结果。本发明简便,快速,特异性强,且成本较低,适合基层应用。
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