一种适用于转人乳铁蛋白基因牛的快速简便检测方法

    公开(公告)号:CN102102126B

    公开(公告)日:2013-02-13

    申请号:CN201010575492.9

    申请日:2010-12-07

    Abstract: 本发明属于转基因成分的检测技术领域,涉及一种转人乳铁蛋白基因牛的转基因成分的快速检测方法。本发明与环介导等温扩增反应有关。步骤是:(1)引物设计:根据人乳铁蛋白基因序列设计特异引物,该引物的序列如SEQID NO:1-4所示。(2)建立环介导等温扩增反应方法,即以FIP、BIP为内引物,F3、B3为外引物对人乳铁蛋白基因进行恒温扩增,得特异扩增片段。(3)对环介导恒温扩增产物进行分析:采用琼脂糖凝胶电泳和荧光染料染色对扩增产物进行分析,根据凝胶成像观察是否出现梯形条带,判定是否含有转基因成分;或在日光下肉眼观察将环介导等温扩增产物的结果。本发明简便,快速,特异性强,且成本较低,适合基层应用。

    一种适用于转人乳铁蛋白基因牛的快速简便检测方法

    公开(公告)号:CN102102126A

    公开(公告)日:2011-06-22

    申请号:CN201010575492.9

    申请日:2010-12-07

    Abstract: 本发明属于转基因成分的检测技术领域,涉及一种转人乳铁蛋白基因牛的转基因成分的快速检测方法。本发明与环介导等温扩增反应有关。步骤是:(1)引物设计:根据人乳铁蛋白基因序列设计特异引物,该引物的序列如SEQID NO:1-4所示。(2)建立环介导等温扩增反应方法,即以FIP、BIP为内引物,F3、B3为外引物对人乳铁蛋白基因进行恒温扩增,得特异扩增片段。(3)对环介导恒温扩增产物进行分析:采用琼脂糖凝胶电泳和荧光染料染色对扩增产物进行分析,根据凝胶成像观察是否出现梯形条带,判定是否含有转基因成分;或在日光下肉眼观察将环介导等温扩增产物的结果。本发明简便,快速,特异性强,且成本较低,适合基层应用。

    一种牛奶中人乳铁蛋白筛查试纸条及制备方法

    公开(公告)号:CN102879561B

    公开(公告)日:2014-09-10

    申请号:CN201110197450.0

    申请日:2011-07-13

    Abstract: 本发明属于转基因成分检测技术领域,与免疫胶体金技术有关。公开了一种用于快速检测转人乳铁蛋白(hLF)基因牛奶的免疫胶体金试纸条及其制备方法,本发明的试纸条,包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬,其特征在于,在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫;所述的结合垫上包被有所述的抗hLF多克隆抗体-胶体金标记物,该多克隆抗体通过人工合成hLF多肽后免疫家兔而制得。所述的硝酸纤维素膜上分别包被有hLF蛋白构成的检测线(5)和山羊抗兔IgG的质控线(6)。本发明的试纸条特异性强,操作简便,检测快速。

    一种适用于转人溶菌酶基因牛、猪的快速简便检测方法

    公开(公告)号:CN102864210A

    公开(公告)日:2013-01-09

    申请号:CN201110197462.3

    申请日:2011-07-05

    Abstract: 本发明属于转基因动物中转基因成分的分子检测技术领域,具体涉及提供一种适用于转人溶菌酶基因牛、猪的快速简便检测方法,本发明利用环介导等温扩增法原理,准确快速检测出转基因牛、猪中的人溶菌酶基因。本发明不需要特殊设备,为基层检测人员提供一种快速简便的方法,本发明的方法同时也为转基因生物及其产品安全评价和管理提供了实用的分子检测方法。

    一种牛奶中人乳铁蛋白筛查试纸条及制备方法

    公开(公告)号:CN102879561A

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201110197450.0

    申请日:2011-07-13

    Abstract: 本发明属于转基因成分检测技术领域,与免疫胶体金技术有关。公开了一种用于快速检测转人乳铁蛋白(hLF)基因牛奶的免疫胶体金试纸条及其制备方法,本发明的试纸条,包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬,其特征在于,在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫;所述的结合垫上包被有所述的抗hLF多克隆抗体-胶体金标记物,该多克隆抗体通过人工合成hLF多肽后免疫家兔而制得。所述的硝酸纤维素膜上分别包被有hLF蛋白构成的检测线(5)和山羊抗兔IgG的质控线(6)。本发明的试纸条特异性强,操作简便,检测快速。

    一种适用于转人溶菌酶基因牛、猪的快速简便检测方法

    公开(公告)号:CN102864210B

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201110197462.3

    申请日:2011-07-05

    Abstract: 本发明属于转基因动物中转基因成分的分子检测技术领域,具体涉及提供一种适用于转人溶菌酶牛、猪的快速简便检测方法,本发明利用环介导等温扩增法原理,准确快速检测出转基因牛、猪中的人溶菌酶基因。本发明不需要特殊设备,为基层检测人员提供一种快速简便的方法,本发明的方法同时也为转基因生物及其产品安全评价和管理提供了实用的分子检测方法。

    一种适用于转人α-乳清蛋白基因牛的快速简便检测方法

    公开(公告)号:CN102102127B

    公开(公告)日:2012-12-19

    申请号:CN201010575512.2

    申请日:2010-12-07

    Abstract: 本发明属于转基因成分的检测技术领域,涉及一种转人α-乳清蛋白基因牛的转基因成分的快速检测方法。本发明与环介导等温扩增反应有关。步骤是:(1)引物设计:根据人α-乳清蛋白基因序列设计特异引物,该引物的序列如SEQ ID NO:1-4所示。(2)建立环介导等温扩增反应方法,即以FIP、BIP为内引物,F3、B3为外引物对人α-乳清蛋白基因进行恒温扩增,得特异扩增片段。(3)对环介导恒温扩增产物进行分析:采用琼脂糖凝胶电泳和荧光染料染色对扩增产物进行分析,根据凝胶成像观察是否出现梯形条带,判定是否含有转基因成分;或在日光下肉眼观察将环介导等温扩增产物的结果。本发明简便,快速,特异性强,且成本较低,适合基层应用。

    一种适用于转人α-乳清蛋白基因牛的快速简便检测方法

    公开(公告)号:CN102102127A

    公开(公告)日:2011-06-22

    申请号:CN201010575512.2

    申请日:2010-12-07

    Abstract: 本发明属于转基因成分的检测技术领域,涉及一种转人α-乳清蛋白基因牛的转基因成分的快速检测方法。本发明与环介导等温扩增反应有关。步骤是:(1)引物设计:根据人α-乳清蛋白基因序列设计特异引物,该引物的序列如SEQ ID NO:1-4所示。(2)建立环介导等温扩增反应方法,即以FIP、BIP为内引物,F3、B3为外引物对人α-乳清蛋白基因进行恒温扩增,得特异扩增片段。(3)对环介导恒温扩增产物进行分析:采用琼脂糖凝胶电泳和荧光染料染色对扩增产物进行分析,根据凝胶成像观察是否出现梯形条带,判定是否含有转基因成分;或在日光下肉眼观察将环介导等温扩增产物的结果。本发明简便,快速,特异性强,且成本较低,适合基层应用。

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