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公开(公告)号：CN117126872A
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202210548274.9
申请日：2022-05-18
Applicant: 华东理工大学 , 浙江赫凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种提高虾青素产量的解脂耶氏酵母基因工程菌的构建方法，包括将解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)内源的3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶基因HMG1转入产虾青素的解脂耶氏酵母基因工程菌DN21的染色体中，获得虾青素产量提高的解脂耶氏酵母基因工程菌。所述方法还包括进一步将解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)内源的过氧化氢酶基因CAT敲除，得到过氧化氢敏感型解脂耶氏酵母菌株；以及对获得的基因工程菌进行一轮或多轮过氧化氢介导的连续适应性进化，然后筛选高产菌株。本发明得到的产虾青素的解脂耶氏酵母基因工程菌的虾青素的产量相比出发菌株得到了显著的提高，并且经过连续传代培养后稳定性良好，能够用于大规模的商业化生产。
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公开(公告)号：CN116445312A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310541592.7
申请日：2023-05-15
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种利用甘油生产赤藓糖醇的解脂耶氏酵母基因工程菌，所述解脂耶氏酵母基因工程菌通过非同源末端连接介导的随机插入突变，筛选细胞生长和赤藓糖醇产量均提升较高的菌株而得到。进一步的，所述基因工程菌过表达甘油代谢二羟丙酮途径的甘油脱氢酶基因GCY3或ARA1和二羟丙酮激酶基因DAK2。进一步的，所述基因工程菌过表达非氧化磷酸戊糖途径的转酮酶基因TKL1和转醛酶基因TAL1。本发明还公开了所述基因工程菌的构建方法和应用。本发明通过构建突变子文库筛选获得优势基因工程菌具有耐受高浓度甘油的特性，且底物转化率和甘油利用率均显著高于出发菌株。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116656520A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310853228.4
申请日：2023-07-12
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种解脂耶氏酵母基因工程菌及其在β‑胡萝卜素生产中的应用。本发明从自然界高含油脂的环境中分离筛选获得产胞内油脂的野生型解脂耶氏酵母菌株，再以此为出发菌株，经紫外诱变，获得一株胞内油脂合成能力显著增强的突变株，然后将卷枝毛霉来源的carB、carRP和解脂耶氏酵母内源的GGPPS表达盒以多拷贝形式定点整合到突变株SBT的rDNA位点，获得一株高拷贝且能生产β‑胡萝卜素的基因工程菌SBT04‑015，最后对基因工程菌SBT04‑015中的磷酸酶yl_PP基因进行定点敲除，获得能够积累较高胞内油脂且高效生产β‑胡萝卜素的解脂耶氏酵母基因工程菌SBT04‑016。
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公开(公告)号：CN116574173A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202310761047.9
申请日：2023-06-25
Applicant: 浙江诸暨聚源生物技术有限公司 , 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种蛋白稳定性增强的重组人源纤连蛋白突变体及其表达菌株。所述的重组人源纤连蛋白突变体为将重组人源纤连蛋白中的第28位或第78位氨基酸突变为异亮氨酸或脯氨酸所形成的突变体。本发明的突变体相较于原始重组人源纤连蛋白，能够在毕赤酵母中稳定表达且产量提高，具有优异的促进人成纤维细胞的细胞增殖、迁移和黏附性能，表现出优异的细胞生物学功效，在护肤、美容和组织工程领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN116555318A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202210110119.9
申请日：2022-01-29
Applicant: 华东理工大学 , 浙江赫凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种产反式橙花叔醇的解脂耶氏酵母基因工程菌的构建方法，包括如下步骤：先将解脂耶氏酵母内源的HMGR基因导入解脂耶氏酵母中，得到解脂耶氏酵母基因工程菌SBT02‑16；然后再将1个拷贝的优化的含有点突变的FaNES1G498Q基因导入解脂耶氏酵母基因工程菌SBT02‑16中获得解脂耶氏酵母基因工程菌SBT02‑18，其中，优化的含有点突变的FaNES1G498Q基因的序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了用上述的构建方法构建获得的解脂耶氏酵母基因工程菌及其在生产反式橙花叔醇中的应用。本发明的解脂耶氏酵母基因工程菌能极大幅度地提高反式橙花叔醇的产量。
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公开(公告)号：CN116497052A
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202210058092.3
申请日：2022-01-19
Applicant: 华东理工大学 , 浙江赫凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种生产虾青素的解脂耶氏酵母基因工程菌的构建方法，包括将不同来源的CrtZ和CrtW基因的组合转入产β‑胡萝卜素的解脂耶氏酵母基因工程菌XK17的染色体中，获得生产虾青素的解脂耶氏酵母基因工程菌。本发明还公开了根据上述的方法构建得到的解脂耶氏酵母基因工程菌及其应用。本发明的方法构建得到的基因工程菌的虾青素的产量高，在摇瓶水平最高产量可达到99mg/L，且经过连续传代培养后稳定性良好。
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公开(公告)号：CN117487837A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202210920575.X
申请日：2022-08-02
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于珍贵束丝放线菌的基因编辑质粒，所述基因编辑质粒以CRISPR‑Cas9质粒工具的骨架为基础，通过根据珍贵束丝放线菌(A.pretiosum)的偏好，将Cas9蛋白编码序列cas9核酸序列的密码子优化；将优化后的Cas9蛋白编码序列亚克隆到CRISPR‑Cas9质粒工具的骨架上；以pIJ101复制子取代质粒骨架上原有的温敏型复制子pSG5；以及在sgRNA启动子ermEp*下游插入限制性内切酶XmaJI的酶切位点而实现。本发明还公开了所述基因编辑质粒用于改造珍贵束丝放线菌以提高安丝菌素P‑3的产量的应用。本发明的基因编辑质粒实现了基因组规模的基因多次迭代编辑，为关于珍贵束丝放线菌(A.pretiosum)的新代谢产物的挖掘、底盘菌株的设计、代谢途径工程改造与代谢调控机制等方面的研究提供了操作性更高的工具。
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