玉米单倍体诱导系的遗传转化和基因编辑

    公开(公告)号:CN116286960A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202210962504.6

    申请日:2022-08-11

    Abstract: 本发明属于分子育种技术领域,具体涉及一种玉米单倍体诱导系的遗传转化和基因编辑,本发明首先公开了一种基因编辑转化载体,所述转化载体以pCambia3301载体骨架为基础,从T‑DNA右边界开始包含三个表达单元ZmU6pro:gRNA:AtU6 term,ZmUBI1 pro:SpCas9:PsRbcS E9 term,和CaMV35Spro:Bar:CaMV35S term,所述ZmU6 pro和gRNA骨架之间预留有两个BsaI酶切位点,用于将载体线性化后用DNA连接酶或Gibson克隆方法将任何编辑目标基因的gRNA识别序列片段插入。本发明公开了直接转化玉米单倍体诱导系的方法,先转化并编辑单倍体诱导系的目标基因以验证基因编辑载体功能,再用转化的诱导系后代诱导任何玉米杂交或自交材料产生单倍体,染色体加倍后可形成编辑同样目标基因的双单倍体系,彻底规避了制约玉米基因编辑研究和应用的自交系难以转化的瓶颈问题。

    玉米单倍体诱导系的遗传转化和基因编辑

    公开(公告)号:CN116286960B

    公开(公告)日:2024-07-12

    申请号:CN202210962504.6

    申请日:2022-08-11

    Abstract: 本发明属于分子育种技术领域,具体涉及一种玉米单倍体诱导系的遗传转化和基因编辑,本发明首先公开了一种基因编辑转化载体,所述转化载体以pCambia3301载体骨架为基础,从T‑DNA右边界开始包含三个表达单元ZmU6pro:gRNA:AtU6 term,ZmUBI1 pro:SpCas9:PsRbcS E9 term,和CaMV35Spro:Bar:CaMV35S term,所述ZmU6 pro和gRNA骨架之间预留有两个BsaI酶切位点,用于将载体线性化后用DNA连接酶或Gibson克隆方法将任何编辑目标基因的gRNA识别序列片段插入。本发明公开了直接转化玉米单倍体诱导系的方法,先转化并编辑单倍体诱导系的目标基因以验证基因编辑载体功能,再用转化的诱导系后代诱导任何玉米杂交或自交材料产生单倍体,染色体加倍后可形成编辑同样目标基因的双单倍体系,彻底规避了制约玉米基因编辑研究和应用的自交系难以转化的瓶颈问题。

Patent Agency Ranking