一种快速鉴定大肠埃希菌与泛菌的方法

    公开(公告)号:CN116004858A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202111231370.2

    申请日:2021-10-22

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明涉及分子生物学技术在微生物鉴定领域的应用,是一种基于分子生物学技术快速鉴定大肠埃希菌和泛菌DNA的试剂盒。其特点是,它包含:PCR反应体系和酶切反应体系。PCR反应体系:总体系为25μL,2×Taq PCR Master Mix 12.5μL,待检DNA模板(10ng/μL)1μL,引物F、R(2.5ng/μL)各0.4μL,余为双蒸馏水。酶切反应体系:总体系20μL,取上述PCR产物10μL于EP管中,加入Hind III酶1μL,10×M Buffer 2μL,余为双蒸馏水。本发明是基于细菌16S rDNA基因片段具有高度的保守性,使用DNAMAN对大肠埃希菌和泛菌16S rDNA基因片段进行分析,发现二者具有较高的同源性,普通PCR难以鉴别。在大肠埃希菌在16S rDNA基因片段中存在一个酶切位点,而泛菌不存在此位点,据此建立PCR‑酶切技术,对大肠埃希菌进行快速、可靠的鉴定。

    呼吸道感染常见革兰阳性菌复合乳胶快速鉴定试剂盒及鉴定方法

    公开(公告)号:CN115637284A

    公开(公告)日:2023-01-24

    申请号:CN202111568555.2

    申请日:2021-12-21

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明涉及微生物检测技术领域,是呼吸道常见革兰阳性菌复合乳胶凝集鉴定试剂盒,其特征是由样本处理液、阳性对照品、阴性对照品、乳胶检测试剂四部分组成,包括:复合乳胶检测试剂1管,3mL/管;阳性对照样本1管,0.6mL/管;阴性对照样本1管,0.6mL/管;样本处理液1管,0.6mL/管。呼吸道常见革兰阳性菌鉴定方法是设计三种不同颜色乳胶凝集颗粒,确定最佳包被比例、包被条件和结果判定等步骤。检测样本出现乳胶凝集现象时,即判为阳性结果:蓝色凝集代表金黄色葡萄球菌阳性,红色凝集代表肺炎链球菌阳性,白色凝集代表乙型溶血性链球菌阳性;根据相应凝集颜色判定是单独一种或两种、甚至三种混合阳性。不出现凝集则判为阴性。鉴定方法能够直接准确鉴定且区分是金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌感染。

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