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公开(公告)号:CN118497404B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202410726869.8
申请日:2024-06-06
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明提供基于RAA‑CRISPR/Cas12a快速检测板栗疫病菌的特异性引物和可视化的检测方法,特异性引物包括用于特异性检测板栗疫病菌的gRNA引物和RAA引物。本发明检测板栗疫病菌的可视化检测方法具有操作简便、检测快速、成本低、灵敏度高、特异性强及可视化的特点,将RAA扩增方法与CRISPR/Cas12a的检测方法结合来检测板栗疫病菌,通过紫外凝胶成像仪和Cas12/13专用核酸检测试纸条实现可视化检测,可实现现场快速检测板栗疫病菌,为板栗疫病菌快速检测和早期诊断提供有效方法,并为板栗疫病的监测预警及精准防控提供指导。
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公开(公告)号:CN106399133B
公开(公告)日:2019-10-18
申请号:CN201610821907.3
申请日:2016-09-13
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一株敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株、其构建方法及其应用,并评估了该突变体菌株在大丽轮枝菌基因功能研究中的适用性。本发明构建VdKu80基因敲除载体片段,通过PEG介导的原生质体遗传转化,从转化子中筛选并鉴定得到单拷贝敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株VdXS11‑△VdKu80。本发明的敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株在生长速率、菌落形态、压力响应、分生孢子产量、微菌核形成和致病性表型与野生型菌株无显著差异。使用本发明的突变体菌株作为受体菌株进行基因敲除,其基因敲除率比野生型菌株提高了20%以上,因此能够作为受体菌株对大丽轮枝菌其他基因进行敲除实验。
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公开(公告)号:CN118668003A
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202410960106.X
申请日:2024-07-17
Applicant: 北京林业大学 , 广东省林业科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/113 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种杜英疫病菌检测用引物组合、可视化体系、方法及试剂盒,属于杜英疫病菌检测技术领域。引物组合包括如SEQ ID NO.1所示CrRNA,以及如SEQ ID NO.2和3所示的RAA扩增引物,并构建了RAA‑CRISPR/Cas12a‑LFD检测体系和杜英疫病菌检测方法。本发明以杜英疫病菌PsGti1为靶标,并开发了基于RAA‑CRISPR/Cas12a‑LFD的可视化检测方法,在常温条件下、较短时间内就可以完成对杜英疫病菌特异性的可视化检测,操作简单,检测的灵敏度高,有望在林地内完成杜英疫病菌的现场快速检测,对于杜英疫病菌的早期快速检测及杜英疫病的精准防治提供了重要的理论支撑。
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公开(公告)号:CN118879904B
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202410816178.7
申请日:2024-06-24
Applicant: 北京林业大学 , 广东省林业科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种检测褐根病菌的试剂盒、检测方法及其应用,检测试剂盒包括:扩增引物PnRAA1‑5F/PnRAA1‑3F或PnRAA2‑5F/PnRAA2‑3F;用于检测褐根病菌特异靶标的生物探针PnProbe2,采用本发明的试剂盒对褐根病菌的靶标基因PnEf1进行恒温核酸扩增,再结合侧流层析试纸条,最终实现检测结果的可视化判读。本发明检测褐根病菌的可视化检测方法具有操作简便、检测快速、成本低、灵敏度高、特异性强及可视化的特点;将RAA扩增方法与测流层析检测方法结合来检测褐根病菌,可实现野外现场或进境检疫的快速检测褐根病菌,为褐根病菌快速检测和进境植物检疫提供快速、有效的鉴定方法。
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公开(公告)号:CN119351423A
公开(公告)日:2025-01-24
申请号:CN202411934408.6
申请日:2024-12-26
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种与板栗疫病菌致病性相关的基因CpSge1及其dsRNA和应用,属于分子生物学技术领域。基因CpSge1的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,dsRNA的核苷酸序列为SEQ ID No.3、SEQ ID No.4或SEQ ID No.5。本发明还提供了所述dsRNA或者基因CpSge1在板栗疫病防治中的应用。该dsRNA可干扰板栗疫病菌致病关键基因CpSge1的表达,影响板栗疫病菌生长、产孢、胁迫耐受和侵染板栗枝条的过程,进而有助于板栗疫病防治,且可适用于包括杨树炭疽病在内的其它植物真菌病害。
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公开(公告)号:CN106399133A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610821907.3
申请日:2016-09-13
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一株敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株、其构建方法及其应用,并评估了该突变体菌株在大丽轮枝菌基因功能研究中的适用性。本发明构建VdKu80基因敲除载体片段,通过PEG介导的原生质体遗传转化,从转化子中筛选并鉴定得到单拷贝敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株VdXS11-△VdKu80。本发明的敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株在生长速率、菌落形态、压力响应、分生孢子产量、微菌核形成和致病性表型与野生型菌株无显著差异。使用本发明的突变体菌株作为受体菌株进行基因敲除,其基因敲除率比野生型菌株提高了20%以上,因此能够作为受体菌株对大丽轮枝菌其他基因进行敲除实验。
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公开(公告)号:CN118994338B
公开(公告)日:2025-02-28
申请号:CN202411101021.2
申请日:2024-08-12
Applicant: 北京林业大学
IPC: C07K14/37 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , A01G7/06 , A01G13/00 , A01N47/44 , A01N57/16 , A01P3/00 , A01P21/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种植物免疫诱抗蛋白CcHE1及其应用,属于生物技术领域。本发明公开的由植物病原真菌分泌的植物免疫诱抗蛋白CcHE1,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,CcHE1编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供了一种新的植物免疫诱抗蛋白CcHE1,该植物免疫诱抗蛋白能够诱导植物的抗性和免疫防卫反应,可显著提高植物的抗病性,其使用浓度低,抗病效果显著。CcHE1激活了植物自身的免疫系统,为提高植物抗性提供了新的途径,在林木病害绿色防控等方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN118994338A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202411101021.2
申请日:2024-08-12
Applicant: 北京林业大学
IPC: C07K14/37 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , A01G7/06 , A01G13/00 , A01N47/44 , A01N57/16 , A01P3/00 , A01P21/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种植物免疫诱抗蛋白CcHE1及其应用,属于生物技术领域。本发明公开的由植物病原真菌分泌的植物免疫诱抗蛋白CcHE1,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,CcHE1编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供了一种新的植物免疫诱抗蛋白CcHE1,该植物免疫诱抗蛋白能够诱导植物的抗性和免疫防卫反应,可显著提高植物的抗病性,其使用浓度低,抗病效果显著。CcHE1激活了植物自身的免疫系统,为提高植物抗性提供了新的途径,在林木病害绿色防控等方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119351423B
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202411934408.6
申请日:2024-12-26
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种与板栗疫病菌致病性相关的基因CpSge1及其dsRNA和应用,属于分子生物学技术领域。基因CpSge1的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,dsRNA的核苷酸序列为SEQ ID No.3、SEQ ID No.4或SEQ ID No.5。本发明还提供了所述dsRNA或者基因CpSge1在板栗疫病防治中的应用。该dsRNA可干扰板栗疫病菌致病关键基因CpSge1的表达,影响板栗疫病菌生长、产孢、胁迫耐受和侵染板栗枝条的过程,进而有助于板栗疫病防治,且可适用于包括杨树炭疽病在内的其它植物真菌病害。
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公开(公告)号:CN118879904A
公开(公告)日:2024-11-01
申请号:CN202410816178.7
申请日:2024-06-24
Applicant: 北京林业大学 , 广东省林业科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种检测褐根病菌的试剂盒、检测方法及其应用,检测试剂盒包括:扩增引物PnRAA1‑5F/PnRAA1‑3F或PnRAA2‑5F/PnRAA2‑3F;用于检测褐根病菌特异靶标的生物探针PnProbe2,采用本发明的试剂盒对褐根病菌的靶标基因PnEf1进行恒温核酸扩增,再结合侧流层析试纸条,最终实现检测结果的可视化判读。本发明检测褐根病菌的可视化检测方法具有操作简便、检测快速、成本低、灵敏度高、特异性强及可视化的特点;将RAA扩增方法与测流层析检测方法结合来检测褐根病菌,可实现野外现场或进境检疫的快速检测褐根病菌,为褐根病菌快速检测和进境植物检疫提供快速、有效的鉴定方法。
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