一种检测板栗疫病菌的试剂盒、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN118497404B

    公开(公告)日:2025-02-18

    申请号:CN202410726869.8

    申请日:2024-06-06

    Abstract: 本发明提供基于RAA‑CRISPR/Cas12a快速检测板栗疫病菌的特异性引物和可视化的检测方法,特异性引物包括用于特异性检测板栗疫病菌的gRNA引物和RAA引物。本发明检测板栗疫病菌的可视化检测方法具有操作简便、检测快速、成本低、灵敏度高、特异性强及可视化的特点,将RAA扩增方法与CRISPR/Cas12a的检测方法结合来检测板栗疫病菌,通过紫外凝胶成像仪和Cas12/13专用核酸检测试纸条实现可视化检测,可实现现场快速检测板栗疫病菌,为板栗疫病菌快速检测和早期诊断提供有效方法,并为板栗疫病的监测预警及精准防控提供指导。

    大丽轮枝菌VdKu80基因敲除突变体菌株,其构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN106399133B

    公开(公告)日:2019-10-18

    申请号:CN201610821907.3

    申请日:2016-09-13

    Abstract: 本发明提供了一株敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株、其构建方法及其应用,并评估了该突变体菌株在大丽轮枝菌基因功能研究中的适用性。本发明构建VdKu80基因敲除载体片段,通过PEG介导的原生质体遗传转化,从转化子中筛选并鉴定得到单拷贝敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株VdXS11‑△VdKu80。本发明的敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株在生长速率、菌落形态、压力响应、分生孢子产量、微菌核形成和致病性表型与野生型菌株无显著差异。使用本发明的突变体菌株作为受体菌株进行基因敲除,其基因敲除率比野生型菌株提高了20%以上,因此能够作为受体菌株对大丽轮枝菌其他基因进行敲除实验。

    一种检测褐根病菌的试剂盒、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN118879904B

    公开(公告)日:2025-05-16

    申请号:CN202410816178.7

    申请日:2024-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种检测褐根病菌的试剂盒、检测方法及其应用,检测试剂盒包括:扩增引物PnRAA1‑5F/PnRAA1‑3F或PnRAA2‑5F/PnRAA2‑3F;用于检测褐根病菌特异靶标的生物探针PnProbe2,采用本发明的试剂盒对褐根病菌的靶标基因PnEf1进行恒温核酸扩增,再结合侧流层析试纸条,最终实现检测结果的可视化判读。本发明检测褐根病菌的可视化检测方法具有操作简便、检测快速、成本低、灵敏度高、特异性强及可视化的特点;将RAA扩增方法与测流层析检测方法结合来检测褐根病菌,可实现野外现场或进境检疫的快速检测褐根病菌,为褐根病菌快速检测和进境植物检疫提供快速、有效的鉴定方法。

    大丽轮枝菌VdKu80基因敲除突变体菌株,其构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN106399133A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610821907.3

    申请日:2016-09-13

    Abstract: 本发明提供了一株敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株、其构建方法及其应用,并评估了该突变体菌株在大丽轮枝菌基因功能研究中的适用性。本发明构建VdKu80基因敲除载体片段,通过PEG介导的原生质体遗传转化,从转化子中筛选并鉴定得到单拷贝敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株VdXS11-△VdKu80。本发明的敲除VdKu80基因的大丽轮枝菌突变体菌株在生长速率、菌落形态、压力响应、分生孢子产量、微菌核形成和致病性表型与野生型菌株无显著差异。使用本发明的突变体菌株作为受体菌株进行基因敲除,其基因敲除率比野生型菌株提高了20%以上,因此能够作为受体菌株对大丽轮枝菌其他基因进行敲除实验。

    一种检测褐根病菌的试剂盒、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN118879904A

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202410816178.7

    申请日:2024-06-24

    Abstract: 本发明公开了一种检测褐根病菌的试剂盒、检测方法及其应用,检测试剂盒包括:扩增引物PnRAA1‑5F/PnRAA1‑3F或PnRAA2‑5F/PnRAA2‑3F;用于检测褐根病菌特异靶标的生物探针PnProbe2,采用本发明的试剂盒对褐根病菌的靶标基因PnEf1进行恒温核酸扩增,再结合侧流层析试纸条,最终实现检测结果的可视化判读。本发明检测褐根病菌的可视化检测方法具有操作简便、检测快速、成本低、灵敏度高、特异性强及可视化的特点;将RAA扩增方法与测流层析检测方法结合来检测褐根病菌,可实现野外现场或进境检疫的快速检测褐根病菌,为褐根病菌快速检测和进境植物检疫提供快速、有效的鉴定方法。

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