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发明公开
杨树2n花粉的诱导和分离纯化方法无效

公开(公告)号：CN112226401A

公开(公告)日：2021-01-15

申请号：CN202011141926.4

申请日：2020-10-22

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 张平冬 , 周晴 , 桑亚茹 , 吴剑 , 李智群 , 赵一帆

IPC: C12N5/04 , C12N15/01

Abstract: 本发明公开了杨树2n花粉的诱导和分离纯化方法。包括：(1)用秋水仙碱诱导杨树花粉染色体加倍得到包括2n花粉在内的混合花粉；(2)将混合花粉用过滤器过滤进行初步筛选；(3)将虹吸孔管与显微操纵器相连接；(4)将过滤后的花粉液滴于载玻片上，配套使用倒置显微镜、显微操纵器和虹吸孔管将2n花粉从混合花粉中彻底分离出来。本发明通过优化秋水仙碱诱导杨树花粉染色体加倍条件获得高频率诱导型2n花粉；借助35‑45μm的过滤器将花粉进行过滤初选；再配套使用倒置显微镜、显微操纵器和虹吸孔管将2n花粉与其它单倍性花粉彻底分离；所纯化的2n花粉与单倍性雌配子杂交，避免了因授粉时单倍性花粉的竞争导致三倍体得率低的问题。

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