公开(公告)号：CN116162731B

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202310336499.2

申请日：2023-03-31

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 梁英梅 ,  伍文慧 ,  田呈明 ,  张秀芸

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了基于锁式探针的落叶松枯梢病菌滚环扩增引物组及应用，本发明基于落叶松枯梢病菌的ITS片段序列差异，利用锁式探针能与模板DNA互补结合的特点，在落叶松枯梢病菌的特异性片段上设计出了用于检测落叶松枯梢病的特异性锁式探针，经过环化连接、外切酶消化未环化线性探针、再用扩增引物进行超分支滚环扩增，最后通过电泳验证实现落叶松枯梢病菌的检测。本发明可从真菌菌丝体中快速、准确地检测出落叶松枯梢病菌，缩短了传统落叶松枯梢病原真菌的检测时间，提高了检疫效率，同时具有特异性强、灵敏度高、操作简单、结果可靠等特点。因此，对于落叶松枯梢病的早期快速检疫及病害防控等具有重要意义。

公开(公告)号：CN116162731A

公开(公告)日：2023-05-26

申请号：CN202310336499.2

申请日：2023-03-31

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 梁英梅 ,  伍文慧 ,  田呈明 ,  张秀芸

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了基于锁式探针的落叶松枯梢病菌滚环扩增引物组及应用，本发明基于落叶松枯梢病菌的ITS片段序列差异，利用锁式探针能与模板DNA互补结合的特点，在落叶松枯梢病菌的特异性片段上设计出了用于检测落叶松枯梢病的特异性锁式探针，经过环化连接、外切酶消化未环化线性探针、再用扩增引物进行超分支滚环扩增，最后通过电泳验证实现落叶松枯梢病菌的检测。本发明可从真菌菌丝体中快速、准确地检测出落叶松枯梢病菌，缩短了传统落叶松枯梢病原真菌的检测时间，提高了检疫效率，同时具有特异性强、灵敏度高、操作简单、结果可靠等特点。因此，对于落叶松枯梢病的早期快速检疫及病害防控等具有重要意义。