公开(公告)号：CN106244513A

公开(公告)日：2016-12-21

申请号：CN201610595887.2

申请日：2016-07-26

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 林金星 ,  吴鸿洋 ,  吕雪芹 ,  李晓娟

IPC: C12N5/04 ,  C12Q1/02

CPC classification number: C12N5/04 ,  G01N33/5097

Abstract: 本发明公开了一种分离液泡和观察液泡膜上蛋白分布和运动的方法。该方法依次包括如下步骤：(1)取植物组织，用酶解液进行处理，获得原生质体；(2)裂解所述原生质体，获得液泡；(3)多聚甲醛载玻片固定液泡；(4)全内光反射显微镜观察液泡膜上蛋白分布和运动。实验证明，采用本发明所提供的方法分离的液泡是具有生理活性的液泡，其液泡膜上蛋白质也是具有生理活性的，且可利用全内反射荧光显微镜观察液泡膜上蛋白的运动和分布。本发明将以TIRFM显微镜为基础的单分子技术的观测范围从细胞外膜扩展到胞内细胞器膜，所提供的方法在液泡的分离及观察中具有重要的应用价值，为深入研究植物的细胞器奠定了技术基础。