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公开(公告)号：CN117187255B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311465945.6
申请日：2023-11-07
Applicant: 北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院) , 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种编码人成纤维细胞生长因子18的核酸及其应用，所述核酸的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。本发明通过对编码人成纤维细胞生长因子18的核酸序列进行优化，提高了其在细胞体内的表达水平，有助于其提高针对OA的治疗效果。(56)对比文件Reker D 等.“Sprifermin (rhFGF18)versus vehicle induces a biphasic processof extracellular matrix remodeling inhuman knee OA articular cartilage exvivo”《.Scientific reports》.2020,第10卷(第1期),摘要，第2页第2-4段，第4页第1段-第5页第4段，讨论部分.杨振兴等."FGF-18治疗骨关节炎的研究进展"《.实用骨科杂志》.2022,第28卷(第08期),第722-726页.
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公开(公告)号：CN117187255A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311465945.6
申请日：2023-11-07
Applicant: 北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院) , 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种编码人成纤维细胞生长因子18的核酸及其应用，所述核酸的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。本发明通过对编码人成纤维细胞生长因子18的核酸序列进行优化，提高了其在细胞体内的表达水平，有助于其提高针对OA的治疗效果。
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公开(公告)号：CN117070442B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311345451.4
申请日：2023-10-18
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种静脉内皮细胞及其制备方法、静脉血管畸形模型及其制备方法，静脉内皮细胞的制备方法包括：将诱导多能干细胞置于干细胞维持培养基中进行传代培养，得到增殖干细胞；将增殖干细胞置于第一分化培养基中进行第一阶段分化培养，得到中胚层祖细胞；第一分化培养基包括第一基础培养基和第一培养基添加剂；第一培养基添加剂包括GSK‑3抑制剂；将中胚层祖细胞置于第二分化培养基中进行第二阶段分化培养，第二分化培养基包括第二基础培养基和第二培养基添加剂；第二培养基添加剂包括成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子、γ‑分(56)对比文件Elisa Boscolo等.Rapamycin improvesTIE2-mutated venous malformation inmurine model and human subjects《.TheJournal of Clinical Investigation》.2015,第125卷(第9期),第3491-3504页.刘泓源等.静脉/淋巴管畸形靶向治疗的研究进展《.组织工程与重建外科杂志》.2020,第16卷(第03期),第204-209页.
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公开(公告)号：CN117143880A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311421504.6
申请日：2023-10-31
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明提供了一种ETV2的ORF序列以及一种内皮细胞的制备方法，属于内皮细胞开发技术领域。本发明中ETV2的ORF序列如SEQ ID NO.1所示，能够高效表达ETV2蛋白，用于翻译能够得到更多的ETV2蛋白，表达效率更高，用于将干细胞分化为内皮细胞能够显著提升转化效率。本发明提供的内皮细胞的制备方法，制备效率高、且临床应用风险较低。因此解决了现有技术中无法安全高效地将干细胞分化为内皮细胞的问题。本发明能够高效快速地实现内皮细胞的大量制备，满足细胞命运重编程和内皮分化的需求。本发明提供的制备方法为内皮细胞直接注射到缺血部位、促进血管新生、改善组织灌注情况提供了稳定的细胞来源。
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公开(公告)号：CN117143880B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202311421504.6
申请日：2023-10-31
Applicant: 北京大学
Abstract: 细胞来源。本发明提供了一种ETV2的ORF序列以及一种内皮细胞的制备方法，属于内皮细胞开发技术领域。本发明中ETV2的ORF序列如SEQ ID NO.1所示，能够高效表达ETV2蛋白，用于翻译能够得到更多的ETV2蛋白，表达效率更高，用于将干细胞分化为内皮细胞能够显著提升转化效率。本发明提供的内皮细胞的制备方法，制备效率高、且临床应用风险较低。因此解决了现有技术中无法安全高效地将干细胞分化为内皮细胞的问题。本发明能够高效快速地实现内皮细胞的大量制备，满
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116656732A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310615552.2
申请日：2023-05-29
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及一种基于定点敲入ETV2诱导表达系统的内皮细胞分化方法，具体分化方法为：1）CRISPR/Cas9基因编辑质粒构建：表达Cas9及AAVS1位点gRNA的质粒构建，具有转录激活型Tet‑on系统控制表达ETV2的DNA序列的敲入供体载体构建；2）h‑iPSC培养、电转及药物筛选；3）h‑iPSCs向SC‑ECs的分化。通过采用本发明提供的分化方法，能快速大量获取SC‑ECs，满足临床应用的细胞需求。
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公开(公告)号：CN116590298A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202211345337.7
申请日：2022-10-31
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及一种编码人HGF的核酸及其应用，所述的核酸包含一个或多个开放阅读框ORF，所述ORF核酸序列与选自SEQ ID NO:21‑31的核酸序列，具有与上述核酸序列至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同源性。本发明提供了一种编码人HGF的核酸、核酸构建物、载体、细胞及其药物，所述核酸具有优于天然序列的蛋白表达水平。
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公开(公告)号：CN119685264A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411904022.0
申请日：2024-12-23
Applicant: 北京大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/90 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N5/071 , C12Q1/02 , G01N21/64
Abstract: 本发明提供了一种基于可视化血管类器官的体外血管新生模型及其构建方法，属于生物体外模型构建技术领域。本发明提供的双报告细胞系以胚胎干细胞系为基础生物材料，设计并成功构建了PECAM1‑mRuby3‑secNluc；ACTA2‑EGFP双报告系统，所得系统能够用荧光准确标记内皮细胞和平滑肌细胞用于成像，无需复杂的免疫荧光染色，解决了现有技术中模型难以应用于药物筛选的缺陷。本发明基于制得的双报告细胞系，将血管新生的形态学信息转化为生物发光读数，可通过生物发光进行大规模检测与定量，成功构建出能够适配高通量药物筛选的体外血管新生模型，为靶向血管新生药物筛选提供了可靠的体外模型与便捷的检测系统。
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公开(公告)号：CN117143807A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311411837.0
申请日：2023-10-30
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种血管类器官及其制备方法、细胞治疗组合物及其在缺血疾病中的应用，方法包括以下过程：将人多能干细胞置于干细胞维持培养基中进行培养、传代，得到增殖干细胞；将增殖干细胞置于第一分化培养基中进行第一阶段分化培养、传代，得到中胚层祖细胞；其中，第一分化培养基包括第一基础培养基和GSK‑3抑制剂；将中胚层祖细胞置于第二分化培养基中得到细胞溶液，将细胞溶液置于三维生物反应器中，使生物反应器保持旋转，进行第二阶段分化培养，得到血管类器官，其中，第二分化培养基包括第二基础培养基、成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子、人表皮生长因子和ALK抑制剂。本发明能形成三维均一的球状血管类器官。
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公开(公告)号：CN117070442A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311345451.4
申请日：2023-10-18
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种静脉内皮细胞及其制备方法、静脉血管畸形模型及其制备方法，静脉内皮细胞的制备方法包括：将诱导多能干细胞置于干细胞维持培养基中进行传代培养，得到增殖干细胞；将增殖干细胞置于第一分化培养基中进行第一阶段分化培养，得到中胚层祖细胞；第一分化培养基包括第一基础培养基和第一培养基添加剂；第一培养基添加剂包括GSK‑3抑制剂；将中胚层祖细胞置于第二分化培养基中进行第二阶段分化培养，第二分化培养基包括第二基础培养基和第二培养基添加剂；第二培养基添加剂包括成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子、γ‑分泌酶抑制剂和维甲酸，得到具有较强的血管生成能力和重构能力的静脉内皮细胞。
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