公开(公告)号：CN115772546A

公开(公告)日：2023-03-10

申请号：CN202211500213.1

申请日：2022-11-28

Applicant: 北京大学第一医院

Inventor： 李建平 ,  霍勇 ,  张岩 ,  鲍明慧 ,  赵静 ,  范芳芳 ,  刘博 ,  贾佳

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/113 ,  A01K67/027 ,  C12Q1/6883 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供的一种基于CRISPR/Cas9获得MTHFR基因定点突变动物模型的构建方法，包括如下步骤：(1)基于目标基因MTHFR设计sgRNA；(2)根据sgRNA序列设计供体寡核苷酸供体DNA；(3)将sgRNA、Cas9mRNA和供体DNA混合物注射入鼠受精卵中，将注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠子宫中，将得到的F0代小鼠划分为野生型小鼠或阳性杂合子小鼠，将阳性杂合子小鼠与野生型小鼠进行交配，获得F1代小鼠，得到阳性子代小鼠为F1代杂合子进行杂交繁育，最后基因鉴定获得；所得动物模型为研究MTHFR‑C677T不同基因型背景人群高同型半胱氨酸血症以及心脑血管疾病的理想载体。