同时测定组织中两种马兜铃酸-DNA加合物的HPLC-FLD-DAD分析方法

    公开(公告)号:CN106198771A

    公开(公告)日:2016-12-07

    申请号:CN201510276449.5

    申请日:2015-05-27

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明涉及一种检测马兜铃酸肾病(AAN)生物标记物,即马兜铃酸(AA)-DNA加合物的HPLC-FLD-DAD分析法。该法利用AA-DNA加合物的荧光特性,HPLC-FLD检测AA-DNA加合物、HPLC-DAD检测脱氧核苷,从而测定加合物含量;可同时测定脱氧腺苷-马兜铃酸I加合物(dA-AA-I)、脱氧腺苷-马兜铃酸II加合物(dA-AA-II),AAN最主要的两种加合物。主要步骤有DNA的提取、DNA的消化及加合物的富集、HPLC-FLD测定AA-DNA加合物、HPLC-DAD测定脱氧腺苷、AA-DNA加合物含量的计算。应用该法,在给予关木通等含有AAs的药物或食物的动物组织(例如大鼠肝、肾组织等)可检测AA-DNA加合物含量。

    一种鸡胚前脑神经元的培养方法

    公开(公告)号:CN105400739A

    公开(公告)日:2016-03-16

    申请号:CN201510951727.2

    申请日:2015-12-16

    CPC classification number: C12N5/0619 C12N2500/70 C12N2500/84

    Abstract: 本发明涉及神经元培养,具体是一种鸡胚前脑神经元的培养方法,所述培养方法包括:鸡胚前脑神经组织的获取,用聚乙烯亚胺包被培养装置,用含小牛血清的Neurobasal培养基培养鸡胚前脑神经元。本发明的方案可以使鸡胚前脑神经元在高密度条件下长时间培养;免疫染色结果证明有神经元和胶质细胞共存,并且在第7天已经有突触的形成;随着胶质细胞的增殖,在MEA上的神经网络最后长成非常致密的细胞层,可存活长达6个月;CFBN神经网络对神经活性物质有很好的反应性,可以用作神经毒性检测平台。

    一种分析马兜铃酸肾病生物标记物的激光共聚焦显微镜法

    公开(公告)号:CN103389289A

    公开(公告)日:2013-11-13

    申请号:CN201210144885.3

    申请日:2012-05-11

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明涉及一种用于分析马兜铃酸肾病的生物标记物的激光共聚焦显微镜方法。该方法不需要复杂的样品前处理,是一种快速、灵敏的定性、半定量分析生物样品中马兜铃酸-DNA加合物的原位分析方法,该生物样品包括马兜铃酸类化合物刺激后的体外培养细胞、给予含马兜铃酸类成分药物的实验动物的组织细胞及尿液中脱落细胞和马兜铃酸肾病病人的组织细胞及尿液中脱落细胞等。本方法可用于马兜铃酸肾病的快速临床诊断及相关研究工作。

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