一种检测RNA中弱稳定性碱基对的固体核磁共振方法

    公开(公告)号:CN112461881B

    公开(公告)日:2022-02-18

    申请号:CN202011108878.9

    申请日:2020-10-16

    Abstract: 本发明公开了一种检测RNA中弱稳定性碱基对的固体核磁共振方法,涉及固体核磁共振波谱学领域。通过设计一种新型二维氢检测固体核磁共振脉冲序列2D WaterREXSY,检测RNA中稳定性较弱的碱基对。在脉冲序列中,利用了氢核上的Lee‑Goldburg自旋锁场,观测水与RNA中可交换质子的化学交换,并通过压制1H自旋扩散和偶极耦合相互作用,实现化学交换过程的专一性检测。弱稳定性碱基对中的可交换质子与水的交换速率较快,信号较强,从而实现对弱稳定性碱基对的特异性检测。

    基于RNA聚合酶的体外转录机器快速多重检测NTPs的方法及试剂盒与应用

    公开(公告)号:CN106906282B

    公开(公告)日:2020-05-22

    申请号:CN201710100553.8

    申请日:2017-02-23

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于RNA聚合酶的体外转录机器快速多重检测NTPs的方法及试剂盒与应用,该方法实用性强,是目前唯一一种可以同时用于四种NTP的检测方法,通过简单的改变模板链和编码链的序列、其余过量NTP的组成和相匹配的分子信标,即可实现对四种不同的NTP进行超快速(一分钟)、高选择性、高灵敏度、高通量和低成本的准确定量,反应体系简单,无需复杂的探针设计和合成步骤,反应所用的组分均为商业化试剂,反应时只需将各组分简单混合即可,且易于开发试剂盒,极大地方便了研究应用和临床检测,具有非常大的科学意义和商业价值。

    一种检测膜融合蛋白在脂质体中定位的核磁共振方法

    公开(公告)号:CN112630250B

    公开(公告)日:2022-06-17

    申请号:CN202011577753.0

    申请日:2020-12-28

    Abstract: 本发明提供了一种检测膜融合蛋白在脂质体中定位的固体核磁共振方法,属于生物物理和生物化学技术领域,包括:对膜融合蛋白进行15N稳定同位素标记,将15N标记蛋白分别与顺磁脂质体和非顺磁脂质体反应,得到蛋白‑脂质体复合物。其中顺磁脂质体含有一定比例的络合镧系金属离子的顺磁磷脂分子,而非顺磁脂质体不含有顺磁磷脂分子。通过采集蛋白‑脂质体复合物的固体核磁共振谱图,对比在顺磁和非顺磁脂质体中的一维15N固体核磁共振图谱,进而利用信号强度的对比获取膜融合蛋白在脂质体中的定位,即区分膜融合蛋白在脂质体内部或在其表面。采用本发明提供的核磁共振方法能够检测膜融合蛋白在脂质体中的定位。

    一种检测膜融合蛋白在脂质体中定位的核磁共振方法

    公开(公告)号:CN112630250A

    公开(公告)日:2021-04-09

    申请号:CN202011577753.0

    申请日:2020-12-28

    Abstract: 本发明提供了一种检测膜融合蛋白在脂质体中定位的固体核磁共振方法,属于生物物理和生物化学技术领域,包括:对膜融合蛋白进行15N稳定同位素标记,将15N标记蛋白分别与顺磁脂质体和非顺磁脂质体反应,得到蛋白‑脂质体复合物。其中顺磁脂质体含有一定比例的络合镧系金属离子的顺磁磷脂分子,而非顺磁脂质体不含有顺磁磷脂分子。通过采集蛋白‑脂质体复合物的固体核磁共振谱图,对比在顺磁和非顺磁脂质体中的一维15N固体核磁共振图谱,进而利用信号强度的对比获取膜融合蛋白在脂质体中的定位,即区分膜融合蛋白在脂质体内部或在其表面。采用本发明提供的核磁共振方法能够检测膜融合蛋白在脂质体中的定位。

    一种检测RNA中弱稳定性碱基对的固体核磁共振方法

    公开(公告)号:CN112461881A

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN202011108878.9

    申请日:2020-10-16

    Abstract: 本发明公开了一种检测RNA中弱稳定性碱基对的固体核磁共振方法,涉及固体核磁共振波谱学领域。通过设计一种新型二维氢检测固体核磁共振脉冲序列2D WaterREXSY,检测RNA中稳定性较弱的碱基对。在脉冲序列中,利用了氢核上的Lee‑Goldburg自旋锁场,观测水与RNA中可交换质子的化学交换,并通过压制1H自旋扩散和偶极耦合相互作用,实现化学交换过程的专一性检测。弱稳定性碱基对中的可交换质子与水的交换速率较快,信号较强,从而实现对弱稳定性碱基对的特异性检测。

    基于RNA聚合酶的体外转录机器快速多重检测NTPs的方法及试剂盒与应用

    公开(公告)号:CN106906282A

    公开(公告)日:2017-06-30

    申请号:CN201710100553.8

    申请日:2017-02-23

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于RNA聚合酶的体外转录机器快速多重检测NTPs的方法及试剂盒与应用,该方法实用性强,是目前唯一一种可以同时用于四种NTP的检测方法,通过简单的改变模板链和编码链的序列、其余过量NTP的组成和相匹配的分子信标,即可实现对四种不同的NTP进行超快速(一分钟)、高选择性、高灵敏度、高通量和低成本的准确定量,反应体系简单,无需复杂的探针设计和合成步骤,反应所用的组分均为商业化试剂,反应时只需将各组分简单混合即可,且易于开发试剂盒,极大地方便了研究应用和临床检测,具有非常大的科学意义和商业价值。

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