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公开(公告)号：CN103374546A
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210107490.6
申请日：2012-04-12
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种肝实质细胞及其制备、鉴定与应用方法。本发明提供制备肝实质细胞的方法，包括如下步骤：1)将多潜能干细胞培养获得内胚层细胞；2)将获自步骤1)的内胚层细胞培养获得原始肠管细胞；3)将获自步骤2)的原始肠管细胞培养获得成肝细胞；其特征在于：将获自步骤2)的细胞进行传代，并转入到在含有成纤维细胞生长因子(FGF)和骨形态形成蛋白(BMP)的肝细胞诱导培养基I中培养，获得成肝细胞；4)将获自步骤3)的成肝细胞培养获得成熟的肝实质细胞。本发明还涉及根据所述方法制备的肝实质细胞。本发明制备的肝实质细胞较以往具有更高的代谢活性，制备效率高，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN101962628B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN200910089693.5
申请日：2009-07-24
Applicant: 北京大学 , 北京华源博创科技有限公司
IPC: C12N5/08
Abstract: 本发明公开了一种肝脏内胚层细胞及其制备方法与应用。本发明的肝脏内胚层细胞，是由人胚胎干细胞或诱导的多潜能干细胞分化获得的至少表达甲胎蛋白、肝细胞核因子4A和神经性钙黏附蛋白这三种标志性蛋白的肝脏内胚层细胞。本发明还提供了肝脏内胚层细胞的制备方法，包括以下步骤1)将人胚胎干细胞或诱导形成的多潜能干细胞在内胚层诱导培养基I上培养；2)步骤1)获得的细胞在内胚层诱导培养基II上培养；3)步骤2)获得的细胞肝脏内胚层诱导培养基上培养。本发明的肝脏内胚层继续培养可获得肝脏前体细胞。这些肝脏前体细胞具有在体外分化成肝实质和胆管的潜能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101962629A
公开(公告)日：2011-02-02
申请号：CN200910089695.4
申请日：2009-07-24
Applicant: 北京大学 , 北京华源博创科技有限公司
IPC: C12N5/08
Abstract: 本发明公开了一种肝脏前体细胞及其制备方法与应用。本发明的肝脏前体细胞是由人胚胎干细胞或诱导的多潜能干细胞分化获得表达早期肝脏标志基因甲胎蛋白(AFP)和表达胆管的标志基因角蛋白19(KRT19)和角蛋白7(KRT7)的细胞，其具有强增殖能力并具有向类肝实质细胞和类胆管细胞双向分化潜能。肝脏前体细胞的制备方法包括如下步骤：1)将人胚胎干细胞或诱导形成的多潜能干细胞在内胚层诱导培养基I上培养；2)步骤1)获得的细胞在内胚层诱导培养基II上培养；3)步骤2)获得的细胞在内胚层诱导培养基III上培养；4)步骤3)获得的细胞肝脏内胚层诱导培养基上培养；5)所述肝脏内胚层细胞在STO细胞作为饲养层上用肝脏前体细胞培养基进行培养，获得肝脏前体细胞。本发明的肝脏前体细胞具有在体外分化成肝实质和胆管的潜能。
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公开(公告)号：CN103374546B
公开(公告)日：2018-05-18
申请号：CN201210107490.6
申请日：2012-04-12
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种肝实质细胞及其制备、鉴定与应用方法。本发明提供制备肝实质细胞的方法，包括如下步骤：1)将多潜能干细胞培养获得内胚层细胞；2)将获自步骤1)的内胚层细胞培养获得原始肠管细胞；3)将获自步骤2)的原始肠管细胞培养获得成肝细胞；其特征在于：将获自步骤2)的细胞进行传代，并转入到在含有成纤维细胞生长因子(FGF)和骨形态形成蛋白(BMP)的肝细胞诱导培养基I中培养，获得成肝细胞；4)将获自步骤3)的成肝细胞培养获得成熟的肝实质细胞。本发明还涉及根据所述方法制备的肝实质细胞。本发明制备的肝实质细胞较以往具有更高的代谢活性，制备效率高，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN101962629B
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN200910089695.4
申请日：2009-07-24
Applicant: 北京大学 , 北京华源博创科技有限公司
IPC: C12N5/08
Abstract: 本发明公开了一种肝脏前体细胞及其制备方法与应用。本发明的肝脏前体细胞是由人胚胎干细胞或诱导的多潜能干细胞分化获得表达早期肝脏标志基因甲胎蛋白(AFP)和表达胆管的标志基因角蛋白19(KRT19)和角蛋白7(KRT7)的细胞，其具有强增殖能力并具有向类肝实质细胞和类胆管细胞双向分化潜能。肝脏前体细胞的制备方法包括如下步骤：1)将人胚胎干细胞或诱导形成的多潜能干细胞在内胚层诱导培养基I上培养；2)步骤1)获得的细胞在内胚层诱导培养基II上培养；3)步骤2)获得的细胞在内胚层诱导培养基III上培养；4)步骤3)获得的细胞肝脏内胚层诱导培养基上培养；5)所述肝脏内胚层细胞在STO细胞作为饲养层上用肝脏前体细胞培养基进行培养，获得肝脏前体细胞。本发明的肝脏前体细胞具有在体外分化成肝实质和胆管的潜能。
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公开(公告)号：CN101962628A
公开(公告)日：2011-02-02
申请号：CN200910089693.5
申请日：2009-07-24
Applicant: 北京大学 , 北京华源博创科技有限公司
IPC: C12N5/08
Abstract: 本发明公开了一种肝脏内胚层细胞及其制备方法与应用。本发明的肝脏内胚层细胞，是由人胚胎干细胞或诱导的多潜能干细胞分化获得的至少表达甲胎蛋白、肝细胞核因子4A和神经性钙黏附蛋白这三种标志性蛋白的肝脏内胚层细胞。本发明还提供了肝脏内胚层细胞的制备方法，包括以下步骤1)将人胚胎干细胞或诱导形成的多潜能干细胞在内胚层诱导培养基I上培养；2)步骤1)获得的细胞在内胚层诱导培养基II上培养；3)步骤2)获得的细胞肝脏内胚层诱导培养基上培养。本发明的肝脏内胚层继续培养可获得肝脏前体细胞。这些肝脏前体细胞具有在体外分化成肝实质和胆管的潜能。
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