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公开(公告)号：CN117069858A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202310868383.3
申请日：2023-07-14
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种金属离子‑蛋白纳米活性材料及其制备方法，属于生物化学检测领域。在重组核受体蛋白的磷酸缓冲液中加入金属离子，混匀后静置反应；静置反应一段时间后收集沉淀，用水清洗后干燥，得到金属离子‑核受体蛋白活性纳米材料。本发明实现在保持受体蛋白活性的同时增强其稳定性，所制备的金属离子‑蛋白纳米材料可以实现核受体蛋白活性至少维持2个月以上。有效解决了在环境中核受体蛋白活性物质筛查过程中蛋白活性难以长期保持的问题，降低了环境中内分泌干扰物的筛查成本，同时也使得在环境现场进行筛查成为可能。
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公开(公告)号：CN102936596B
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201210304159.3
申请日：2012-08-23
Applicant: 北京大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12N15/85 , A01K67/027 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种青鳉鱼卵巢结构蛋白(OSP1)基因启动子及其应用。将所述启动子连接到PEGFP-1质粒中的绿色荧光蛋白基因上游区域，用显微注射的方式将融合质粒注射到青鳉鱼受精卵中，构建得到转基因青鳉鱼，其能准确，快速，灵敏地指示外源性内分泌干扰物质暴露下造成的青鳉鱼雌雄同体的发生率和发生程度，能够应用于雌激素类物质的快速筛选和环境中雌激素效应物质的检测。
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公开(公告)号：CN100478675C
公开(公告)日：2009-04-15
申请号：CN200510011322.7
申请日：2005-02-07
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明提供一种青鳉鱼受精卵或幼鱼的DNA鉴定性别的方法，属于鱼类胚胎和早期发育研究领域。该方法包括单个鱼卵或幼鱼的RNA和DNA同步提取技术；用Trizol试剂提取RNA后，剩余有机相中加入DNA提取缓冲液，混匀，50℃-75℃温浴后，低温离心10-15分钟，呈现上下两层，取上层水相加入核酸共沉剂，加入无水乙醇，离心，去除上清，酒精清洗，NaOH溶液溶解，调pH至8.0-8.4，得到单个鱼卵或幼鱼的DNA溶液；将提取的溶液作为模板DNA，加入性别特异PCR引物，进行PCR反应，PCR反应完成后，琼脂糖凝胶电泳检测，如出现目的条带为XY型雄鱼，未出现该条带为XX型雌鱼。本发明鉴定准确性高、效果显著。
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公开(公告)号：CN109085361B
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN201810775059.6
申请日：2018-07-13
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及一种基于重组核受体蛋白的生物效应物质高通量筛查鉴定方法。利用带标签的选定重组核受体蛋白选择性地吸附到磁珠载体上，再根据核受体与小分子亲和结合的原理，利用重组核受体蛋白特异性地从复杂环境介质中捕获具有结合活性的效应物质，再结合超高效液相色谱‑四级杆静电场轨道阱高分辨质谱技术进行高通量、非靶向效应物质的分析。本发明提高了物质鉴定的特异性和效率，能够应用于环境中与核受体结合的效应物质的快速筛选和结构鉴定，也可以用于药物开发。
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公开(公告)号：CN109085361A
公开(公告)日：2018-12-25
申请号：CN201810775059.6
申请日：2018-07-13
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明涉及一种基于重组核受体蛋白的生物效应物质高通量筛查鉴定方法。利用带标签的选定重组核受体蛋白选择性地吸附到磁珠载体上，再根据核受体与小分子亲和结合的原理，利用重组核受体蛋白特异性地从复杂环境介质中捕获具有结合活性的效应物质，再结合超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱高分辨质谱技术进行高通量、非靶向效应物质的分析。本发明提高了物质鉴定的特异性和效率，能够应用于环境中与核受体结合的效应物质的快速筛选和结构鉴定，也可以用于药物开发。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102936596A
公开(公告)日：2013-02-20
申请号：CN201210304159.3
申请日：2012-08-23
Applicant: 北京大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12N15/85 , A01K67/027 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种青鳉鱼卵巢结构蛋白(OSP1)基因启动子及其应用。将所述启动子连接到PEGFP-1质粒中的绿色荧光蛋白基因上游区域，用显微注射的方式将融合质粒注射到青鳉鱼受精卵中，构建得到转基因青鳉鱼，其能准确，快速，灵敏地指示外源性内分泌干扰物质暴露下造成的青鳉鱼雌雄同体的发生率和发生程度，能够应用于雌激素类物质的快速筛选和环境中雌激素效应物质的检测。
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公开(公告)号：CN1818623A
公开(公告)日：2006-08-16
申请号：CN200510011322.7
申请日：2005-02-07
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明提供一种青鳉鱼受精卵或幼鱼的DNA鉴定性别的方法，属于鱼类胚胎和早期发育研究领域。该方法包括单个鱼卵或幼鱼的RNA和DNA同步提取技术；用Trizol试剂提取RNA后，剩余有机相中加入DNA提取缓冲液，混匀，50℃－75℃温浴后，低温离心10－15分钟，呈现上下两层，取上层水相加入核酸共沉剂，加入无水乙醇，离心，去除上清，酒精清洗，NaOH溶液溶解，调pH至8.0－8.4，得到单个鱼卵或幼鱼的DNA溶液；将提取的溶液作为模板DNA，加入性别特异PCR引物，进行PCR反应，PCR反应完成后，琼脂糖凝胶电泳检测，如出现目的条带为XY型雄鱼，未出现该条带为XX型雌鱼。本发明鉴定准确性高、效果显著。
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公开(公告)号：CN1241018C
公开(公告)日：2006-02-08
申请号：CN03102118.2
申请日：2003-02-08
Applicant: 北京大学
IPC: G01N33/74 , G01N33/535 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种检测环境内分泌干扰物的试剂盒与应用，本发明所提供的试剂盒，包括包被在酶标板上的鲫鱼卵黄蛋白原多克隆抗体、鲫鱼卵黄蛋白原抗原、氧化剂、显色剂、辣跟过氧化物酶标记的鲫鱼卵黄蛋白原抗原、终止液、洗涤液和质控血清。本发明可以灵敏、快速地检测出水域当中可能存在的环境激素及其对生物的综合污染水平，应用非常广泛。
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公开(公告)号：CN1624483A
公开(公告)日：2005-06-08
申请号：CN200310115782.5
申请日：2003-12-02
Applicant: 北京大学
IPC: G01N33/74 , G01N33/551
Abstract: 本发明公开了一种检测环境雌激素效应的试剂盒及其制备方法，本发明所提供的检测环境雌激素效应的试剂盒，它包括包被在酶标板上的鲫卵黄蛋白原多克隆抗体，酶标记鲫卵黄蛋白原单克隆抗体。该试剂盒的制备方法，包括以下步骤：1)制备鲫卵黄蛋白原多克隆抗体，并包被于酶标板上，用BSA封闭；2)制备鲫卵黄蛋白原单克隆抗体，并用酶标记，将标记的抗体与等量甘油混合；3)将步骤1)中得到的鲫卵黄蛋白原多克隆抗体与步骤2)中得到的酶标记鲫卵黄蛋白原单克隆抗体共同包装，得到检测环境雌激素效应的试剂盒。本发明的试剂盒为检测水环境中可能存在的环境雌激素污染行为提供了重要的分析手段和工具。
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公开(公告)号：CN1521507A
公开(公告)日：2004-08-18
申请号：CN03102118.2
申请日：2003-02-08
Applicant: 北京大学
IPC: G01N33/53 , G01N33/535 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种检测环境内分泌干扰物的试剂盒与应用，目的是提供一种较灵敏地检测环境中内分泌干扰物的试剂盒。一种检测环境内分泌干扰物的试剂盒，它包括包被在酶标板上的鲫鱼卵黄蛋白原多克隆抗体和鲫鱼卵黄蛋白原抗原。本发明可以灵敏、快速地检测出水域当中可能存在的环境激素及其对生物的综合污染水平，应用非常广泛。
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